多功能转录因子――阴阳因子―1研究进展

1、 维普资讯 国外 医 学 遗 传 学分 册 19 年 98 第2 1卷 第 1期 S F 占有 优 势 , S F结合 并激 活转 录 .在体 R 则 R 件下被掩蔽 , 同一 于 这 一 观 点 , YY1的反 式 激 内可能 许多 转 录 因子 成 功 地竞 争并 替代 了 活 区 域 用 一个 异 源反 式 激 活结 构 域 代 替 , YY1 YY1因子 .正负调 控 因子 的竞 争 由这些 因子 的 仍 表现 为一个 阻遏 因子 .E A 同 YY1P 0 1 / 30发 相对 浓 度 而 导致 净 阻 遏 或 净激 活 活性 , 种竞 生 作 用后 , 得 YY1产生 构象 变 化

2、 , 反 式 激 这 使 其 争方 式提供 了 基因表 达更加 严谨 的调控 0 . 动 蛋 白 基 因 表 达 受 到 YY1和 S F 的双 重 调 R 节 在 血 清 淀 粉 样 蛋 白 A1启 动 子 上 , Y1 1 Y 活 区 域暴 露 出来 , YY1即 由阻 遏 因子 而 转换 为 NB 3蛋 白 . c结 合 于 Y 2 cmy Y1后 , 象 也 E1 一样 , YYl 能发生 转换 . A 使 功 结 语 类 似 于 cfs启动子 的情 形 , o 骨骼肌 骨 一 肌 激 活 因子 0 . 同 NF B竞争 ; e珠 蛋 白基因启 动子上 , YI X 在 一 Y 与 G

3、A A 1 争 ; T 一 竞 在 酪蛋 白上 , Y1 Y 同乳 自从 19 发 现 转 录 因子 YY1以来 , 9 1年 对 腺 因子 ( mmaygadfco , ma r ln atrMGF 竞 争 . 它 进行 了大 量的研 究 , 对其 结构 , 功能 以及两 者 Y Y1参 与 发 育 调 控 的 另 一 个 原 因 是 基 因 关 系有 了更 加深入 的 了解 .但对 某些结 果 的解 的 甲基化 状 态 , 然 Y 虽 YI因子在 分 化及未 分化 的细 胞 中都表 达 , 但对 于其 结 合 基序 上 G 被 甲 释 是 矛盾 的 和 推 1 性 的 , 蜊 相信 随着

4、更 加 精细 研 究的进行 , 终会从 分子 水 平阐 明其作 用机 制 , 最 必将对 整个真 核 基因表 达调 控规 律的全 面理 解 基化 的反 应 元 件 , YY1亲 和 力 显著 下 降 , 着 随 不同, YY1 合基 序 上 含 有 G 残 基 , 残 基越 结 G 发 育 阶段 胛 不同 , YI因子发 挥 作 用 的潜 能也 ' 有裨 益 . Y 大 参 考 文 献 1 Shi e 1 Ce l 19 1; 7: 7 Y ta . l, 9 6 3 7 多, 甲基 化 程 度越 低 , 有 利于 YYl因子 的 结 越 合 , 之 , 会影 响到 YY1与其 结 合

5、 基 序 闻 的 反 则 相 互作 用口 . 可 以看 出 , 种机 制 包括 结合 位点 甲基化 , 各 Y Y1因子 对 D NA结 合 基 序的 亲 和 力变 化 , 额 2 GuoB ta. e 1PNAS. 9 9 1 5 6 19 5; 2: 0 2 5 S ta a y m rhy K ta . CdlBi , 9 3I 5 6 2 t e tM o l 9 1 : 61 4 Ri, g sKJe tM o (elBil 1 9 ; 1I 7 5 ta. t :l o , 9 1 1 1 6 5 r ,At hio I PNAS 鲫 l; 8. 8 4 kK c snM l 8

6、9 0 外 因子 的加 入 , 可能 调节 了 Y YI因子 在 分化 和 发育上 的功 能多样性 . 4 蛋 白 问相 互 作 用 及 YYl功 能 逆 转 . 6 Ha i a a e l N AS, 9 1; 8: 7 rh r a N ta P 1 5 8 9 95 7 Flna a 】 tatM CelBi19 2; 2: 8 a g n R e . l o t 9 1 3 8 Gua b r o A t a . o e t e 1 M lCt Bi I 19 2; 2: 2 9 儿 0 . 9 1 4 0 YY1同其 他反 式 作 用 因子 间竞 争 对 D NA 的 结 合是 其

7、 抑 制转 录 的 一个 机制 .研 究 发现 , Y 在 与 DNA 直接 或 间接 结合 时均能 发挥 阻 Y1 遏转 录 作 用 , 能 源 于 与 其他 蛋 白发 生相 互作 可 用 .事实上 , YY1同其 他蛋 白发 生相 互作 用 是 9 Bu h e e s m y rS.JB . e ,1 9 2 0: 2 il Ch m 9 3, 7 30 15 i Ri g 0 g s KL t · o l Bi l 19 3, 4 e at M lC c · 93 1 7 87 e L 1 s rv s a a A .Ca a Nu l i 5 Re 1 h ia

8、t v l me K. c dc Ac d s,1 4I 2 99 2 5 5 1I 1 S ng rM F ta Ge e 1 3; 3 1 3 2 i e e l n t 99 1 5 8 1 Ch 3 ur S,Pe r g r y RP. c ec Acd st19 3 2 3 1 Nu ti is Re 9 ; 1 3 0 调节 其功能 的重 要机制 . 在腺病 毒 E A 不存 在 I 时, YY1抑制 转录 , 在 El 而 A存在 条件 下 , YY1 激 活 转录 , 来 YY1是 一 个转 换 蛋 白 , 不 同 看 在 1 M a t nW R ta. ilCh m ,

9、9 4I 6 1 7 4 4 eel L a e 1J Bn e 1 8 9: 6 5 2 1 Pees B e 1JBltCh m , 9 3 2 8: 4 0 5 tr ta. o e 1 9 ; 6 3 3 1 M e盯 V S, O i Mo , 6 j Gt B t B ICd【Bi 【 1 4; 4: 2 o , 99 j 1 8 1 I SY ta . o 7 e 】 M lCd【B o【 1 9 1 6 5 i , 9 4I 4l 2 3 I Hy e De y h rRP e . u l i i s Re , 99 3 8 d Ru e 【 N c ec Acd s 1 5I

10、 2 4 57 4 1 I u R 札 a . c ec Ac 9 j 1 Nu l i MsRe , 9 2 2 5 s 15 4; 2: 4 3 条 件 下 , 有 不 同 的功 能 口 具 .现 已 知 , A 与 E1 YY1 生作用 必须通 过一 个 中闻蛋 白 P 0 , 发 3 0 即 先由 P 0 30与 YY1 成 一个 复 合物 , 由 E A 形 再 1 与 P 0 发 生联 系来间 接影 响 YY1活性 口 .在 30 缺乏 E1 A条 件下 , Y1 为一个 转录抑 制 因子 Y 作 而结 合 在转 录起 始 点上 游 .尽 管 Y YI的 N 端 包含 有 一 个转

11、 录 激 活结 构域 , 可 能 在抑 制 条 但 2 Ba A ta. 0 0 1JBi】Ch m , 9 3; 6 4 8 e 1 9 2 8:1 8 2 S t e t Na u 1 c o E ta . t , 9 l l; 5 4 3 4 21 2 Us e a A. e k T el l 9 7 l 5 2 h v Sh n C I, 9 4; 6: l 2 Sh in t v e t s i e 19 3I 6 1 8 3 r v s a a A ta . ce c , 9 2 2: 8 9 2 L eJ n tN u li 4 e S a . cecAcd s 1 9 2 9

12、5 isRe , 9 5| 3: 2 ·l · 5 I 帅 2 Le S 肮 a . 5 el 1PNAS.9 Ot 1 5 1 93 9 6 荔 , 唆 f , 阮力 19 年 98 第2 卷 1 维普资讯 国外压学遗传学分册 簟1 期 28 G u co nL e 1 M d U Bi| 99 12 4 1 m i ta. o .1 2I 9 9 2 Ya S e l cecAc ,Re , 9 5 3 3 3 6 m R t|_ Nu li i d s 1 9 | 3 4 5 2 Na e i n M 五 G蚰 e v 1 9 7I 4 7 t s n StG l m

13、a B De , 9 3- 2 97 3 I tJ la. n sD , 9 5 9 1 8 9 上 Se IGe e : 1 9 I 1 8 f 卜一 胚胎 干 细胞 培 养特 性及 其分 化 能力 的研 究进 展 第二 军 医大 学生物 学教研 室 ( 海 2 0 3 上 o 4 3 提要 I 2 综述 傅 继 梁审校 转基因动枷在现代 生命科 学研 览的各个领域都有 着广阔的应 用前 景 . 而通过胚胎 干如胞 基因打靶 逢径 制鼻转基 因小 鼠又是 目前社 普遍采用的方法之一 . 奉文 目的在 于对小鼠胚 胎干知胞 的培葬特性 , 向分化潜 能 多 及 体 外 诱 导 分化 方 面 的

14、 研 究现 状 作一 蝣 速 . 胚 胎干 细胞 (e ro ise cl E mby nc tm e1.S 是 从者 床 前胚 胎 ( 3 5天 内细 胞 群 (n e 孕 的 inr cl masI M 离得 到 的 , 在 体外 培养 的 el s,C 分 能 一 1 9品 系 , 要 原 因在 于 1 9品 系是 畸 胎 瘤 高 2 主 2 发小鼠, 自发率高 达 3 , 株较 为容 易 . 0 建 直接 从 早 期胚 胎 建 立 E S细胞 系的 方 法 有多 种 , E v n 和 Ka f n 采 用的方 法 是 : 小 鼠受 as uma 口所 在 种高度未分化的细胞.最早在

15、18 年 , 9 1 英国 剑 桥 大 学 的 E as和 Kaf nl 延 缓 着 床 vn uma _用 的胚 泡 , 国加 州大学 旧金 山分 校 的 Mat 美 ri 2 n 精 25 后切 除卵巢 并结合 激素诱 发 延缓胚 泡 .天 着 . 和体 外培养 这种 胚泡 , 果滋 养外胚 收集 结 层细胞 贴壁生 长 , I 细胞 发育 成 卵柱状 结 而 CM 构 . 显微镜直 视下挑 出这 种柱状 结构 . 在 胰酶 消 用条件培养基分别成功地分离 , 体外培养 了小 鼠的胚胎干 细胞 除 小 鼠外 . 还有 金黄地 鼠, 猪 和牛 等动物 的胚胎 干 细胞 系的建 立取得成 功

16、的 报道 . 5 T o o 口等从 恒 河猴 的囊 胚 中 19 年 h msn 9 分离 , 建立 了 E S细胞 株 . 这是 第一 个 建株 的灵 长类动物 的胚 胎干 细胞 . S细 胞系 的建立在 培 E 化 后继续培养, 传代 . 小 鼠胚胎干 细胞 具有细 胞 的特征 : 大 , 核 胞 浆 少 , 外培 养 时 , 胞 排列 紧 密 . 体 细 呈集 落 形生 长, 在集 落边缘 有 时可见有 少量 的 已分 化细 胞 , 形 态 为扁 平上 皮 细胞 样 或 棱形 成纤 维 细 胞 样 . E S细胞 体 外培 养 工作 要 求在 严 格 的 无菌 条 件 养 的细 胞与

17、个 体 发育 之 间 架起 了桥 梁 . 体 细 在 胞与 生殖 细胞之 间架起 了桥 梁 . 目前 , 已在个 它 体 发育 研 究 , 目的功 能 研 究 以及 制 备转 基 因 基 动物等 许多 医学研 究领 域 中发 挥着重 要作 用 . 一 下进行 , 所使用的器皿 , 试剂都必须是无菌且彻 底清 除去 垢剂 的.常 规培养 液为含 有 白血病细 胞抑 制 园子 ( I , 牛 血 清 , 一 氨酸 , 必 I F胎 L各 非 需 氨 基酸 ( AA丙 酮 酸 盐 , NE , 琉 基 乙醇 , 各 氨 酰胺 以及 高浓度 葡 萄糖 的 D M1.其 中 . ME . 值得 注意 的是胎 牛血 清的浓 度及其 质量 是影响 E S细 胞生 长状况 的重 要 因素 , 高 浓度 的胎牛 过 血 清并 不利 于 E S细 胞 的生 长 , 同时 , 同批号 不 的胎 牛血 清对 促进 E S细 胞的 生长 繁殖 具 有 不 , 胚 胎干 细胞 的特性 研究 E S细 胞 显著 区别 于其 它 细 胞系 的两大 特 性在 于 : 先 . 直接 从 小鼠早期 胚胎 分离建 首 它是 系 的 , 以它 像胚 胎细 胞 那 样具 有 发育 的全 能 所 性 , 常二 倍染色 体 , 广泛 参与宿 主胚胎 各 含正 能 组 织器 官 的生 长 , 发