四种性病病原体感染16450例的分子流行病学调查

1、四种性病病原体感染16450例的分子流行病学调查    【摘要】目的nbsp;调查CT、UU、NG、HPV等性病的流行病学状况；方法nbsp;对江西省12家市级医院性病门诊就诊的16450例泌尿生殖道感染患者留取的分泌物采用荧光定量PCR方法检测CT、UU、NG、HPV-DNA结果；结果nbsp;12733例男性标本中CT、UU、NG、HPV阳性率分别为1     四种性病病原体感染16450例的分子流行病学调查 陈雪礼1)  陈越1) 刘晓峰1)  史国香2)   黄震1)

2、 (1)九江市第一人民医院检验科，九江332000  2)广东中山大学达安基因诊断中心) 【摘要】目的 调查CT、UU、NG、HPV等性病的流行病学状况；方法 对江西省12家市级医院性病门诊就诊的16450例泌尿生殖道感染患者留取的分泌物采用荧光定量PCR方法检测CT、UU、NG、HPV-DNA结果；结果 12733例男性标本中CT、UU、NG、HPV阳性率分别为16.4%、9.1%、7.1% 、6.5%；3717例女性标本中CT、UU、NG、HPV阳性率分别为22.0%、21.1%、10.5%、2.1%。CT+UU混合阳性检出率6.3%；CT+NG混合阳性检出率为0.6%；CT+H

3、PV混合阳性检出率为1.4%；UU+NG混合阳性检出率为3.4%；UU+HPV混合阳性检出率为3.7%；NG+HPV混合阳性检出率为0.7%；两种以上混合感染例数的阳性检出率为1.0%。2002、2003年阳性检出率分别为37.1%、48.5%。     结论  江西省CT、UU、NG、HPV4种性病病原体的流行较为严重，总阳性检出率为42.8%，且有逐年增长的趋势。 【关键词】 性传播疾病  沙眼衣原体 解脲支原体 淋球菌 人乳头瘤病毒  流行病学  FQ-PCR   EPIDEMIOLOGY 

4、; INVESTIGATION  IN  16450  CASES  OF  FOUR   STDS PATHOGAN INFECTIONS Chen Xue Li   Chen Yue  Liu Xiao  Feng  Shi Guo Xiang,et al The clinical laboratory in the first people hospital in Jiujiang City,(Jiujiang   332000)   &#

5、160;  ABSTRACT  Obijective:Knowing about epidemiology state about pathogens of the STD,such as CT、UU、NG、and HPV,etc in Jingxi province.Method:By use of FQ-PCR,examinging CT-DNA、UU-DNA、NG-DNA、HPV-DNA of the secretion of 16450 STD pationts who were infected in their urinary and reproductive

6、tracts from the 12 municipal level hospitals in Jiangxi province.Results:The positive tates of CT、UU、NG、HPV are 16.4%、9.1%、7.1% 、6.5% from 12733 male samples and 22.0%、21.1%、10.5%、2.1% from 3717 female samples;The mixed positive rates of CT+UU are 6.3% and 0.6% of CT+NG,1.4%of CT+HPV,3.4% of UU+NG 3

7、.7% of UU+HPV,0.7% of NG+HPV and 1.0% of the 3STDS infection The examined postitive rates are 37.1% and 48.5% in 2002 and 2003 years.Conclusion:The four STDs pathogens range much more seriously in Jiangxi province and tend to increase years after years. KEY WORDS  STD;CT;UU;NG;HPV;epidemiology,

8、FQ-PCR    性传播疾病（Sexually transmitted disease STD）即通过性行为传播的疾病。近些年来该疾病在我国感染情况呈增长趋势，全国经济发展较快，人口流动大以及个人卫生防护相对差是造成流行的客观条件。为了解江西省沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis,  CT）、解脲支原体（Ureaplasma urealyticum , UU）、淋球菌（Neisseria gonorrhoeae , NG）和人乳头瘤病毒（Human papillomaviruses , HPV）的感染情况，笔者对江西省南北5个地级市12家医院性

9、病门诊因生殖道感染而就诊的患者，采集其生殖道分泌物，应用荧光定量PCR检测方法，统计以上4项性病病原体数据，按照不同的性别、年龄以及不同的年份进行比较分析，报告如下。   材料和方法 1、标本来源 2002年6月至2003年10月江西省九江市、南昌市、景德镇市、赣州市、宜春市等5个地级市12家医院性病和妇产科门诊，用无菌拭子采集的生殖道分泌物、妇女宫颈分泌物、男性尿道分泌物，置1ml灭菌生理盐水试管中，采用统一的荧光定量PCR方法检测4种性病病原体CT-DNA、UU-DNA、NG-DNA、HPV-DNA。 2、检测方法 2.1 试剂与仪器 检测CT、UU、NG、HPV-DNA 的PC

10、R扩增试剂由广州达安公司提供。检测仪为PE5700和大和FQD-33A型基因扩增仪。 2.2 DNA提取 将留取的分泌物标本置1ml离心管中，充分震荡摇匀，提取悬浮液转到5ml离心管中，12,000rpm离心5分钟，弃上清，再重复洗涤一次。在沉淀中加入50ul DNA提取液充分混匀，沸水浴10分钟（误差不超过1分钟），转至4oC静置6-8小时，10,000rpm离心5分钟，取上清液5ul做PCR反应。 2.3 扩增 将点好样的反应管放入PCR仪上，93oC2分钟预变性，然后按93oC45秒55oC60秒，反应10个循环，再按93oC30秒55 oC45秒反应30个循环。每批PCR试验均做阴、阳

11、性对照、临界阳性。 3、统计学方法 X2检验。   结果 1、不同性别CT、UU、NG、HPV检测结果 统计结果见表1（括号中为该种病原体在该组病例中的阳性检出率） 表略   2、混合感染情况 见表2。（括号中为该种病原体在该组病例中的阳性检出率） 表略 由本次调查数据统计显示，双重感染及多重感染总检出率为17.1%。     3、 不同年份感染情况 见表3。（括号中为该种病原体在该组病例中的阳性检出率） 表略   4、不同年龄感染情况。 见表4（括号中为该种病原体在该组病例中的阳性检出率 （表略）   讨论   

12、  在性传播疾病中，CT、UU、NG、HPV的感染较常见，我们所统计的12家医院均采用统一的实时FQ-PCR技术，所用仪器均为PE5700和大和FQD-33A型基因扩增仪，试剂均为中山大学达安基因诊断试剂。利用了基因扩增的灵敏性，分子杂交的特异性和光化学的精确性1，5，从根本上解决了PCR扩增产物污染和不能定量的问题。同时荧光定量PCR还具有快速、操作简便、无需对PCR产物进行后处理，还具有定量范围宽、定量准确的优点6。因此本次调查所统计的数据具有较高的可信性。  江西省CT、UU、NG、HPV4种性病病原体检出率分别为17.7%，11.8%，7.8%，5.5%，总检出率为

13、42.8%，与国内外报道并不完全一致78，说明不同地区性传播疾病的流行存在一定的差异，另外可能与标本来源存在一定的关系。男性患者CT、UU、NG、HPV阳性检出率分别为16.4%、9.1%、7.1% 、6.5%；女性性患者CT、UU、NG、HPV阳性检出率分别为22.0%、21.1%、10.5%、2.1%；男性CT阳性检出率（16.4%）明显低于女性（22.0%）；女性UU阳性检出率（21.1%）明显高于男性（9.1%）。NG男性阳性检出率（7.1%）低于女性阳性检出率（10.5%）；HPV男性阳性检出率（6.5%）高于女性阳性检出率（2.1%）。在此次统计调查中，各种病原体混合感染情况比较严

14、重，有存在双重感染或多重感染，占总感染的17.1%；其中CT、UU混合感染检出率为6.3%；CT、NG混合感染检出率为0.6%；CT、HPV混合感染检出率为1.4%；UU、NG混合感染检出率为3.4%；UU、HPV混合感染检出率为3.7%；NG、HPV混合感染检出率为0.7%；两种以上混合感染的感染检出率为1.0%。因此在临床上对怀疑为STD患者应做多项性病病原学检查，以提高病原体的检出率。另外，2002、2003年阳性率存在上升趋势。在年龄段上，青少年性病感总检出率为5.7%，因此需要社会各界的关注，并做好宣传、预防、诊断和治疗工作。   参考文献 1 Geud C A，Willi

15、ams P  M.A novel method for real time quantitative RT-PCR.Genome Res，1996，6：995-1001 2 Heid C A， Stevens J，Livak K J， et al.Real time quantitative PCR.Genome Res，1996，6：986-994. 3 Becker K,Pan D,Whitely C B.Real-to,e PCR assau. J Clin chain reaction to assess gene transfer. Hum Gene Ther,7999,10(15):2559-2566 4 Pas S D,Fries E,De Man R A,et al.Development of a quantitative real-time detection assay for hepatitis B vins DNA and comparison with two comme