萘乙酸残留的高效液相色谱法测定_图文

1、第29卷第4期2010年4月分析测试学报FENX I CESH I XUEBAO (Journal of I nstrumental Analysis Vol 129No 14382385收稿日期:2009-11-13;修回日期:2010-03-09基金项目:国家水体污染控制与治理科技重大专项资助项目(2008ZX07101-006-05;环保公益资助项目(200809102第一作者:孔德洋(1977-,男,山东滕州人,助理研究员,博士研究生,Tel:025-*,E -mail:kongdeyanghot m ail 1com萘乙酸残留的高效液相色谱法测定孔德洋1,石利利1,单正军1,葛峰1,

2、高士祥2(1.环境保护部南京环境科学研究所,江苏南京210042;2.南京大学环境学院污染控制与资源化国家重点实验室,江苏南京210093摘要:建立了水稻植株及环境样品中萘乙酸的快速分析方法。以二氯甲烷为提取溶剂,对试样进行加速溶剂萃取,自动凝胶渗透色谱仪净化,高效液相色谱分离,二极管阵列(P DA 检测器测定,外标法定量。萘乙酸的质量浓度在010520100mg/L 范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系。萘乙酸在土壤及水稻样品中的检出限为0105mg/kg,土壤中的添加水平为0105、1100mg/kg 时,回收率为92%、86%,相对标准偏差为119%、313%;植株中添加水平为0110、1

3、100mg/kg 时,回收率为76%、83%,相对标准偏差为215%、219%。该方法的灵敏度及重复性均符合农药残留分析的要求。关键词:萘乙酸;加速溶剂萃取;凝胶色谱法;农药残留;高效液相色谱中图分类号:O65717;O6251512文献标识码:A 文章编号:1004-4957(201004-0382-04Deter m inati on of 2Naphthylacetic Acid by ASE -GPC Coup led with HP LCK ONG De 2yang 1,SH IL i 2li 1,SHAN Zheng 2jun 1,GE Feng 1,G AO Shi 2xiang

4、 2(1.Nanjing I nstitute of Envir on mental Science,M inistry of Envir on mental Pr otecti on of the Peop le s Republic ofChina,Nanjing 210042,China;2.State Key Laborat ory of Polluti on Contr ol and Res ourceReuse,School of the Envir on ment,Nanjing University,Nanjing 210093,China Ab s trac t:A rap

5、id detecti on method has been established t o deter m ine the residues of 2naphthylace 2tic acid in rice p lants and the envir onmental sa mp les by high perfor mance liquid chr o mat ography(HP LC in combinati on with accelerated s olvent extracti on (ASE and aut o gel per meati on chr oma 2t ograp

6、hy (GPC .The sa mp le was extracted by ASE with dichl or omethane as extracti on reagent andcleaning up by aut o GPC .The extract was analyzed by HP LC with phot odi ode array (P DA detect or .The results showed that the calibrati on curve was linear over the concentrati on of 2naphthylacetic acidin

7、 the range of 0105-20100mg/L.The li m its of detecti on (LOD s of 2naphthylacetic acid in s oiland rice p lant were both 0105mg kg -1.The recoveries of 2naphthylacetic acid in s oils sa mp le for 2tified with 0105and 110mg /kg were 92%and 86%,res pectively,and the RS D s were 119%and313%,res pective

8、ly .The recoveries in rice p lant sa mp le f ortified with 0110and 1100mg/kg were76%and 83%,res pectively,with RS D s of 215%and 219%.The sensitivity and repeatability of themethod could meet the analysis require ments of pesticide residues .Key wo rd s:2naphthylacetic acid;accelerated s olvent extr

9、acti on (ASE ;gel per meati on chr oma 2t ography (GPC ;pesticide residue;HP LC 萘乙酸(2Naphthylacetic acid 是一种具有生长素类性质的生长调节剂,可以调节植物的生长和发育1。由于其毒性小,增产效果明显,且采用萘乙酸浸泡种子,能使小麦、水稻、玉米等作物的幼苗变粗壮2-3,因此在农业上得到广泛应用。日本、美国对其在农产品中的残留均有严格限量4。因此,建立快捷准确对环境中萘乙酸残留的分析方法是研究的重点。目前国内对萘乙酸在水果和蔬菜中的残留检测已有报道。检测方法主要有分光光度法、气相色谱法、高效液相色

10、谱法等5-8。加速溶剂萃取(ASE 、固相萃取(SPE 和凝胶渗透色谱(GPC 法是目前研究应用最多、最有效的前处理技术9-15。本文采用加速溶剂萃取技术、凝胶渗透色谱净化,液相色383第4期孔德洋等:萘乙酸残留的高效液相色谱法测定谱分离测定,分析了水稻植株及环境土壤中萘乙酸的残留状况,结果满意。1实验部分111仪器与试剂W aters2695高效液相色谱仪、W aters2996二极管阵列紫外检测器、W aters凝胶色谱仪(美国W a2 ters公司;快速溶剂萃取仪(美国D i onex公司;旋转蒸发仪;氮吹仪;液相色谱柱:Sy mmetry C18柱(5m×416mm×

11、;250mm,美国W aters公司。农药标准品:萘乙酸纯度9910%(江苏省农药检定所提供;乙腈、二氯甲烷为色谱纯试剂;二氯甲烷、磷酸、氯化钠(140烘烤4h、碳酸氢钠、无水硫酸钠(130烘烤4h、硅藻土为分析纯试剂。112样品提取土壤、植株:分别称取20g待测样品,添加少量活性炭,加入无水硫酸钠碾磨混匀,以二氯甲烷为提取剂,在80、10134MPa条件下于快速溶剂萃取仪中静态循环萃取2次。ASE条件:温度80;预热1m in,加热5m in,静态提取5m in;50%溶剂快速吹扫样品,氮气吹扫萃取池的时间60s;压力:10134MPa;循环2次,收集全部溶剂。提取液经旋转蒸发浓缩至5 mL

12、,进GPC凝胶色谱仪净化。113样品净化GPC净化条件:Envir ogel T M GPC Cleanup色谱柱(19mm×300mm;流动相为二氯甲烷(色谱纯,流速5mL/m in;收集15151615m in出峰的组分5mL,氮气吹干,用甲醇定容至2mL,过0145m 滤膜,进液相色谱测定。114液相色谱测定条件色谱柱:Sy mmetry C柱(5m×416mm×250mm;流动相:体积比7030的甲醇-水(磷酸调18pH值为310,流速为1mL/m in,进样量20L。115加标回收率与检出限分别称取2010g空白土壤、植株样品,加入一定量的农药标准溶液,

13、混匀,按上述方法进行前处理、提取、净化,分别设置5组平行处理,进行加标回收率实验。2结果与讨论211ASE提取条件的优化分别考察了丙酮、石油醚、乙腈和二氯甲烷4种萃取溶剂对土壤及水稻植株中萘乙酸残留的提取效果。结果发现,石油醚和乙腈的提取效率低于65%,而丙酮后期净化过程复杂,用二氯甲烷提取可保证萘乙酸的回收率达70%以上,因此选用二氯甲烷作为萃取溶剂进行提取。考察了提取温度分别为40、60、80、100时,加速溶剂萃取仪对样品的提取效率。结果发现, 80时样品的萃取回收率达75%以上,继续增大提取温度,会导致待测组分分解,且提取溶剂损失严重,因此实验选择在80下提取。在植株提取过程中添加少量

14、活性炭,可以吸附一定量的色素,有利于后期的净化16。212GPC净化条件的优化本文采用Envir ogel T M GPC Cleanup凝胶色谱柱为分离柱,以二氯甲烷为流动相进行GPC分离。该净化方法可使色素等干扰物质与待测物达到较好的分离。空白及实际样品的液相色谱图如图1所示。由图1可以看出,该方法可使干扰组分和待测物达到良好的分离,满足分析要求。分析测试学报第29卷 图1萘乙酸的实际样品测定图Fig 11Chr omat ogra m s of 2naphthylacetic acid in real sa mp lesA.blank s oil sa mp le,B.actual s

15、oil samp le,C .blank p lant sa mp le, D.p lant sa mp le; 1.2naphthylacetic acid213方法的线性关系农药标准溶液用甲醇依次稀释,配成质量浓度分别为0105、0110、0120、0150、110、210、1010、2010mg/L 的工作溶液,在优化实验条件下进行液相色谱测定。萘乙酸的质量浓度在010520100mg/L 范围内与色谱峰高呈良好的线性关系,其回归方程为y =19111,r 2=01999,其中y 为色谱峰高(Hz ,为萘乙酸的质量浓度(mg/L 。214方法的回收率及检出限考察了萘乙酸在土壤及水稻样品中

16、的加标回收率,结果表明,在该方法条件下,土壤中萘乙酸的添加量为0105、1100mg/kg 时,回收率为92%、86%,相对标准偏差为119%、313%;植株中萘乙酸的添加量为0110、1100mg/kg 时,回收率为76%、83%,相对标准偏差为215%、219%。仪器的最低检出量(S /N =6为2×10-10g,土壤及水稻植株样品中萘乙酸的检出限为0105mg/kg 。3结论建立了用快速溶剂萃取、GPC 净化、液相色谱法测定土壤及水稻植株中萘乙酸的方法。该方法简便有效,可以很好地去除样品中的杂质干扰,土壤、植株的平均回收率为76%92%,相对标准偏差为119%313%,线性相关

17、系数均大于01999。土壤及水稻样中萘乙酸的检出限为0105mg/kg,方法符合农药残留检测要求。参考文献:1毛善国,徐建明,李东梅.赤霉素和萘乙酸不同配比浸种对小麦幼苗生长的协同作用J .安徽农业科学,2006,34(18:4672-4673.2丁益,王百年,韩效钊,等.2萘乙酸的合成方法及应用前景J .安徽化工,2004,129(3:17-18.3周秀梅,李保印,张建伟,等.萘乙酸和生根灵对火棘带冠硬枝扦插的效果J .农业科技开发,2004,18(2:28-29.483583第4期孔德洋等:萘乙酸残留的高效液相色谱法测定4世界贸易组织卫生及植物卫生措施委员会.日本修订部分热带农产品农药残留

18、限量E B/OL.2009-09-08htt p:/www1shkjxn1com/zxb/jsblzt/ggnycpzlbz/200909/t20090908_1296241ht m l.5姜欣,周宁.2萘乙酸高效液相色谱分析J.农药,1997,36(7:18-19.6周昱,庄无忌.毛细管气相色谱法测定果蔬中2萘乙酸残留量J.分析化学,1993,21(8:992.7王雪娟,魏金旺.2萘乙酸的分析方法研究J.色谱,2000,18(6:563-565.8王东新,周耀明,陈维.溶胶-凝胶毛细管柱气相色谱法直接测定萘乙酸J.分析仪器,2003,(3:35-37.9王建华,郭翠,庞国芳,等.GPC净化-

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