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文档简介
1、基因工程 、选择题(每小题1.5分,共15分)1 基因工程的创始人是()。A A. Kornberg B W. Gilbert C P. Berg D S. Cohen2 关于宿主控制的限制修饰现象的本质,下列描述中只有() 不太恰当。A由作用于同一 DNA序列的两种酶构成 B这一系统中的核酸酶都是H类限制性内切核酸酶C这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰D不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统3 .在DNA勺3' -5 '链上,基因的起始密码子是 ()A ATG (或 GTG B AGT C TAG D TGA4.11限制性内切核酸酶可以特异性地识别()A双
2、链DNA的特定碱基对B双链DNA的特定碱基序列C特定的三联密码D以上都正确5.末端转移酶是合成酶类,具有() 活性。A3'>5' DNA聚合酶B5'>3' DNA聚合酶C5' >3' DNA内切酶D 5' >3' DNA外切酶6 .下面关于松弛型质粒(relaxed plasmid)性质的描述中,() 是不正确的。A质粒的复制只受本身的遗传结构的控制,因而有较多的拷贝数。B可以在氯霉素作用下进行扩增。C 通常带有抗药性标记。D 同严紧型质粒融合后,杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子。7 .关于cDNA的最正
3、确的说法是()。同mRN短补的双链DNA以上都正确A同mRN短补的单链DNABC以mRN的模板合成的双链 DNA D8 .关于T4 DNA Ligase,下列说法中哪一项不正确 ?()A是最常用的DNA连接酶。B不但能连接粘性末端,还能连接齐平末端。C不但能连接粘性末端。D最适温度37 °C9 下列关于建立 cDNA文库的叙述中,()是错误的?A从特定组织或细胞中提取 DNA或 RNA B用反转录酶合成mRNA勺对应单链DNAC以新合成的单链 DNA为模板合成双链 DNAD新合成的双链DNA克隆到载体上,并导入受体细胞10 用下列方法进行重组体的筛选,只有()说明外源基因进行了表达。
4、A Southem blot B Northem blot C Western印迹 D原位菌落杂交、填空题(每空1分,共25分)1 .限制性内切核酸酶分为三类,基因工程中应用的是 。2 .为了防止 DNA的自身环化,可用 去双链DNA3. 切口平移(nick translation) 法标记DNA探针时应用的酶是_ _。4 基因工程中的3种主要类型的载体是 、。5野生型的M13不适合用作基因工程载体,主要原因是 、和。6 .黏粒(cosmid) 是杂合载体。7 引物在基因工程中至少有4个方面的用途:(1)、 (3) 址 8. Northern印迹和Southern印迹有两点根本的区别:(1)、
5、,(2) PCF反应中常用的酶是 一。-2 -DNA三个部分9. 感受态的大肠杆菌细胞在温度为 时吸附DNA,时摄人外源10. 用碱法分离质粒 DNA时,染色体DNA之所以可以被除去,是因为 。11. 除具有较低的分子量外,一个理想的质粒载体必需包括 、_12. 转基因植物操作中常用的载体是 。13. pcDNA3.1 用于。三、名词解释(每小题 4分,共20分)1 目的基因:2 .基因工程:3 .载体:4. Western 印迹:5 .核酸分子杂交:四、简答题(每小题10分,共20分)1. 基因工程的基本操作程序 ?怎样制备目的基因?-3 -基因工程评分标准与参考答案一、 选择题:每小题1.
6、5分,共15分;多选不得分。1d; 2b; 3a; 4b; 5b; 6c; 7c; 8c; 9a; 10c二、填空题:每空1分,共25分1 . II类酶。2 碱性磷酸酶;5'端的磷酸基团2. DNA聚合酶 I。4 .质粒DNA病毒DNA质粒和病毒 DNA杂合体5 没有合适的限制性内切核酸酶识另U位点;选择标记6 .质粒和噬菌体7 合成探针;合成cDNA用于PCR反应;进行序列分析8 .印迹的对象不同:Northern是RNA Southern是DNA )电泳条件不同,前者是变性条件,后者是非变性电泳9. Tag DNA聚合酶10. 0 C; 42 C11染色体变性后来不及复性12 .复
7、制起点;选择标记;克隆位点13. Ti质粒14 .外源基因导入哺乳动物细胞三、名词解释(每小题 4分,共20分)1 .在基因工程中被操作的DNA序列;又称外源基因(foreign gene/exogenous gene),主要是指编码蛋白质的结构基因(structuralgene);它们可以从自然界中已有的物种基因组(genome)中分离出来,也可以用人工的方法合成。2 按照人们的意愿,进行严密的设计,通过体外DNA重组和转基因等技术,有目的地改造生物种性,生产生物活性物质,甚至创造新物种的技术。3 携带外源基因进入受体细胞的DNA分子。3. Western印迹是将蛋白质经电泳分离后从凝胶中转移到固相支持物上;然后用特异性的抗体进行检测;可说明基因是否进行了 表达。4. 用标记的探针检测出 DNA或 RNA同源序列的技术;原理是碱基互补;常用的有Southern blot 、Northern blot 和原位杂交。四、简答题(20分)1 .目的基因的制备;目的基因与载体连接;目的基因导入受体细胞;目的基因的表达与检测。或者:转、接、切、增、检(加以 解释)。2 .直接分离法、构建基因文库分离法、PCR扩增法、人工合成法等。(加以解释)五、实验与论述题(20分) 由于基因已被测序,可通过RT-PCR方法克隆该基因; 也或通过基因文库分
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