(PAS反应与联苯胺反应)_第1页
(PAS反应与联苯胺反应)_第2页
(PAS反应与联苯胺反应)_第3页
全文预览已结束

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、实验三 PAS反应与联苯胺反应一：实验目的：掌握显示细胞中多糖和过氧化物酶反应的原理和方法。二：实验原理：1、高碘酸希夫试剂反应简称PAS（Periodic Acid Schiff reaction）反应。组织内的多糖等都用PAS法来显示。其化学基础是利用过氧酸的氧化作用打开CC键，将CH2OHCH2OH变成CHOCHO。同样，对CH2OHCHO，CH2OHCOOH，CH2OHCH2NH2等物质均有氧化作用而放出醛基，这种新生的醛基和无色品红作用形成紫红色化合物（见图1）。颜色的深浅与糖类的多少有关。2、细胞内的过氧化物酶能把许多胺类化合物氧化为有色化合物（见图2），用联苯胺处理样本，细胞内的

2、过氧化物酶能把联苯胺氧化为兰色的苯胺蓝，进而变为棕色产物，因而可以根据颜色反应来判断过氧化物酶的有无或多少。三：实验材料与试剂1. 材料：土豆块茎、洋葱根尖或鳞茎表皮。2. 器具：显微镜、载波片、单面刀片、培养皿、镊子、染色钵、盖玻片、吸水纸。3. 试剂：（1） 过碘酸酒精溶液： 过碘酸（高碘酸） 0.4g 95%酒精 35ml 0.2 mol/L醋酸钠 5ml （即17.2g醋酸钠溶于1000ml 蒸馏水） 蒸馏水 10ml 该液需保存于冰箱，包黑纸，如变黄则失效。（2） Shiff试剂（详见指导书P75页）（3） 0.1%钼酸铵溶液：称取0.1 g钼酸铵溶于100 ml 0.85%盐水（4

3、） 联苯胺混合液（临用前配制）联苯胺 0.2g95%乙醇 100ml3%H202 2滴（5） 亚硫酸水溶液：取200ml自来水，加10ml10的偏重亚硫酸钠水溶液和10ml1mol/L的HCl，三者于使用前混匀。（6） 70乙醇四：实验的方法和步骤1 PAS反应（1）把马铃薯块茎徒手切成薄片，放入高碘酸溶液浸泡10min，用70%乙醇中浸片刻（2）将薄片浸入Schiff 试剂染色15分钟（3）取出放入亚硫酸水中洗3次，每次1min(4) 蒸馏水冲洗片刻，压片观察2. 联苯胺反应 （1）把洋葱根尖徒手切成20-40 µm厚的薄片或用镊子撕取洋葱鳞茎内表皮一小块 （2）浸在溶有0.1%钼酸铵的0.85%盐水溶液中5 min（钼酸铵起催化作用） （3）浸在联苯胺溶液内2 min至切片出现蓝色 （4）在0.85%盐水溶液中洗1 min （5）将薄片置于载玻片上展开，盖上盖玻片，显微镜检查五：实验结果1PAS反应：块茎组织细胞内可见到紫红色或深红色的淀粉颗粒，对照片无色或色淡。2联苯胺反应

人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课设设计

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论