实验二十、植株生长量的测定

1、实验二十、植株生长量的测定指示植物在药剂处理过的土壤中或混药的水溶液中培 养一定时间后，测定植株的生长量，如禾本科植物可测量 叶子长度，阔叶植物可测量叶面积；或将地上部分切下称 其鲜重。抑制光合作用的除草剂常用这类方法。1、去胚乳小麦幼苗法去胚乳小麦幼苗法也是上海植物生理研究所1964年建立的生测方法。这是一个测定抑制光合作用除草剂的专一方法， 与测定这类除草剂的其它生测方法（如番茄法、燕麦法） 相比，它具有操作简便、测定周期短等优点。选择饱满度一致的小麦，浸种2h后，排列在铺有湿滤纸或纱布的搪瓷盘内，在 20 C左右进行发芽。培养3-4天后苗高2-3cm，精选高度一致的幼苗，轻轻取出以免损伤

2、 根部，然后摘除胚乳，在水中漂洗后作为指示生物。以直径4.5cm ,高5.0cm的小玻璃杯作为测定容器，每 杯放入不同浓度的药液3ml和稀释10倍的培养液6ml，每杯插入上述去胚乳小麦幼苗10株。在温度2126C左右，光照下培养67天，测定小麦苗的株高，以株高抑制率来表示除草剂活性。培养液配方如下：硫酸铵3.2g磷酸二氢铵 2.25g硫酸钙0.8g氯化钾1.2g硫酸镁1.2g微量元素0.01g其中微量元素组成为：硫酸亚铁10g、 硫酸铜3g、 硫酸锰9g、 硼酸7g 硫酸锌3g将上述配方加入 1L水中，使用时再稀释 10倍。2、番茄法取20X 120mm的试管，编号。将供试药剂用培养液稀释成

3、一系列梯度浓度溶液，每只试管加入10mm。严格挑选生长健壮，大小高度一致的具2片真叶的番茄幼苗，将主根及子叶剪掉，称鲜重后插入试管，每管24株，在漫射光照射下，25C左右培养2周，然后再取出称重。培养期间 应每天补加蒸发的水分。以生长抑制率来评价活性，求出 EC50，比较活性。生 长 抑 制 率 （）对照每株净增重量对照每株净增重量-处理每株净增重量100番茄法适合于脲类及均三氮苯类光合作用抑制剂的生物测 定，方法灵敏，但培养周期较长，其间要每天补足水分， 比较麻烦。3、燕麦法 将土样烘干。过 lmm 筛后。加入除草剂，使土壤水分 达到最大田间持水量的 60。取 200g 土装人底部带孔的玻

4、璃皿中，播种已催芽露白的燕麦种子10 12 粒，出苗后，定 8 株苗，每天从底部灌水，保持原来的重量，于光照下 培育 14d 后，测定植株地上部鲜重与干重，或幼龄叶片数 及第 2、3 叶片的重量，计算 IC50。本法适于测定均三氮苯类除草剂如阿特拉津、西玛津 以及取代脲类除草剂的活性，淋溶及持效期等。前者灵敏度 0.05-0.1ppm，后者为 0.1-0.3ppm。此外，也可测定幼苗的含水量、水提取物的导电性及 中性水溶性物质重量及其占干重的百分数。由于抑制光合作用除草剂引起植物蒸腾作用下降（气 孔关闭引起的） ，而根系吸水不受影响，因此，在鲜重与干 重明显下降之前，植物体内含水量反倒明显增加

5、。因此， 可用幼苗含水量作为生测指标一此类除草剂也使植株体内中性水溶性物质（碳水化合 物）的含量在干鲜重下降前明显下降，因而可以测定中性 水溶性物质（糖）的含量为生测指标，比测定干鲜重更为 灵敏。4、叶鞘滴注法Tarlor 和 Loader（ 1 984）为了筛选有效的防治野燕麦的除草 剂混剂，设计了一种快速，简便的除草剂生测方法叶 鞘滴注法。当正常生长的燕麦长至 1 叶 1 心时，在第一叶张开的叶鞘 里滴加10ul供试的一定浓度的除草剂。24-48h后，切下2cm长的一段，插入清水洋菜培养基。再经24h （此时对照叶 片伸长约1113 mm）取出测量每一剂量处理的叶片延伸长 度，并评判除草剂

6、活性。5、萝卜子叶法将萝卜籽插入整滤纸的培养血中，加适量水，加盖后 在27C培养箱中黑暗培养 30h，从幼苗上切下子叶备用。 在盛有用磷酸盐缓冲液配制的不同浓度的除草剂（510ml）溶液中放入10片大小均匀的子叶，加盖后在25 27C 温室或生长箱中。光照强度为 2 000 3000LX 的光照下连 续培养 3d 后。称鲜重并测定叶绿素含量，计算 IC50。 本法适于测定触杀性及影响氮代谢的除草剂。6、再生苗侧重法。将生长均匀一致的 10 株香附子块茎移植到盆钵中。 二 周后生长正常时， 分别用不同浓度的草甘磷处理香附子叶， 一周后剪除香附子茎叶（距上表 1cm）,再过一个月左右测 定再生苗的

7、鲜重，这样可反映传导性除草剂对地下部分再 生能力的抑制程度。 也可用玉米做试材，将玉米将播种在统一型号盆钵中，当 幼苗 3 叶期时喷施草甘磷， 24 小时后剪去叶片，一周后测 定再生苗的鲜重，比较不同处理间的再生力。7、茎叶浸渍法：该法适用于茎叶处理剂的筛选和测定。方法是取一个底部带孔的啤酒杯， 装满潮湿细土 （肥沃土壤较好） 后压 实，再用塑料薄膜包住整个杯上并用橡皮筋扎紧，以防止倒置浸药时杯中 土壤散落。其后在薄膜上沿杯边缘戳若干孔穴。每穴播入2-3 粒供试植物种子并用土覆盖好，然后从底部渗入水保持土壤湿润。供试植物长至2-3叶期时进行间苗，每穴保苗 1 株苗。待植物长至需要大小时，进行浸

8、药处 理。浸药时间各处理之间力求一致。药剂处理数天后可揭去薄膜。实验二十二 杀菌剂保护作用和治疗作 用的测定 本试验法是属于第二大类的试验方法，是用病菌寄主植物 的叶片或果实来测定，比孢子萌发试验法、抑制菌圈法、 生长速率法等更接近田间实际情况。 保护作用的测定原理是先在供试叶片或果实上喷供试药 液，自然干燥后，在叶片或果实上接供试菌保湿培养一定 时间检查结果。 治疗作用的测定原理是先在供试叶片或果实上接供试菌保 湿培养 24 小时让病菌侵入进去但还没有表现出症状。 然后 喷洒供试药液，药液干燥后保湿培养一定时间检查结果。 供试菌种 ：香蕉炭疽病菌（纯培养 7 天） 供试药剂 ：75%百菌清

9、WP： 1 000； 1 00ppm50%多菌灵 WP：1000； 100ppm 实验材料 ：束针镊子三角板烧怀量筒移液管蜡笔棉花保湿箱吸耳球小玻管0 5mm供试作物:香蕉果实（成熟度适中）操作方法:1 、香蕉的准备：从田间采摘大小老嫩一致的香蕉果实， 用清水洗净凉干备用，可以使用乙烯利催熟。2 、供试菌饼的制备：用 $ 5mm勺灭菌小玻管打菌饼, 菌饼要完整无缺且不拖尾巴。3 、药液的配制：4 、保护作用的测定：每支香蕉刺分上中下3个点（深浅一致，等距离），用束针刺伤香蕉的表皮，然后用镊子夹棉花球沾取不同浓度药液均匀涂抹在香蕉上，对照涂清水，自然凉干后，在刺伤部位接菌饼，（菌丝一面朝下，棉花

10、保湿），每处理接种3条香蕉，处理好后的香蕉四周放湿棉花 条，再放入保湿箱中保湿培养3-7天检查结果。5 、治疗作用的测定：每支香蕉分上中下3个点（深浅一致，等距离），用束针刺伤香蕉的表皮，然后在刺伤部位 接供试菌饼（菌丝一面朝下），四周放湿棉花条并放入保湿 箱中保湿培养24小时后，取出凉干，用镊子夹棉花球沾取 不同浓度药液均匀地涂在香蕉上，对照涂清水，待药液干 后，再放在保湿箱中保湿培养3-7天，待对照全部发病即可检查结果。结果检查:I 、视察各种点发病情况，求发病率或量病斑直径大小（十字交叉量仅平均值）再按分级标准计算发病严重度，根据发病率或病情指数求防治效果。发病点数100发病率（% =接种点Z （病级斑点数沃该病级值）100病情指数=接种点数 最咼级值防 治 效 果（%）对照组病指（发病率）对照组病指（发病率）-处理病指（发病率）汇00病斑分级标准:0级匕病斑直径为01级匕病斑直径在5mm