第二章 仪器检测技术1

1、第二章 仪器检测技术测定物理常数的技术，原理，适用对象测定物理常数的技术，原理，适用对象紫外紫外- -可见分光光度法可见分光光度法红外分光光度法红外分光光度法薄层色谱法薄层色谱法高效液相色谱法高效液相色谱法气相液相色谱法气相液相色谱法基本的仪器检测技术：基本的仪器检测技术：pHpH测定法、测定法、相对密度相对密度、熔点熔点、比旋度比旋度、折光率折光率、凝点、馏程、和粘、凝点、馏程、和粘度物理常数的测定。度物理常数的测定。一、相对密度测定法一、相对密度测定法概述：概述：在相同环境条件下在相同环境条件下( (温度、压力等温度、压力等) )，某物质，某物质的密度与参考物质的密度与参考物质( (水水)

2、 )的密度之比。的密度之比。用用d d 表示表示tt20d d2020应用：鉴别或检查药物的纯杂程度。应用：鉴别或检查药物的纯杂程度。中国药典中国药典二部附录收载的相对密度测定二部附录收载的相对密度测定法有两种：法有两种：比重瓶法比重瓶法韦氏比重秤法韦氏比重秤法适用范围适用范围不易挥发性液体药物不易挥发性液体药物液体药物液体药物比重瓶法比重瓶法温度计温度计侧管侧管待测液体待测液体带温度计的比重瓶带温度计的比重瓶待测液体待测液体毛细孔毛细孔不带温度计的比重瓶不带温度计的比重瓶比重瓶法原理：在比重瓶法原理：在相同温度相同温度、压力压力下，分别下，分别测得相同体积的供试品和水的测得相同体积的供试品和

3、水的重量重量，计算其，计算其比值可得供试品的相对密度。比值可得供试品的相对密度。方法：方法：相同温度：相同温度：供试品置于供试品置于2020 ( (或规定温度或规定温度) )的的水浴数分钟，使之达到所需温度。水浴数分钟，使之达到所需温度。相同压力：相同压力：比重瓶设有侧管或毛细管，水浴时，比重瓶设有侧管或毛细管，水浴时，供试品以及水温度不断升高，液体供试品以及水温度不断升高，液体体积增加，增加的液体从侧管或毛体积增加，增加的液体从侧管或毛细管端口溢出，使之压力相等。细管端口溢出，使之压力相等。比重瓶法原理：在相同温度、压力下，分别比重瓶法原理：在相同温度、压力下，分别测得相同体积的供试品和水的

4、重量，计算其测得相同体积的供试品和水的重量，计算其比值可得供试品的相对密度。比值可得供试品的相对密度。方法：方法：测重：测重：(1)(1)装液前：精密称定洁净、干燥的比装液前：精密称定洁净、干燥的比重瓶。重瓶。 (2)(2)装液后：温度达到装液后：温度达到2020 后，擦掉后，擦掉溢出液体以及附着水滴，精密称重。溢出液体以及附着水滴，精密称重。(3)(3)分别得出供试品的重量和水的重量。分别得出供试品的重量和水的重量。比重瓶法原理：在相同温度、压力下，分别比重瓶法原理：在相同温度、压力下，分别测得相同体积的供试品和水的重量，计算其测得相同体积的供试品和水的重量，计算其比值可得供试品的相对密度。

5、比值可得供试品的相对密度。公式来源：公式来源： = mV 随温度、压强改变随温度、压强改变相对密度相对密度 = 供试品供试品 水水 相对密度相对密度 = m供试品供试品Vm水水V= m供试品供试品m水水2. 韦氏比重秤法韦氏比重秤法待测液体待测液体玻璃锤玻璃锤刀口刀口秤臂秤臂原理：根据阿基米德定律原理：根据阿基米德定律( (一定体积的物体在一定体积的物体在液体中所受的浮力与该液体的密度成正比，液体中所受的浮力与该液体的密度成正比，F = F = 液体液体g gV V排排) )。方法方法校准：校准：新沸冷水将玻璃圆筒装至新沸冷水将玻璃圆筒装至8 8分满，置分满，置于于2020 或规定的温度下水浴

6、，调节或规定的温度下水浴，调节温度至温度至2020 或规定的温度。将玻璃或规定的温度。将玻璃锤浸入圆筒的水内，将游码置于锤浸入圆筒的水内，将游码置于1.0001.000处，调节至平衡。处，调节至平衡。原理：根据阿基米德定律原理：根据阿基米德定律( (一定体积的物体在一定体积的物体在液体中所受的浮力与该液体的密度成正比，液体中所受的浮力与该液体的密度成正比，F = F = 液体液体g gV V排排) )。方法方法测定：测定：供试品供试品将玻璃圆筒装至将玻璃圆筒装至8 8分满，置于分满，置于2020 或规定的温度下水浴，调节温或规定的温度下水浴，调节温度至度至2020 或规定的温度。将玻璃锤或规定

7、的温度。将玻璃锤浸入圆筒的水内，浸入圆筒的水内，调节秤臂上游码的调节秤臂上游码的数量与位置使平衡，读取数值，即供数量与位置使平衡，读取数值，即供试品的相对密度。试品的相对密度。注意事项：注意事项：测定容器必须洁净、干燥。测定容器必须洁净、干燥。装入供试品或水的体积应一致，同时应避装入供试品或水的体积应一致，同时应避免产生气泡。免产生气泡。控制测定温度为控制测定温度为2020或为各品种项下规定的或为各品种项下规定的温度。温度。测定时应安放在固定的操作平台。测定时应安放在固定的操作平台。注意事项：注意事项：比重瓶法比重瓶法5. 5. 从水浴中取出比重瓶时，应带手套拿取瓶从水浴中取出比重瓶时，应带手

8、套拿取瓶颈，而不能拿瓶肚，以免液体应手温影响颈，而不能拿瓶肚，以免液体应手温影响而体积膨胀外溢。而体积膨胀外溢。 测定腐蚀性的供试品时，其避免腐蚀天平，测定腐蚀性的供试品时，其避免腐蚀天平，可在称量时用一个表面皿放置在天平盘上，可在称量时用一个表面皿放置在天平盘上，再放比重瓶称量。再放比重瓶称量。 称取的顺序为先称称取的顺序为先称空比重瓶，再装供试品空比重瓶，再装供试品称重，最后装水称重称重，最后装水称重。注意事项：注意事项：韦氏比重秤法：韦氏比重秤法：6. 6. 在用水校准前，应该完成零点校正：用在用水校准前，应该完成零点校正：用 校正游码校正零点，即将校正游码悬挂在校正游码校正零点，即将校

9、正游码悬挂在秤端小钩处，调整秤上的调节螺丝。秤端小钩处，调整秤上的调节螺丝。 玻璃锤应全部浸入液体中，同时使玻璃锤玻璃锤应全部浸入液体中，同时使玻璃锤浸入液体的深度前后一致。浸入液体的深度前后一致。二、熔点测定法二、熔点测定法熔点：由固相融化成液相的温度范围熔点：由固相融化成液相的温度范围应用：鉴别药物，检查药物的纯杂程度。应用：鉴别药物，检查药物的纯杂程度。熔点测定法熔点测定法第一法第一法第二法第二法第三法第三法适用范围适用范围易粉碎的固体药物易粉碎的固体药物不易粉碎的固体药物不易粉碎的固体药物凡士林及其他类似物质凡士林及其他类似物质毛细管毛细管第一法：第一法：干燥干燥取供试品适量，研成细粉

10、，除另有规定外，取供试品适量，研成细粉，除另有规定外，应按照品种项下干燥失重的条件进行干燥。应按照品种项下干燥失重的条件进行干燥。若供试品不检查干燥失重、熔点范围低限若供试品不检查干燥失重、熔点范围低限在在135135以上且受热不分解、可采用以上且受热不分解、可采用105105干燥；干燥；1.1. 熔点在熔点在135135以下或受热分解的供试品，可以下或受热分解的供试品，可在五氧化二磷干燥器中干燥或其他适宜的在五氧化二磷干燥器中干燥或其他适宜的干燥方法干燥。干燥方法干燥。第一法：第一法：2. 2. 装样装样分取供试品适量，置毛细管中分取供试品适量，置毛细管中轻击管壁或借助长短适宜的洁净玻璃管，

11、垂轻击管壁或借助长短适宜的洁净玻璃管，垂直放在表面皿或其他适宜的硬质物体上，将直放在表面皿或其他适宜的硬质物体上，将毛细管自上扣放入使自由落下，反复数次，毛细管自上扣放入使自由落下，反复数次，使粉末紧密集结在毛细管的熔封端，装入供使粉末紧密集结在毛细管的熔封端，装入供试品的高度为试品的高度为3mm3mm第一法：第一法：3. 3. 测定测定加入适量的传温液，加热至较规定的熔点低加入适量的传温液，加热至较规定的熔点低限越限越1010 时，将装有供试品的毛细管浸入时，将装有供试品的毛细管浸入传温液中，贴附在温度计上，要求毛细管的传温液中，贴附在温度计上，要求毛细管的内容物部分适在温度计汞球中部内容物

12、部分适在温度计汞球中部继续加热，调节升温速率为每分钟上升继续加热，调节升温速率为每分钟上升1.01.01.51.5 ，不断搅拌使传温液温度保持均，不断搅拌使传温液温度保持均匀匀第一法：第一法：第一法：第一法：4. 4. 记录记录 记录供试品在初熔至全熔时的温度，重复测记录供试品在初熔至全熔时的温度，重复测定定3 3次，取平均值，即得。次，取平均值，即得。第二法：第二法：取供试品，用尽可能低的温度熔融后，吸取供试品，用尽可能低的温度熔融后，吸入两端开口的毛细管，使高达约入两端开口的毛细管，使高达约10mm10mm。在在1010或或1010以下的冷处静置以下的冷处静置2424小时，或小时，或置于冰

13、上放冷不少于置于冰上放冷不少于2 2小时小时1.1. 凝固后，用橡皮圈将毛细管紧缚在温度计凝固后，用橡皮圈将毛细管紧缚在温度计上，使毛细管的内容物恰在温度计汞球中上，使毛细管的内容物恰在温度计汞球中部部第二法：第二法：4. 4. 小心加热，待温度上升至比规定的熔点低小心加热，待温度上升至比规定的熔点低限尚低约限尚低约5 5 ，调节温度速率使每分钟上，调节温度速率使每分钟上升不超过升不超过0.50.5 。5. 5. 至供试品在毛细管中开始上升时，检读温至供试品在毛细管中开始上升时，检读温度计上限时的温度，即得。度计上限时的温度，即得。结果判定结果判定初熔、全熔或分解突变时的温度均在各品种初熔、全

14、熔或分解突变时的温度均在各品种的规定的范围以内，判为符合规定；的规定的范围以内，判为符合规定；有下列情况之一，判为不符合规定：有下列情况之一，判为不符合规定：初熔温度低于规定范围的低限初熔温度低于规定范围的低限全熔温度超过规定的高限全熔温度超过规定的高限分解点或熔点温度处于规定范围外分解点或熔点温度处于规定范围外初熔前出现严重的初熔前出现严重的“发毛发毛”、“收缩收缩”、“软化软化”、“出汗出汗”现象，过程较长，并与现象，过程较长，并与正常的该供试品作对比后有明显的差异者。正常的该供试品作对比后有明显的差异者。注意事项注意事项1. 1. 测定熔融同时分解的供试品时，采用第一测定熔融同时分解的供

15、试品时，采用第一法，注意调节升温速率，使每分钟上升法，注意调节升温速率，使每分钟上升2.52.53.03.0 。2.2.供试品开始局部液化时（或开始产生气泡供试品开始局部液化时（或开始产生气泡时）的温度作为初熔温度；供试品固相消失时）的温度作为初熔温度；供试品固相消失全部液化时的温度作为全熔温度。全部液化时的温度作为全熔温度。3. 3. 温度计应该用温度计应该用“熔点标准品熔点标准品”进行校正。进行校正。4. 4. 熔点温度应该估读到熔点温度应该估读到0.10.1 ，并记录突变，并记录突变时或不正常的现象，至少重复测定时或不正常的现象，至少重复测定3 3次。次。注意事项注意事项5. 5. 测定

16、结果的数据应按修约间隔为测定结果的数据应按修约间隔为0.50.5进行进行修约。但标准规定的熔点范围，其有效数字修约。但标准规定的熔点范围，其有效数字的定位为个位数时，应按修约间隔为的定位为个位数时，应按修约间隔为1 1进行修进行修约。约。6. 6. 传温液的选择传温液的选择当药物熔点在当药物熔点在8080 以下以下 水水 在在8080 以上以上 硅油或液体石蜡硅油或液体石蜡7. 7. 熔点标准品应在规定条件下干燥，并置于熔点标准品应在规定条件下干燥，并置于合适的干燥器中避光保存备用。合适的干燥器中避光保存备用。三、旋光度测定法三、旋光度测定法三、旋光度测定法三、旋光度测定法平面偏振光通过含有某

17、些光学活性的化合物平面偏振光通过含有某些光学活性的化合物液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光的平面向左或向右旋转。的平面向左或向右旋转。平面偏振光通过含有某些光学活性的化合物平面偏振光通过含有某些光学活性的化合物液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光的平面向左或向右旋转。的平面向左或向右旋转。测定对象：有光学活性的化合物测定对象：有光学活性的化合物光学活性的化合物：光学活性的化合物：有手性碳原子有手性碳原子案例分析：案例分析：头孢氨苄有几个手性碳原子？头孢氨苄有几个手性碳原子？平面偏振光通过含有某些光学活性的化合物平

18、面偏振光通过含有某些光学活性的化合物液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光的平面向左或向右旋转。的平面向左或向右旋转。测定对象：有光学活性的化合物测定对象：有光学活性的化合物光学活性的化合物：光学活性的化合物：有手性碳原子有手性碳原子应用：应用：鉴别鉴别或或检查检查某些物质的光学活性和纯某些物质的光学活性和纯杂程度，一定条件下与浓度呈线性关系，可杂程度，一定条件下与浓度呈线性关系，可用于用于含量测定含量测定。平面偏振光通过含有某些光学活性的化合物平面偏振光通过含有某些光学活性的化合物液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏振

19、光的平面向左或向右旋转，旋转的度数称为的平面向左或向右旋转，旋转的度数称为旋旋光度光度。比旋度比旋度 ：在一定波长与温度下，偏振光：在一定波长与温度下，偏振光透过长透过长1dm1dm、每、每1ml1ml中含有旋光物质中含有旋光物质1g1g的溶液所的溶液所测得的旋光度。测得的旋光度。D t液体供试品液体供试品固体供试品固体供试品D = tl dl d = Dt100l c l c旋光度和比旋度之间的关系三、旋光度测定法三、旋光度测定法测定管测定管测定方法测定方法比旋度的测定比旋度的测定将测定管用供试品溶液冲洗数次，注入供试将测定管用供试品溶液冲洗数次，注入供试品溶液适量，置于旋光计内检测度数，即

20、品溶液适量，置于旋光计内检测度数，即得供试品溶液的旋光度。同法读取得供试品溶液的旋光度。同法读取旋光度旋光度3 3次，去平均值。次，去平均值。使偏振光右旋的物质为右旋物质使偏振光右旋的物质为右旋物质 “ “+ +” 左旋左旋 左旋左旋 “ “- -”测定方法测定方法 比旋度比旋度 ：在一定波长与温度下，偏振光：在一定波长与温度下，偏振光透过长透过长1dm1dm、每、每1ml1ml中含有旋光物质中含有旋光物质1g1g的溶液所的溶液所测得的旋光度。测得的旋光度。D t液体供试品液体供试品固体供试品固体供试品D = tl dl d = Dt100l c l c旋光度和比旋度之间的关系测定方法测定方法

21、 2.2.物质含量的测定物质含量的测定c = t ll D3. 3. 结果判定结果判定实例分析实例分析头孢氨苄的比旋度测定头孢氨苄的比旋度测定实测数据实测数据: :头孢氨苄头孢氨苄0.545g0.545g（已知水分（已知水分5.0%5.0%）置于）置于100mL100mL量量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，测定管瓶中，加水溶解并稀释至刻度，测定管2dm2dm，温，温度度2020， 测得旋光度测得旋光度+1.6+1.6。解析：解析：c = 0.545gc = 0.545g(1-5.0%) = 0.5186 (g/mL) (1-5.0%) = 0.5186 (g/mL) = Dt100(+1.6)20

22、.5186= +154结论：符合规定结论：符合规定注意事项注意事项1.1.比旋度与测定光源、测定波长、溶剂、浓比旋度与测定光源、测定波长、溶剂、浓度和温度等因素有关。度和温度等因素有关。2. 2. 测定前以溶剂做空白校正测定前以溶剂做空白校正3.3.供试品溶液应充分溶解、澄清供试品溶液应充分溶解、澄清4.4.按规定或根据度数精度配制浓度适当的供按规定或根据度数精度配制浓度适当的供试品溶液。试品溶液。四、折光率测定法四、折光率测定法四、折光率测定法四、折光率测定法光线自一种透明介质进入另一种透明介质的光线自一种透明介质进入另一种透明介质的时候，由于在两种介质中的传播速度不同，时候，由于在两种介质

23、中的传播速度不同，使光线在两种介质的平滑界面上发生折射。使光线在两种介质的平滑界面上发生折射。折光率折光率n n = = sin isin isin rsin r应用：液体药物应用：液体药物注意事项：注意事项：1.1.必须置于光线充足且干燥的环境，否则会必须置于光线充足且干燥的环境，否则会应吸纳管测定过程中的视野观察效果。应吸纳管测定过程中的视野观察效果。2. 2. 需严格控制温度需严格控制温度3. 3. 不能测试具有强酸性、强碱性或腐蚀性的不能测试具有强酸性、强碱性或腐蚀性的供试品供试品4.4.加入供试品量要适中，避免气泡进入供试加入供试品量要适中，避免气泡进入供试品，影响结果品，影响结果5

24、.5. 明暗分界线必须清晰明暗分界线必须清晰6.6.保养仪器保养仪器小结小结相对密度相对密度熔点熔点旋光度旋光度折光率折光率测定项目测定项目方法方法比重瓶法、韦氏比重秤法法比重瓶法、韦氏比重秤法法第一法、第二法、第三法第一法、第二法、第三法旋光仪法旋光仪法折光仪法折光仪法第二节第二节 常用的光谱检测技术常用的光谱检测技术紫外紫外- -可见分光光度法可见分光光度法红外分光光度法红外分光光度法原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法荧光分析发荧光分析发火焰光度法火焰光度法在紫外光区(200400nm)和可见光区(400760nm)，根据待测物质对不同波长电磁辐射的吸收程度不同而建立起来的分析方法。定

25、义根据待测物质发射或吸收的电磁辐射以及待测物质与电磁辐射的相互作用而建立起来的定性、定量和结构分析方法，统称为光学分析法。分光光度法即是其中的一种。紫外-可见分光光度法主要有如下特点：1. .灵敏度高 被测物最低浓度一般为10-510-6mol/L，适用于微量或者痕量组分分析。2. .准确度高 相对误差在1%5%，对微量组分的分析已能满足要求。3. .仪器设备简单、操作简便、测定快速 由于采用选择性高的显色剂和适当的比色条件，可以不经分离干扰物质，即可直接进行测定，从而缩短分析时间。4. .应用范围广 几乎所有的无机离子和有机化合物均可直接或间接用紫外-可见分光光度法进行测定。紫外紫外-可见分

26、光光度法可见分光光度法紫外区波长：紫外区波长： 200200400nm400nm可见光区波长：可见光区波长：400400760nm760nm400 500 600 760 nm 可见光： 波长()范围为400760nm； 单色光： 相同波长的光； 复合光：不同波长的光混合在一起。白光是由各种不同颜色的光按一定强度比例混合而成。物质的颜色是物质对光选择性吸收的结果。当一束白光通过某溶液时p如果该溶液对可见光的各波长的光不吸收，即入射光全部通过溶液，这是看到溶液是无色透明的；p当该溶液对各种波长的光完全吸收，看到的溶液呈黑色；p当某溶液选择吸收了可见光区某波长的光，溶液呈现被吸收光的互补色光的颜色

27、。光的吸收定律光的吸收定律光的吸收定律实验证明，当入射光的波长一定时，溶液对光的吸收程度与该溶液的浓度和溶液的厚度有关。其定量关系服从朗伯-比尔定律，即当一束平行的单色光通过均匀、无散射的溶液时，在单色光波长、强度、溶液的温度等条件不变的情况下，溶液的吸光度与溶液的浓度及液层厚度的乘积成正比。其数学表达式为：A= kcl光的吸收定律光的吸收定律光的吸收定律郎伯比尔定律：A - 吸光度K- 吸光系数c- 溶液的物质的量浓度，g/molL- 液层的厚度，cm 朗伯比尔定律又称为光的吸收定律，是分光光度法定量分析的依据。但它只适用于稀溶液和单色光。在浓溶液或复合光时，误差较大。A= kcl吸收光谱吸

28、收光谱 吸收光谱又称吸收光谱曲线或吸收曲线，它是在浓度一定的条件下，以波长（）为横坐标，以吸光度（A）为纵坐标，所绘制的曲线。曲线上吸光度最大的地方称为最大吸收峰，它所对应的波长称为最大吸收波长，用max表示。 吸收光谱吸收光谱高锰酸钾溶液的吸收光谱曲线高锰酸钾溶液的吸收光谱曲线 0.01mol/L KMnO4溶液溶液0.05mol/L KMnO4溶液溶液0.10mol/L KMnO4溶液溶液0.20mol/L KMnO4溶液溶液吸收光谱吸收光谱高锰酸钾溶液的吸收光谱曲线高锰酸钾溶液的吸收光谱曲线 1KMnO4溶液的max为525nm，说明其对波长525nm附近的绿色光有最大吸收，故KMnO4

29、溶液显现绿色光的互补色即紫色。2不同浓度KMnO4溶液在相同的波长范围内所形成的吸收峰高度不同。浓度越大，吸收峰越高，即吸光度越大。即吸光度的大小与浓度有关。这是分光光度法定量分析的依据。吸收光谱吸收光谱高锰酸钾溶液的吸收光谱曲线高锰酸钾溶液的吸收光谱曲线 3在相同条件下不同浓度的KMnO4溶液，其吸收光谱曲线的形状非常相似，最大吸收波长相同，说明吸收光谱的形状与溶液中溶质的结构有关。这是分光光度法定性分析的依据。4当溶液的浓度、温度、液层的厚度一定时，溶液对max的光吸收程度最大。因此，常用max的光作为测定溶液吸光度的入射光，以获得较高的测定灵敏度。吸收光谱吸收光谱高锰酸钾溶液的吸收光谱曲

30、线高锰酸钾溶液的吸收光谱曲线 0.01mol/L KMnO4溶液溶液0.05mol/L KMnO4溶液溶液0.10mol/L KMnO4溶液溶液0.20mol/L KMnO4溶液溶液分光光度计分光光度计基本结构 紫外-可见分光光度计主要由光源、单色器、吸收池、检测器及测量系统五个部件组成。分光光度计分光光度计基本结构23467589101分光光度计分光光度计基本结构(1)光源可以发射出供溶液或吸收物质选择性吸收的光。光源应在一定光谱区域内发射出连续光谱，并有足够的强度和良好的稳定性。可见分光光度计常用光源：p可见光区：碘钨灯(35010001000nm)p紫外光区：氘灯（200360nm）分光

31、光度计分光光度计基本结构66(2)单色器作用：将来自光源的复合光分散为单色光主要有：棱镜和光栅。分光光度计分光光度计基本结构67(2)单色器作用：将来自光源的复合光分散为单色光主要有：棱镜和光栅。分光光度计分光光度计基本结构(3)吸收池(比色皿)常用无色透明、耐腐蚀和耐酸碱的材料做成，按材质分为玻璃（适用于可见光区）和石英（适用于可见-紫外光区）型。分光光度计分光光度计基本结构(4)检测器利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测得电信号。常用的有光电池、光电管或光电倍增管。(5)信号处理及显示系统将检测到的电信号经过放大以某种方式将测量结果显示出来。通过计算机技术将信号换算成透过率、吸光度等等

32、。分光光度计分光光度计基本类型1.可见分光光度计 在实际工作中，常用722型可见分光光度计。国产722型可见分光光度计的外形如下图。23467589101 1. 1.试样室盖试样室盖 2.2.数字显示屏数字显示屏 3.3.确认键确认键 4. 0%T 4. 0%T 键键 5.100%T5.100%T键键 6.6.功能键功能键 7.7.波长读数窗波长读数窗 8.8.波长旋钮波长旋钮 9.9.试样室试样室 10.10.试样架推拉杆试样架推拉杆紫外紫外-可见分光光度法可见分光光度法物质分子受到紫外物质分子受到紫外- -可见光的照射，可见光的照射，选择吸选择吸收某些适宜能量的光子后收某些适宜能量的光子后

33、，其原子的外层，其原子的外层电电子子( (成键电子、未成键电子成键电子、未成键电子) )由基态由基态跃迁跃迁至激至激发态，在相应的波长出现吸收所形成的光谱，发态，在相应的波长出现吸收所形成的光谱，称为紫外称为紫外- -可见吸收光谱。可见吸收光谱。吸收特定波长吸收特定波长官能团官能团应用应用对药物进行对药物进行定性分析定性分析: :根据光谱图上的吸收峰根据光谱图上的吸收峰位置位置测定药物的吸收光谱、吸收系数和吸光度，测定药物的吸收光谱、吸收系数和吸光度，可以：可以：定量分析：根据固定波长的吸光度定量分析：根据固定波长的吸光度阿司匹林标准样品阿司匹林标准样品未知未知样品样品1 1未知样品未知样品2

34、 2定性测定定量测定仪器的鉴定仪器的鉴定波长准确度波长准确度 方法方法(1)使用使用高氯酸钬高氯酸钬校正校正溶液：溶液：10% HClO4 + 4% Ho2O3吸收峰波长：吸收峰波长：241.13、278.10、287.18、333.44、345.47、361.31、416.28、451.30、485.29、538.64、640.52nm。仪器的鉴定仪器的鉴定仪器的鉴定仪器的鉴定波长准确度波长准确度 方法方法(1)使用使用高氯酸钬高氯酸钬校正校正溶液：溶液：10% HClO4 + 4% Ho2O3吸收峰波长：吸收峰波长：241.13、278.10、287.18、333.44、345.47、36

35、1.31、416.28、451.30、485.29、538.64、640.52nm。(2) 氘灯氘灯 486.02和和656.10nm校正校正允许误差：紫外光区允许误差：紫外光区 1nm，500nm附近附近 2nm仪器的检定仪器的检定2. 2. 吸光度准确度吸光度准确度重铬酸钾的硫酸溶液重铬酸钾的硫酸溶液检定检定60mg K2Cr2O7 + 0.005mol/LH2SO4 1000ml重铬酸钾硫酸溶液的吸收系数及许可范围重铬酸钾硫酸溶液的吸收系数及许可范围波长波长(nm)(nm)E E 的规定值的规定值E E 的许可范围的许可范围235(235(最小最小) )124.5123.0126.025

36、7(257(最大最大) ) 313(313(最小最小) ) 350(350(最大最大) )144.048.6106.6142.8146.2 47.050.3 105.5108.51%1cm1%1cmE E 1%1cm=ACLE E 1%1cm百分吸收系数百分吸收系数A吸光度吸光度C 供试品溶液的浓度供试品溶液的浓度(g/100mL)(g/100mL)吸收池厚度吸收池厚度) )L仪器的检定仪器的检定3. 3. 杂散光的检查杂散光的检查碘化钠溶液碘化钠溶液、亚硝酸溶液亚硝酸溶液在规定波长处的透光率在规定波长处的透光率试剂试剂碘化钠碘化钠亚硝酸钠亚硝酸钠浓度浓度(g/100ml)(g/100ml)1

37、.005.00测定用波长测定用波长(nm)(nm)透光率透光率(%)(%)2200.83400.8测试条件的检定测试条件的检定1. 1. 吸收池的校正试验吸收池的校正试验2. 2. 对溶剂的要求对溶剂的要求3. 3. 供试品测定波长的缺点供试品测定波长的缺点4. 4. 狭缝宽度的控制狭缝宽度的控制5. 5. 供试品测试的适宜吸光度供试品测试的适宜吸光度在药物检测中的应用在药物检测中的应用鉴别鉴别检查检查含量测定含量测定二、红外分光光度法二、红外分光光度法红外线：红外线： 0.76 500 m近红外区：近红外区： 0.76 2.5 m中红外区：中红外区： 2.550m远红外区：远红外区：50 5

38、00 m波数：波数：200400cm-1基团振动基团振动红外单色光红外单色光40003000200010000 波数波数/cm-1透光率透光率T/% 020406080100 仪器仪器色散型分光光度计色散型分光光度计傅里叶变换型傅里叶变换型分光光度计分光光度计红外分光光度计的检定红外分光光度计的检定波数的校正波数的校正聚苯乙烯薄膜聚苯乙烯薄膜( (厚度为厚度为0.04mm)0.04mm)校正校正吸收峰：吸收峰：30273027、28512851、16011601、10281028、907cm907cm-1-1要求：要求：在在3000cm3000cm-1-1处的波数误差应不大于处的波数误差应不大

39、于 5cm 5cm-1-1，在，在1000cm1000cm-1-1附近的波数误差应不大于附近的波数误差应不大于 1cm1cm-1-1。红外分光光度计的检定红外分光光度计的检定2. 2. 分辨率校正分辨率校正聚苯乙烯薄膜聚苯乙烯薄膜(0.04mm)(0.04mm)校正校正311031102850cm2850cm-1-1范围内范围内 7 7个峰个峰2851cm2851cm-1-1峰与峰与2875cm2875cm-1-1之间的分辨深度不小于之间的分辨深度不小于18%18%透光率透光率1583cm1583cm-1-1峰与峰与1589cm1589cm-1-1之间的分辨深度不小于之间的分辨深度不小于12%

40、12%透光率透光率标称分辨率应不低于标称分辨率应不低于2cm2cm-1-1制样技术制样技术压片法压片法、糊法糊法、膜法、溶液法、衰减全反射、膜法、溶液法、衰减全反射法和气体吸收池法法和气体吸收池法压片法压片法压片法压片法固体供固体供试品试品置于玛置于玛瑙研钵瑙研钵分数次分数次加入加入KBrKBr充分研磨充分研磨粉末粉末铺展于压铺展于压片模具片模具抽真空抽真空2min2min加压加压2min2min制得晶片制得晶片要求：无裂痕要求：无裂痕 无局部发白现象无局部发白现象 呈透明状呈透明状 无明显颗粒状无明显颗粒状糊法糊法固体供固体供试品试品置于玛置于玛瑙研钵瑙研钵滴加液滴加液体石蜡体石蜡充分研磨充

41、分研磨糊状糊状夹于两个夹于两个窗片之间窗片之间制得供试片制得供试片要求：糊状供试品在窗片间分布均匀要求：糊状供试品在窗片间分布均匀充分研细充分研细试样的制备除另有规定外，用作鉴别时均应试样的制备除另有规定外，用作鉴别时均应按照按照药品红外光谱集药品红外光谱集的规定方法制备。的规定方法制备。同一药品在各卷均有收载时，以最新卷收载同一药品在各卷均有收载时，以最新卷收载的方法为准。的方法为准。应用应用 红外光谱法具有很强的定性分析功能，能够红外光谱法具有很强的定性分析功能，能够全面反映药物的精细结构，定量分析功能全面反映药物的精细结构，定量分析功能较弱。较弱。原料药鉴别（主要）原料药鉴别（主要）1.1. 制剂的制剂的鉴别鉴别原料药鉴别原料药鉴别大多采用大多采用固体制样固体制样技术技术问题：问题：多晶现象多晶现象( (不同晶型药物分子的红外光不同晶型药物分子的红外光谱主要特征吸收峰峰型、峰位、峰强度有谱主要特征吸收峰峰型、峰位、峰强度有所差异所差