冷针与温针对痛风模型大鼠效应差异观察

1、冷针与温针对痛风模型大鼠效应差异观察程波、陈欢、刘保君、杨玲、李露萍、鄢常敖指导老师：魏建子（上海中医药大学03针英（七）、04运动医学，上海201203）摘要 目的：观察冷针与温针对痛风模型大鼠的效应差异，为冷针的临床推广应用提供实验依据。方法：24只SD大鼠随机分成模型对照组、温针组和冷针组3组，采用踝关节腔注射尿酸钠溶液法复制急性痛风性关节炎模型。温针组用温针后三里治疗，冷针组用冷针后三里治疗，用YLS7A足趾容积测量仪测定造模前、造模后20h、26h、32h和43h的大鼠踝关节的容积。结果：冷针组造模后26h、32h和43h各时段鼠足踝关节容积消肿程度均显著大于温针组（p<0.0

2、1），与模型对照组比较则无明显差异；温针组造模后26h、32h和43h各时段鼠足踝关节容积消肿程度均显著小于模型对照组（p<0.01）。结论：冷针效果明显优于温针，具有临床推广价值。关键词冷针, 温针, 痛风性关节炎痛风1是嘌呤代谢紊乱及或尿酸排泄减少所引起的一种晶体性关节炎，以男性多见。痛风的临床表现为高尿酸血症和尿酸盐结晶沉积所致的特征性急性关节炎、痛风石形成或痛风性慢性关节炎。该病可诱发尿酸盐肾病、尿酸性尿路结石等症状，严重者可导致关节残疾、肾功能不全。目前痛风尚无特效药物的治疗，西药虽可暂时的缓解疗效，但是在会复发的同时，还会有不同程度的不良反应。近年来针灸治疗急性痛风性关节炎取

3、得满意疗效5，如丁氏6采用温针灸治疗急性痛风性跖趾关节炎31例，均全部治愈。但文献中多以传统治疗为主，本实验采用踝关节腔注射尿酸钠溶液复制急性痛风性关节炎模型，观察冷针、温针的效应差异，旨在对冷针治疗急性痛风性关节炎，乃至各种热证提供实验数据，开辟一条新的治疗思路。 1材料与方法1.1 实验材料实验试剂氢氧化钠（国药集团化学试剂有限公司生产，编号 F20070307）；尿酸（国药集团化学试剂有限公司生产，编号 Lot. NO. WL20060411）；戊巴比妥钠（中国医药上海化学试剂公司生产，编号 F2003816）；吐温80（国药集团化学试剂有限公司生产，编号 F20070417）；艾条（苏

4、州市东方艾绒厂生产 批号Z32021062）。 实验仪器0.3×40mm针灸针（吴江市神力医疗卫生材料有限公司 准字 2002 第2270474号）、0.25×13mm针灸针（吴江市神力医疗卫生材料有限公司 准字2006 第2270685） YLS7A足趾容积测量仪（山东省医学科学院设备组生产，编号005090064）36g） 实验动物普通成年SD雄性大鼠24只，体重200250g 由上海中医药大学动物实验中心提供，随机分成三组：模型组、温针组和冷针组，每组8只，在湿度和温度均正常的环境中，予以普通饲料喂养，自由饮水。1.2 实验方法 尿酸钠的制备取2g的NaOH加蒸馏水至

5、50ml制备出1mol/L的NaOH，将194mL蒸馏水加1molL NaOH 6 ml，煮沸后加入1g尿酸（国药集团化学试剂有限公司）溶解后，放入电热恒温箱45低温干燥 ，尿酸钠1g溶于10的吐温-80溶液（2ml吐温-80加入18ml生理盐水）中，成均匀混悬状。2 动物造模用 6号注射针从受试大鼠左后肢踝关节背侧45度方向插入胫骨肌腱内侧 ，将0.05 ml尿酸钠溶液注入到踝关节腔，复制踝关节腔注射尿酸钠溶液复制急性痛风性关节炎模型。3 针具的制备将艾条切成2cm固定于1.5寸针灸针顶端制成温针；将针柄垂直插入果冻中央放入冰箱0°C冷冻至凝固呈固体状制成冷针。 麻醉方法用1的戊巴

6、比妥钠以0.4ml/100g的比例腹腔注入大鼠体内。 治疗方法温针组于造模后20小时和26小时分别进行一次温针灸治疗，时间各为20分钟，先将大鼠麻醉，摆成左后足（患肢）在上的右侧卧位。用温针刺入左后足的后三里约6mm，辅以同侧跟端的普通针刺，不进行手法操作；冷针组治疗时间、体位、部位、麻醉方法均与温针组相同，用冷针刺入大鼠左后足的后三里约6mm，辅以同侧跟端的普通针刺，不进行手法操作；模型组只造模，不治疗。 鼠足踝关节容积的测量分别于造模前，造模后20小时、26小时、32小时、43小时测量鼠足踝关节容积。（每次测量三次，取平均值）大鼠戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后，用YLS7A鼠足趾容积测量仪测量踝

7、关节的容积。 统计分析原始数据运用EXCEL进行整理，最后取得的消肿度采用单因素方差分析，选用 LSD或 Tamhanes T2分析，运用SPSS 12分析软件进行分析。2 实验结果2.1 冷针、温针后鼠足容积的变化趋势冷针组和模型组均在20小时后开始消肿，而温针组还在逐步的肿胀，在26小时达到峰值后开始消肿。（图1） 图1 冷针、温针后鼠足踝关节容积的变化2. 2 冷针、温针对鼠足容积的影响冷针组造模后26h、32h和43h各时段鼠足踝关节容积消肿程度均显著大于温针组（p<0.01），与模型对照组比较则无明显差异；温针组造模后26h、32h和43h各时段鼠足踝关节容积消肿程度均显著小于

8、模型对照组（p<0.01）。肿胀率()=（某时段鼠足容积20h鼠足容积）/20h鼠足容积×100表1 不同组在不同时段的足消肿度实验结果比较(x±s，%)26小时（n8）32小时（n8）43小时（n8）温针组-7.26±26.71*0.90±33.18*4.81±40.39*冷针组3.85±52.03787±13.8912.37±10.81模型组0.55±25.206.134±23.9812.76643±12.6429温针与模型比较* p<0.01 冷针与温针比较p<

9、0.01)3 讨论痛风性关节炎其关节局部症状，仅是病之标，嘌呤代谢紊乱导致高尿酸血症，是其基本病理。根据临床所见，它是由于脾肾清浊功能失司，湿浊阻滞所致。该症好发于中老年形体肥腴之体，喜食高粱厚味者，由于其脏腑功能渐衰，脾失健运，升清降浊无权，肾不气化，分清泌浊失司，故不能运化水谷，使清者不升浊者不降，湿浊内生，滞留血中，遂致病变。故在本法中选用足三里以健脾助运，并局部取穴跟端以减轻关节肿胀之症状4。 但此次实验结果为阴性，无论温针或冷针均无明显疗效，温针甚至出现肿胀程度增大的现象，进行原因分析如下：首先，冷针对于痛风可能确实没有明显的疗效。从中医的角度来讲，痛风性关节炎属于热痹，是湿热内蕴所

10、致。冷针取寒凉之意，并未达病所引热邪外出，故而仅仅治其标、解其表。从现代医学角度来讲，虽然冷针可以收缩大鼠踝关节腔内微血管并减少血浆的渗出，起到治疗的作用，但冷针也造成大鼠关节局部温度降低，使尿酸盐从血液中析出而沉积于关节周围，从而影响到疗效7。亦有可能实验过程中针尖与皮肤表面温差过小以至于未能达到治疗所需，不足以取得疗效。其次，冷温针对于痛风性关节炎的治疗可能均有疗效。本实验产生的阴性结果由于外界因素造成的偏差：针刺次数太少：由于实验的场地和时间有限，只能进行两次治疗。而相对于临床上的治疗来讲，两次治疗并不一定能达到治疗效果。实验间隔时间太长：由于每次数据的采集、治疗的进行均要在麻醉的基础上

11、，为防止大鼠的意外死亡，必须用延长间隔时间的方法来进行实验，而此次是急性模型，病程较短，造成观察的次数减少，采集的数据较少，错过了实验中较多有意义的数据。样本量过小：由于此次实验的资金有限，每组只采取8只大鼠进行实验，又由于此次数据较为精密，而过小的样本含量必然造成方差较大。故而成为实验出现无统计学意义的现象的原因之一。未进行手法操作：在临床上，手法是进行针灸操作的重要内容，因此次实验要对温针和冷针，即温度的差异对疾病的疗效进行比较，故而忽略了手法造成的机械刺激对其造成的影响，温针反“热者寒之”的理论而行，使热邪更加深入，造成病程的加重，而冷针由于针刺次数较少，单独的“热者寒之”疗法不够显著，

12、致使实验无统计学意义。麻药的影响：如上文所述，实验中大鼠要经历一天六次的反复麻醉，麻醉的量过多，使得个别大鼠甚至出现了耐药的情况，而过度的使用麻药也可导致疗效的变化。实验误差：仪器误差 鼠足容积测量装置虽然精度很高，但是缺少可操作性，使得测量中人为因素的影响增加，测量装置的精度大打折扣，从而使实验出现误差。 药品问题 尿酸钠的悬浊液理论上是现配现用，但鉴于实验条件有限，我们改为将药剂一次性配齐，而且进入冰箱保存的时间也由理论上的全天，变为实验空余时间的每天13小时。在这样的保存条件下，药品尿酸钠很可能变质，既而影响造模效果。 实验时间问题 由于实验的条件有限，没有充足的实验场地供我们进行实验，

13、原应在一批同时做完的三组实验，改为三次完成，使得在实验的过程中增加了很多外来因素，造成了实验的误差。 虽然此次实验是阴性结果，但是由冷针的治疗趋势来看，冷针还是有一定的疗效的，如果能够加大针刺的密度，辅助以手法，增加治疗的穴位等方法改进实验，本实验还是有一定的继续探索价值的。参考文献1. 中华医学会风湿病学分会 原发性痛风诊治指南(草案) 中华风湿学杂志. 2004, 8(3)：178 2. Coderre TJ, et a1Ankle joint urate arthritis in rat：an alternative animal model of arthritis to that produced by Freunds adjuvantJPain，1987， 28：3793. 黄蔚霞药物对痛风性关节炎模型II-1、II -6的影响中国中西医结合肾病杂志，2002