结核病人血清IL17、TNFα、IFNγ的检测及其免疫学意义

1、结核病人血清IL17、TNF、IFN的检测及其免疫学意义                 作者：项杰 章晓联 席淑红 李虹泽 胡加炎【摘要】   目的: 探讨白细胞介素17 (IL17) 、肿瘤坏死因子（TNF）及干扰素( IFN) 在结核病免疫机制中的作用。 方法: 采用ELISA 法测定31 例新发结核未 治疗 病人，25例结核治疗好转病人IL17、TNF,IFN水平,并用26 例正常健康人作对照。 结果: 结核未治疗病人组血清IL

2、17、TNF明显高于对照组( P 0.01) ,结核治疗好转病人组血清IL17、 TNF则明显低于结核未治疗病人组( P 0.01) 。结核未治疗病人组血清IFN明显低于对照组( P 0.01) ,结核治疗好转病人组血清IFN则明显高于结核未治疗病人组(P 0.01) , 结核未治疗病人组和结核治疗好转病人组IL17与TNF呈正相关( r = 0.6605, r= 0.7605，P 0.001) 。 结论: 人体感染结核杆菌后,IL17增高, TNF升高，IFN减低,炎症加重，可能引起免疫功能失衡,是导致结核病的发病因素之一，但经过治疗后,IL17降低, TNF降低，IFN升高，炎症反应减轻，

3、病情趋于好转。 【关键词】   结核; 白细胞介素17; 肿瘤坏死因子; 干扰素人体感染结核杆菌后不一定发病,仅在抵抗力降低时发病。从免疫学观点看,结核病是一免疫紊乱性疾病1。IL17具有强大的招募激活中性粒细胞的作用。体内外研究发现IL17可以促进气道上皮细胞或成纤维细胞释放IL8、GCSF等细胞因子招募中性粒细胞至气道，激活弹力酶和髓样过氧化物酶后间接激活中性粒细胞的活性,促进炎症的形成24。干扰素( IFN)是单核巨噬细胞的强激活剂,能够激活巨噬细胞，促进对结核杆菌的吞噬57，而结核分支杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)感染的单核巨噬细胞则通过

4、TNF依赖的途径引起凋亡8，9。这几种细胞因子可能在结核病的发病机制中起着重要的作用。但结核病人中IL17是如何变化的，与其他细胞因子IFN、 TNF的变化是否有相关性，本组采用ELISA 法测定结核病人IL17 、TNF，IFN水平,以探讨其在结核病免疫机制中的作用。     1  材料与方法    1.1  主要试剂   IL17 、TNF、IFN试剂盒均购自eBioscience 公司   1.2  研究对象   结核病未治疗组为结核病患者31 例,

5、其中男16 例,女15 例,年龄25 65 岁,系2007 年3 月至2008 年11 月我院住院病人。有低热、盗汗、咳嗽、咯血等症状,血像升高，痰培养阳性，结合X线表现或病原学、病 检查确诊病人。结核病治疗组的结核病患者25 例，其中男15 例,女10 例,年龄3075岁,为在我院住院确诊为结核病且经抗痨治疗1个月后病灶逐渐吸收好转者。所有病例均无心、肝、肾等脏器合并症,无糖尿病、肿瘤等免疫相关性或免疫性疾病,4周内未用过激素或免疫调节剂。正常对照组为健康志愿者共26 例,排除心、肝、肾等疾病,其中男19例,女7 例,年龄2260 岁。   1.3  实验方法&

6、#160;  常规收集血清, IL17 、TNF、IFN含量测定采用ELISA 法,按试剂盒说明书操作,在450nm处读取光密度值。   1.4  学处理   用EXCEL 处理数据,各计量资料以x ±s 表示,两样本均数的比较采用t 检验;两因素相关分析采用直线相关分析,检验水准= 0.05 ,以P 0.05 为差异有显着性意义。   2  结果    2.1  结核病人血清IL17的检测结果显示，结核病未治疗组病人血清IL17水平比正常对照组高（P0.01），但

7、经过治疗后，IL17水平明显下降（P0.01）。   2.2  结核病人血清TNF的检测结果显示，结核病未治疗组病人血清TNF水平比正常对照组高（P0.01），但经过治疗后，TNF水平明显下降（P0.01）。   2.3  结核病人血清IFN的检测结果显示，结核病未治疗组病人血清IFN水平比正常对照组低（P0.01），但经过治疗后，IFN水平明显升高（P0.01）。   2.4  血清IL17与TNF的相关性分析   经过对IL17与TNF进行直线相关分析发现,对照组的IL17与TNF

8、无相关性( P 0.05) ,结核未治疗组和结核治疗组病人血清IL17与TNF呈正相关(r=0.6605, r=0.7605，P0.01)。   2.5  血清IL17与IFN的相关性分析   经过对IL17与IFN进行直线相关分析发现,对照组、结核未治疗组和结核治疗组病人的IL17与IFN均无相关性(P0.05) 。              3  讨论    一般认为,结核分枝杆菌侵入机体后,结核病的发

9、生 和转归不仅取决于结核分枝杆菌的数量和毒力,在很大程度上还取决于机体的免疫状态10。结核病患者通常存在免疫功能紊乱,即体液免疫亢进、细胞免疫低下, 但抗结核免疫主要是细胞免疫11。IL17是目前新发现的主要由CD4 记忆T淋巴细胞、单核细胞等分泌的一种前炎性细胞因子，具有强大的招募中性粒细胞、促进多种细胞释放炎性因子、促进细胞增殖等多种生物学作用12，13。最近的研究发现结核病患者体内的T细胞也能够分泌IL17，同时T细胞还是衔接固有免疫与适应性免疫的桥梁细胞，在抗结核感染中发挥重要作用14。因此IL17在招募中性粒细胞聚集感染部位吞噬细菌的同时，也加重了感染部位的炎症反应。我们的结果显示结

10、核病未 治疗 组的患者IL17水平升高，说明炎症加重，但经治疗一段时间后，IL17水平明显下降，炎症反应降低。   巨噬细胞感染Mtb后所发生的反应是产生TNF, TNF对Mtb感染的保护性免疫起着关键性的作用;同时, TNF还是一种多效性的细胞因子,体内适量的TNF对机体抗感染有一定的保护作用,而分泌过多时可致病情恶化9。Mtb通过TNF依赖的途径引起单核巨噬细胞的凋亡,而且TNF在防止持续性TB再燃中有重要作用。   结核杆菌主要寄生在巨噬细胞内, IFN 是单核巨噬细胞的强激活剂,可促使巨噬细胞产生抗菌分子,发挥杀灭结核菌的作用6，7。我们的结果显

11、示,结核病未治疗组IFN比对照组低,但经过治疗后，IFN水平明显升高。   结核病患者大多免疫功能低下,而免疫功能低下又可加重结核病,两者互为因果,造成恶性循环。通过IL17 、TNF的相关性分析发现,在正常对照组中, IL17 、TNF无明显相关性,而结核患者无论是治疗组还是未治疗组血清IL17 、TNF呈正相关,提示人体感染结核杆菌后,IL17 增高，TNF增高,此虽然能够增加粒细胞的聚集与吞噬，但本身也加强了炎症的反应，并可使病情恶化。故两者检测在结核病患者中可作为估计病情及预后的指标。【 参考 文献 】   1 Yew WW, Leung CC. Upda

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