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文档简介
1、选修一专题训练(十)血红蛋白的提取和分离A卷1. 分离不同种类的蛋白质依据的原理不包括()A. 分子的形状和大小B.所带电荷的性质和多少、吸附性质C.对其他分子的亲和力D.蛋白质分子的组成元素2. 如图能正确表示相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程的是()3. 凝胶色谱法分离蛋白质时,凝胶的种类较多,但其作用的共同点是()A. 改变蛋白质分子通过凝胶时的路径B. 吸附一部分蛋白质,从而影响蛋白质分子的移动速度C. 将酶或细胞固定在凝胶中D. 与蛋白质分子进行化学反应,从而影响其移动速度4. 在血红蛋白的整个提取过程中,不断用磷酸缓冲液处理的目的是()A. 防止血红蛋白被氧化B. 血红蛋白
2、是一种两性物质,需要酸中和C. 加速血红蛋白的提取过程D. 让血红蛋白处在稳定pH范围内,维持其结构和功能5. 下列关于凝胶色谱法的原理及操作不正确的是()A. 是利用凝胶把分子大小不同的物质分离开的一种方法B. 在洗脱过程中,大分子不能进入凝胶内部而最先流出,而小分子可以进入凝胶内部而流速缓慢,以致最后流出C. 凝胶内部有很微细的多孔网状结构,其孔隙大小与被分离的物质分子的大小无相应关系D. 般情况下,凝胶对待分离的物质没有吸附作用,因此所有待分离的物质都应该被洗脱出 来6. 将处理破裂后的红细胞混合液以2 000 r/min的速度离心10 min后,离心管中的溶液分为四层,从上到下的顺序依
3、次是()A. 血红蛋白、甲苯层、脂质物质层、细胞破碎物沉淀层B. 甲苯层、细胞破碎物沉淀层、血红蛋白、脂质物质层C. 脂质物质层、血红蛋白、甲苯层、细胞破碎物沉淀层D. 甲苯层、脂质物质层、血红蛋白、细胞破碎物沉淀层7. 血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,负责血液中Q和部分CQ的运输。请根据血红蛋白的提取和分离回答问题:(1) 凝胶色谱法的基本原理是根据 分离蛋白质的有效方法。(2) 洗涤红细胞的目的是去除 ,洗涤次数过少,无法除去 ;离心速度过高和时间过长会使 等一同沉淀,达不到分离的效果。洗涤干净的标志是 。释放血红蛋白的过程中起作用的是在洗脱过程中加入物质的量浓度为20 m
4、mol/L的磷酸缓冲液(pH为7.0)的目的是,如果红色区带,说明色谱柱制作成功。8. 凝胶色谱技术不但应用于科学实验研究,而且已经大规模地用于工业生产。下图甲为凝胶色谱柱分离蛋白质的示意图,图乙为几种被分离蛋白质相对分子质量大小与洗脱液的洗脱体积的关系,请据图分析回答a b c- d利对井皿乙(1) 图甲a、b均为蛋白质分子,其中先从层析柱中洗脱出来的是 ,原因是(2) 自己制作凝胶色谱柱时,在色谱柱底部d位置相当于多孔板的结构可由 替代。(3) 装填凝胶色谱柱时,色谱柱内不能有气泡存在,原因是。(4) 若图乙被分离的蛋白质混合液中含有肌红蛋白(相对分子质量为16 900)、血清蛋白(相对分
5、子质量为68 500)、牛乳球蛋白(相对分子质量为35 000)、牛胰岛素(相对分子质量为5 700),则图乙中 A、BC、D代表的物质依次是 。(5 )洗脱液能不能用清水代替 ?并说明原因。9. 血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,负责血液中Q或CQ的运输。请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题。(1) 将实验流程补充完整:A为,B为。凝胶色谱法是根据而分离蛋白质的有效方法。(2) 洗涤红细胞的目的是去除 ,洗涤次数过少,无法除去 ;离心速度过高和时间过长会使 一同沉淀,达不到分离的效果。洗涤干净的标志是。释放血红蛋白的过程中起作用的是 。在洗脱过程中加入物质的量浓度为20 m
6、mol/L的磷酸缓冲液(pH为7.0)的目的是。如果红色区带 ,说明色谱柱制作成功。10. 蛋白质分子中,氨基酸的a -氨基和a -羧基虽然大部分都能结合形成肽键,但是蛋白质分子内仍含有各种酸性基团和碱性基团,如肽链末端的a -氨基和a -羧基、天冬氨酸和谷氨酸残基中的羧基、赖氨酸和组氨酸残基中的各种碱性基团,所以蛋白质是两性电解质。在酸性溶液中,碱性基团的解离程度增大,使蛋白质带正电荷;在碱性溶液中,酸性基团的解离 程度增大,使蛋白质带负电荷。当溶液到达某一pH时,蛋白质可因内部酸性或碱性基团的解离程度相等而呈等电状态,这时溶液的pH叫做蛋白质的等电点。不处于等电点状态的蛋白 质分子的正、负
7、电荷量是不相同的。试回答下列问题。多数蛋白质的等电点近于5, 一般含碱性基团较多的蛋白质的等电点 (填“偏高”或“偏低”)。(2) 根据等电点的不同,你能用方法将不同种类的蛋白质分子分离开。(3) 简述根据等电点分离不同种类的蛋白质分子的原理。A卷答案1. D 2. 选 B 3. 选 A 4. D 5 C 6 选 D7 答案 :(1) 相对分子质量的大小(2) 杂蛋白 ( 血浆蛋白 ) 血浆蛋白 白细胞 离心后的上清液不再呈现黄色 蒸馏水和甲苯(3) 准确模拟生物体内的生理环境 ,保持体外的 pH 和体内的一致 均匀一致地移动8 答案 :(1)a a 相对分子质量较大 , 无法进入凝胶内部的通
8、道 , 只能在凝胶外部移动 ,路程较 短,移动速度较快(2) 尼龙网和 100 目的尼龙纱(3) 气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序 ,降低分离效果(4) 牛胰岛素、肌红蛋白、牛乳球蛋白、血清蛋白(5) 不能。洗脱液是磷酸缓冲液 , 可以防止溶液 pH 剧烈变化对蛋白质活性的影响 , 清水则 没有此作用 , 因此不能换成清水。9 答案 :(1) 血红蛋白的释放 样品的加入和洗脱 相对分子质量的大小(2) 杂蛋白 ( 血浆蛋白 ) 血浆蛋白 白细胞和淋巴细胞离心后的上清液中没有黄色 蒸馏水和甲苯(3) 准确模拟生物体内的生理环境 ,保持体外的 pH 和体内一致 均匀一致地移动10 答案:(1)
9、偏高 (2)电泳(3) 调节电泳槽中缓冲液的 pH, 使某种蛋白质处于等电点状态 ,而其他蛋白质带有电荷 ,在电场作用下 ,带有正、负电荷的蛋白质分别移向两极,而不带电荷的蛋白质留在原处。B卷1.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入SDS的作用是 ()A. 增大蛋白质的相对分子质量B.改变蛋白质的形状C.掩盖不同种蛋白质间的电荷差别D.减少蛋白质的相对分子质量2. 下列关于血红蛋白提取和分离的过程及原理叙述,正确的是 ()A. 为防止血液凝固,应在采血容器中预先加入抗凝剂柠檬酸钠B. 红细胞的洗涤使用5倍体积的蒸馏水,直到离心后上清液不呈现黄色为止C. 利用质量分数为 0.9%的NaCI溶液对血
10、红蛋白溶液透析 12小时,可以去除小分子杂质D. 在凝胶柱中加入蛋白样品后即可连接缓冲液洗脱瓶进行洗脱和收集样品3. 下列是关于血红蛋白的提取和分离实验中的关键步骤,其中正确的是()A.蛋白质的提取和分离一般可分为粗分离、样品处理、纯化、纯度鉴定4步B. 蛋白质的提取和分离实验可以以猪、牛、羊、蛙等动物的血液为材料分离血红蛋白C. 对样品的处理过程分为红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、透析和分离血红蛋白溶液D. 对蛋白质的纯度鉴定的方法中使用最多的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳4. 有关凝胶色谱法和电泳法的说法正确的是()A.它们都是分离蛋白质的重要方法B.它们的原理相同C. 使用凝胶色谱法需要用缓
11、冲溶液而电泳不需要D. 以上说法都正确5. 下列样品的加入和洗脱的操作不正确的是()A.加样前,打开色谱柱下端的流出口,使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到凝胶面的下面B. 用吸管小心地将1 mL透析后的样品加到色谱柱的顶端,不要破坏凝胶面C. 加样后,打开下端出口,使样品渗入凝胶床内D. 等样品完全进入凝胶层后,关闭下端出口6. 已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子,分子大小、电荷的性质和数量情相对分子质虽 T戊IIIb电荷量况如下图所示,下列有关蛋白质分离的叙述正确的是 ()A.若将样品以 2 000 r/mi n 的速度离心10 min,分子戊在沉淀中,则丙也一定在沉淀中B.若用
12、凝胶色谱法分离样品中的蛋白质,则分子甲移动速度最快C. 将样品装入透析袋中透析12 h,若分子丙保留在袋内,则乙也一定保留在袋内D. 若用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子,则分子甲和分子丁形成的电泳带相距最远7. 下图为凝胶色谱法分离蛋白质示意图和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳示意图。据图分析不正确的是 ()武白质凝含狗團甲图巴A. 在装填图甲中凝胶色谱柱时一旦发现柱内有气泡存在,就需要重装B. 图甲中大分子蛋白质因阻力大而移动慢,所以最后从层析柱中流出来C图乙凝胶中加入的 SDS可以使蛋白质的迁移速率完全取决于分子大小D.已知凝胶中的SDS带负电,则应在电泳槽的处接电源负极,处接
13、电源正极8. 红细胞含有大量血红蛋白,红细胞的机能主要是由血红蛋白完成的,血红蛋白的主要功能是携带Q或CQ。我们可以选用猪、牛、羊等动物血液进行实验来提取和分离血红蛋白。请 回答下列有关问题:(1) 血红蛋白提取和分离的程序可分为四步:、和。(2) 实验前取新鲜的血液,要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,马上进行离心加蒸馏水和甲苯处理,收集血红蛋白溶液。 加入柠檬酸钠的目的是 。 以上所述的过程即是样品处理,它包括、分离血红蛋白溶液。样品纯化的目的是。9.如图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置,请回答下列问题I(1)血红蛋白是人和其他脊椎动物红细 胞的主要组成成分,其在红细胞中的作
14、 用体现了蛋白质具有功能。我们通常选用猪、牛、羊等动物的 血液进行实验,实验前取新鲜的血液时 要切记在采血容器中预先加入柠檬酸 钠,取血回来,马上进行离心,收集血红蛋白溶液。加入柠檬酸钠的目的是(2)甲装置中,B是血红蛋白溶液,则A是;乙装置中,C溶液的作用是 甲装置用于 ,目的是。用乙装置分离蛋白质的方法叫 ,是根据分离蛋白质的有效方法。 在操作 中加样(下图)的正确顺序是最后经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳进行(或沉淀),随着硫10.已知蛋白质混合液中硫酸铵浓度的不同可以使不同种类的蛋白质析出 酸铵浓度的增加,混合液中蛋白质析出的种类和总量增加。下表是某蛋白质混合液中的不同 蛋白质从开始析出到完
15、全析出所需要的蛋白质混合液中的硫酸铵浓度范围。蛋白质混合液中的硫酸铵浓度()析出的蛋白质15 20甲蛋白23 30乙蛋白25 35丙蛋白38 40丁蛋白请据表回答(1) 若只完全析出甲蛋白,混合液中最合适的硫酸铵浓度应为 。(2) 向该蛋白质混合液中加入硫酸铵溶液(或硫酸铵),使混合液中的硫酸铵浓度达到30%,会析出若干种蛋白质,它们分别是。(3) 通过改变混合液中的硫酸铵浓度 (填“能”或“不能”)从混合液中得到所有的、不含有其他蛋白质的乙蛋白,原因是_。(4) 如果蛋白质析出物中还含有一定量的硫酸铵,可用半透膜除去析出物中的硫酸铵。用半透膜能除去析出物中硫酸铵的原理是 B卷答案1.选C 2选A 3选D 4选A 5选A 6选A 7选B8答案:
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