药物中阴离子的定量分析

1、药物中阴离子的定量分析摘要：本文采用两种阴离子交换柱和抑制电导检测法来分析药物中的常见阴离子。选择两种口服药物作为代表：一种咳嗽药，一种感冒药。其组分包含糖醇、乙二醇和糖类，可以用IonPac. ICE-AS1, CarboPac. MA1，和CarboPac PA10色谱柱用电化学检测器分析。比较了IonPac AS14 和AS11色谱柱对药物中阴离子的选择性。AS14填料采用高度交联的基核，表面有阴离子交换层。 关键词：阴离子交换柱；抑制电导检测法；口服药；AS14填料 美国食品药品安全局（FDA）和其他国家的法规制定机构都要求对药物组分进行检测，以检验其均一性、药效、质量及纯度等，并且越

2、来越注意其活性和非活性成分。既能够检测生色成分又能够检测非生色成分的分析技术是非常有价值的。其中，非生色成分中有很多是离子型的，不能用吸光度法检测，但可以用抑制电导法检测。抑制电导是一种有效的检测技术，线性范围宽，检测限低。抑制器可以降低淋洗液的背景电导，并有效提高分析物的检测电导。 本文使用两种阴离子交换柱和抑制电导检测法来分析药物中的常见阴离子。选择两种口服药物作为代表：一种咳嗽药，一种感冒药。其组分包含糖醇、乙二醇和糖类，可以用IonPac. ICE-AS1, CarboPac. MA1，和CarboPac PA10色谱柱用电化学检测器分析。本文比较了IonPac AS14 和AS11色

3、谱柱对药物中阴离子的选择性。AS14填料采用高度交联的基核，表面有阴离子交换层。阴离子交换层可以与烷基季胺盐结合，对憎水基团具有选择性。而AS11填料是在聚乙基苯乙烯表面结合烷基季胺盐。另外一个不同点是AS14色谱柱适用于等度淋洗条件，而AS11可以用氢氧化物梯度淋洗。两种色谱柱都可以使用有机溶剂淋洗液，以减少某些有机阴离子与固定相的二级反应。AS11色谱柱的检测限、线性、选择性、准确度以及精密度已有报道。 1 实验部分 1.1 仪器 Dionex DX-500系统，包括GP40 梯度泵（含排气）；CD20 电导检测器或ED40电化学检测器；LC30 或LC25 恒温箱或LC20；AS3500

4、 自动进样器；PeakNet 色谱工作站； 碳酸钠，Sodium carbonate, 0.5 M (Dionex P/N 37162) 碳酸氢钠，0.5 M (Dionex P/N 37163) 氢氧化钠， 50% (w/w) (Fisher Scientific,P/N SS254-500) 去离子水，18 M-cm或者以上（建议事先检测） 糖精（邻磺酰苯甲酰亚胺），（Sodium salt; Sigma Chemical Co.，P/N S-1002） 1.2色谱条件 体系1： 色谱柱：IonPac AS14 分析柱（P/N 46124）， IonPac AG14 保护柱（P/N 461

5、34） 淋洗液：3.5 mM碳酸钠+0.8 mM 碳酸氢钠 流速：1.2 mL/min 进样体积：10 L 检测模式：抑制电导ASRS.， 期望背景值：15 S 期望操作反压：12.4 MPa (1800 psi) 体系2： 色谱柱：IonPac AS11分析柱（P/N 44076），IonPac AG11保护柱（P/N 44078），ATC-1 Anion 捕获柱（P/N 37151）淋洗液：氢氧化钠梯度淋洗 时间min ： 02.5 2.56 618 1825 浓度mM： 0.5 0.55 538 0.5 流速：2ml/min 进样量：10l 检测模式：抑制电导ASRS，自循环模式 期望背

6、景值：0.5 S 期望操作反压：12.4 MPa (1800 psi) 1.3样品制备 将粘稠的样品用水稀释10倍（w/w），多效感冒药稀释100倍。表中的黑体成份可以用阴离子交换柱和抑制电导检测，其余的可以用CarboPac柱分离并电化学检测。 需要测试稀释用的水中痕量阴离子的含量；需要测试样品容器中的残留阴离子。一般塑料制品比玻璃制品残留阴离子低。用纯水清洗可以减少残留。 图 1 阴离子的分离图 2 分离有机物和无机离子2结论与讨论 图1是氟离子、醋酸根、氯离子、硝酸根、磷酸根、硫酸根的分离色谱图，使用IonPac AS14柱，3.5mM碳酸钠0.8mM碳酸氢盐淋洗。这种等度淋洗条件不需要

7、平衡柱子，因而缩短了运行时间并提高了工作量，可以在14分钟内分析完。柠檬酸盐、苯甲酸盐和邻磺酰苯甲酰亚胺不用这种方法淋洗。 使用IonPac AS11柱，氢氧化钠梯度淋洗，分离无机离子、醋酸盐、柠檬酸盐、苯甲酸盐和邻磺酰苯甲酰亚胺（见图2），尽管梯度淋洗增加了时间，但是有机物和无机阴离子的分离度很好；如果调节淋洗液强度，即使缩短了分离时间，但是牺牲了氟离子和醋酸根之间的分离度。 邻磺酰苯甲酰亚胺一次进样超过1000ng时会大大缩短保留时间，从而产生与柠檬酸盐的共淋洗，此时，二者的浓度在10L进样时都要调至100mg/L以下。邻磺酰苯甲酰亚胺峰会拖尾，可以在淋洗液中加入有机溶剂（例如，10乙腈）。加入乙腈会改变柱子的选择性，降低峰面积，增大噪音。 已经使用IonPac AS14和AS11柱和抑制电导分析了很多的药物（包括固体和液体样品）如鼻子和口腔的抑制剂，收敛剂，抗酸剂，灌肠剂，安眠药，镇痛药，清洁洗剂，抗组胺剂，过敏糖浆等。其中的已知阴离子互相没有干扰。 3 结论 使用IonPac AS11柱，抑制电导可以分析药品中的有机物和无机阴离子，例如氟离子、氯离子、溴离子、硫酸根、硝酸根、磷酸根，以及苯甲酸根、山梨酸酯、柠檬酸盐、和邻磺酰苯甲酰亚胺等。而IonPac AS14柱适用于分离一般的阴离子，不适合分离有机物（醋酸盐除外）。IonPac AS14柱使用等度淋