邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验

1、中国矿业大学银川学院邻二氮菲分光光度法测定 微量铁实验王赵蒙2013/10/26摘要:本文采用邻二氮菲分光光度法,该方法具有灵敏度高、操作简单、重现性 好等特定,效果令人满意摘要 :本文采用邻二氮菲分光光度法,该方法具有灵敏度高、操作简单、重现性 好等特定,效果令人满意关键词 :邻二氮菲 分光光度法 微量铁测量 吸光度目录2. 结论与思考 . 73. 参考资料 . 7铁与人类的生活密切相关, 也是维持人体新陈代谢必不可少的微量元素之一, 是构成血红蛋白、 肌红蛋白以及多种酶的重要成分, 若缺少铁, 可影响血红蛋白、 肌红蛋白的合成, 使某些酶的活性降低, 引起人体生理上的变化, 导致免疫力下

2、降, 智力降低和机体抗感染能力降低等各种疾病的产生。 铁广泛的存在于各类动 物性和植物性食品当中,如动物的肝脏、全血、肉类、蛋类、枣、苹果、山楂、 木耳、 海藻等食品中都含有大量铁, 此外部分果汁、 牛奶、 酸奶中也含有微量铁。 因此对于微量铁的检测尤为重要, 目前测定微量铁的方法主要有分光光度法、 荧 光法、原子吸收法,本文采用邻二氮菲分光光度法,邻二氮菲是一种显色剂,在 pH=2.09.0的溶液中能与 Fe 2+形成橙红色络合物,该方法具有灵敏度高、操作 简单、重现性好等特定,效果令人满意。1. 实验部分1.1实验原理邻二氮菲 (Phen 是测定二价铁离子的一种高高灵敏度、 高选择性显色试

3、剂, 在 pH=2.09.0的溶液中能与 Fe 2+形成橙红色络合物 Fe(Phen32+,反应方程式如 下: 此络合物的 lgK 稳 =21.3(20 0C , 摩尔吸光系数 max =1.1×104L ·mol -1·cm -1。 稳定性常数 2.0×1021,铁含量在 0.16g ·ml -1范围内遵循比尔定律。在还原剂 存在下,颜色可以保持几个月不变。邻二氮菲可与 Fe 3+生成配位比为 3:1的淡蓝色配合物,其稳定性常数为 1.2×1014,因此在使用邻二氮菲测定铁时,显色前应先用还原剂如盐酸羟胺 (NH 2OH ·

4、;HCl 或对苯二酚将 Fe 3+全部还原为 Fe 2+。 本文采用盐酸羟胺为还原剂, 还原反应为:4Fe 3+2NH2OH=4Fe2+4H+N2O+H2O其显色反应的适宜 pH 范围很宽,且其色泽与 pH 无关,但酸度高时反应进 行较慢, 酸度低时二价铁离子会水解, 所以为避免 Fe 2+水解及其他杂质的影响并 且保持较高的反应速率, 通常在 pH 约为 56的 HAc NaAc 缓冲介质中进行测定。利用分光光度法进行定量测定时,通常选择吸光物质的最大吸收波长 max 作为入射波长, 因此时测得的摩尔吸收系数最大, 即测定的灵敏度最高。 测定吸 光物质在不同波长下的吸光度 A ,绘制 A 吸

5、收曲线,即可求得该吸光物质的最大吸收波长 max 。标准曲线法是定量测定中最常使用的方法。 先配制一系列不同浓度的被测物 质的标准溶液,在选定的条件下显色,在最大吸收波长下测定其相应的吸光度, 绘制 A c 标准曲线。根据朗伯比尔定律:A=bc ,标准曲线应为一条斜率为 b 的过原点的直线。另取试液经适当处理后,在与上述相同的条件下显色、测 定,由测得的吸光度从标准曲线上求出被测物质的含量。1.2仪器和试剂1. 仪器:722型分光光度计 50ml 容量瓶 7只 吸量管(10ml 两支、 5ml 两支、 1ml 一支 比色皿(10mm 、 20mm 各一 移液管(1ml 两支、 2ml 一支、

6、5ml 一支 电子天平2. 试剂:铁标准溶液(100.0g/ml邻二氮菲溶液(1.5g/L盐酸(6mol/L盐酸羟胺溶液(100g/LHAc NaAc 缓冲溶液(pH=4.6未知浓度铁待测液1.3实验内容在序号为 16的 6只 50ml 容量瓶中用吸量管分别加入 0.00、 2.00、 4.00、 6.00、 8.00、 10.00ml10ug/ml铁标准溶液,均加入 1.0ml 盐酸羟胺溶液,摇匀放置 2min 后,各加入 2.0ml 邻二氮菲溶液、 5ml HAc NaAc 缓冲溶液 , 加水稀释,定容,摇 匀,放置 10min 。用吸量管加入 5.00ml 待测溶液于 7号容量瓶中,加入 1.0ml 盐酸羟胺溶液, 摇匀放置 2min 后,加入 2.0ml 邻二氮菲溶液、 5.0ml HAc NaAc 缓冲溶液,加水 稀释,定容,摇匀,放置 10min 。使用 1cm 吸收池, 以 1号空白溶液为参比, 用