苦竹叶总黄酮的超声提取及其抗氧化研究

1、苦竹叶总黄酮的超声提取及其抗氧化研究         09-08-30 15:08:00     作者：黄红英，邓斌，蒋刚彪    编辑：studa20【摘要】  目的探讨苦竹叶中总黄酮的提取、 鉴别方法及对羟自由基的清除能力，以充分利用苦竹叶植物资源，避免资源的浪费。方法采用超声波乙醇浸提法从苦竹叶中提取黄酮类化合物，用分光光度法测定黄酮类化合物的总含量，并利用对羟自由基的清除能力就苦竹叶总黄酮的抗氧化性进行研究。结果测得样

2、品中黄酮类化合物的总含量为C=0.407 mg/ml，回收率为100.5%，其纯度和产率均较高。结论该方法采用全物理过程，无任何污染，是提取苦竹叶中黄酮类化合物的有效途径。苦竹叶黄酮类化合物提取液对 Fenton体系产生的·OH自由基有很好的清除作用。 【关键词】  苦竹叶 总黄酮 鉴别 超声波提取 清除 自由基Abstract：ObjectiveTo study the extraction and identification of total flavanone from Pleioblastus amarus leaves and its effect of sca

3、venging hydroxyl radical. MethodsThe flavonoids were extracted from pleioblastus amarus leaves with ultrasonic wave and ethanol extraction. Spectrophotometry was used to determine the flavanone content of Pleioblastus amarus leaves. The effect of scavenging hydroxyl radicals of total flavanone from

4、Pleioblastus amarus leaves was also studied.ResultsBy this method, the content of the total flavanone of Pleioblastus amarus leaves was C=0.407mg/ml and the recovery rate was 100.5%. ConclusionThis text provides the extraction and purifying methods to get the outcome and the purity of the flavanone

5、is high. This method is a purely physical process and has no pollution. It is an ideal way to extract the total flavanone of Pleioblastus amarus Leaves. Total flavanone from Pleioblastus amarus leaves have scavenging effects on hydroxyl radicals.Key words： Pleioblastus amarus leaves;  Total fla

6、vanone; Identification; Ultrasonic wave treatment; Scavenging;  Free radicals    苦竹Pleioblastus amarus Keng f.是一种乔本科竹亚科多年生常绿植物，高达几米至十几米，常生长在山谷平原或向阳山坡，在我国南方各省市分布广泛。苦竹用途广泛1，竹笋、秆、皮、根等均已被开发利用2，3，但苦竹叶多被废弃。据本草纲目记载，苦竹叶味苦，性凉，无毒。具有医治口疮目痛，明目利九窍，治不睡，止消渴，解酒毒，发汗，中风暗哑等4功效。新近研究成果表明，苦竹叶中含有大量的黄酮类

7、化合物和生物活性多糖及其他有效成分5。黄酮类化合物有明显的抗溃疡、解痉、抗菌、抗炎、降血脂和镇痛等生理作用，还具有较强的清除生物体内超氧自由基的作用等6。苦竹叶黄酮以其巨大的资源优势，良好的药理活性和极低的毒副作用，必将成为一种极具开发价值的新型中草药7。目前，有关提取苦竹叶黄酮的方法8存在提取时间长、溶剂消耗大、提取率低等缺点而超声提取技术利用超声波辐射产生的多种作用，可极大地提高提取效率，节约溶剂，同时还可避免高温对提取成分的影响9。为此，本文首次将超声技术用于苦竹叶总黄酮的提取当中，同时对黄酮提取物进行体外抗氧化性研究，为大规模提取、开发黄酮类化合物及综合利用苦竹叶资源提供理论和实验依据

8、。1  仪器与材料TU-1800紫外可见分光光度计 (北京普析通用仪器有限公司生产)； SK2200H型超声波清洗仪 (上海科导超声仪器有限公司生产)；SHB-III循环水式多用真空泵 (郑州长城科工贸有限公司)；DZK88-A型热恒温真空干燥箱 (上海医疗器械七厂生产)；AB-1042型电子分析天平 (梅特勒-托利多上海仪器有限公司)。    双氧水、硫酸亚铁、水杨酸、95%乙醇、氢氧化钠、三氯化铝、亚硝酸钠、硝酸铝、醋酸乙酯、乙酸镁、甲醇、盐酸、氨水、冰醋酸、正丁醇、镁粉等试剂，均为分析纯，并由西安市试剂厂提供。芦丁标准品 (中国药品生物制品检定所)

9、；新鲜苦竹叶采自湖南永州市双牌县阳明山苦竹种植基地。2 方法与结果2.1 总黄酮成分提取将苦竹叶洗净烘干，粉碎，过20目筛，精确称取苦竹叶粉末10 g，加100 ml 95%乙醇，超声波提取2.0 h，抽滤。滤渣再加100 ml 95%乙醇，超声波继续提取2.0 h，抽滤，合并两次滤液，减压回收乙醇至滤液仅剩20 ml左右为止，置250 ml容量瓶中，用60%乙醇稀释至刻度，即得样品液。2.2 测定方法以芦丁为对照品测定苦竹叶中总黄酮的含量，加入铝离子试剂，同时控制适宜pH值，使黄酮化合物与铝盐形成络合物，在可见光区能获得稳定的特征吸收峰。2.3 定量实验-总黄酮的含量测定精确量取一定量的样品

10、液，在碱性条件下，加入0.30 ml 5%亚硝酸钠溶液，经硝酸铝显色后，以试剂为空白参比液，在420700 nm波长范围测定络合物的吸光度，结果表明络合物在510 nm波长处有最大吸收峰出现，故测定时选用此波长为特征吸收峰位置。精密称取芦丁20 mg，加60%乙醇水溶液定容至100 ml，从中取出25 ml并且用蒸馏水稀释至50 ml。再分别吸取0.00，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00，6.00 ml于10.00 ml具塞试管中，分别加入5%亚硝酸钠溶液0.30 ml，摇匀，静置6 min；再加10%硝酸铝水溶液0.30 ml，摇匀，静置6 min；再加4%氢氧化钠水溶液4.00 ml，用60%乙醇稀