完整 微生物标本正确采集运送

1、临床微生物标本的采集与运送临床微生物标本的采集与运送临床检验中心临床检验中心 贺锐贺锐临床细菌学检验流程 标 本 涂 片 培 养 鉴 定 药敏试验 发 报 告细菌鉴定细菌鉴定形态学检查形态学检查生物化学检查法生物化学检查法免疫学检查法免疫学检查法分子生物学检查法分子生物学检查法生物学检查法生物学检查法细菌分类细菌分类涂片镜检涂片镜检 临床标本的规范采集与处理临床标本的规范采集与处理 是细菌学检验标准化的开始是细菌学检验标准化的开始标本采集原则标本采集原则病原学检查疾病早期、急性期症状典型抗菌药物使用前操作实际感染部位的标本标本采集原则标本采集原则立即送检无菌不得使用消毒剂姓名、年龄、性别、取材

2、部位、临床诊断和检验项目，血培养的范围（美国CUMITECH规定）病人体温： 38 36WBC计数： 10000 1000以上四条任意一条符合，送血培养标本以上四条任意一条符合，送血培养标本血液细菌培养（血培养）血液细菌培养（血培养）血培养的范围（国内）血培养的范围（国内）不明原因的发热（大于不明原因的发热（大于3838）或低温（小于）或低温（小于3636） 寒战、休克、僵直寒战、休克、僵直严重的局部感染（脑膜炎，心内膜炎，肺炎，肾盂肾炎，腹部术严重的局部感染（脑膜炎，心内膜炎，肺炎，肾盂肾炎，腹部术后感染等）后感染等）白细胞增多（特别有白细胞增多（特别有“核左移核左移”, ,未成熟的或杆状核

3、的白细胞）未成熟的或杆状核的白细胞） 粒细胞减少粒细胞减少血小板减少血小板减少 皮肤粘膜出血皮肤粘膜出血 多器官衰竭多器官衰竭 CRP/PCTCRP/PCT升高升高心率异常加快，低血压或者高血压，呼吸频率加快等心率异常加快，低血压或者高血压，呼吸频率加快等 何时采集何时采集 抗菌药物治疗前抗菌药物治疗前 开始出现寒战（寒战前或后）开始出现寒战（寒战前或后） 当怀疑心内膜炎当怀疑心内膜炎( (出现低热出现低热) ) 严重的局部感染严重的局部感染 03060Time (min)Temp体温体温Chills寒战寒战Blood Cultures血培养血培养BACTEREMIALEVEL菌血症的水平菌血

4、症的水平采血次数与间隔采血次数与间隔(1) (1) 急性感染患者急性感染患者: : 立即分别从两臂采立即分别从两臂采2 2份血样份血样(2) (2) 感染性心内膜炎患者感染性心内膜炎患者: : 24h 24h内采血内采血3 3次（次（6 6次），每次间隔不少于次），每次间隔不少于3030分钟分钟(3) (3) 发热原因不明患者发热原因不明患者: : 24h 24h内再采血内再采血2 2（3 3）次，间隔不少于）次，间隔不少于6060分钟，如阴性分钟，如阴性应继续送检应继续送检 血循环中的细菌有“暂时性”、“持续性” 一过性的菌血症，细菌仅在外周血中持续数秒 共生菌、复数菌 提高检出率、减少漏检

5、，判断病原为何要多次采血为何要多次采血？采血部位采血部位 多次采血时，应在不同部位进行多次采血时，应在不同部位进行 切忌在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本切忌在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本避免由插管或导管取标本避免由插管或导管取标本 极易由表皮葡萄球菌造成污染极易由表皮葡萄球菌造成污染消毒剂的作用时间标本采集步骤标本采集步骤血培养标本的运送要求和拒收标准血培养标本的运送要求和拒收标准采血量采血量 成年人采血量为成年人采血量为101020ml, 20ml, 婴幼儿为婴幼儿为1 12ml2ml，儿童，儿童3 35ml5ml血液标本与培养基之比血液标本与培养基之比1:5 -1:101:5 -1:10

6、为宜为宜成人血液中含有的菌量成人血液中含有的菌量 =10cfu/ml90%)金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌大肠埃希菌大肠埃希菌其他肠杆菌科细菌其他肠杆菌科细菌铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌肺炎链球菌肺炎链球菌白假丝酵母菌白假丝酵母菌阳性血培养标本中罕见的病原菌( 5：1 阳性出现时间： 中心静脉导管所取血样培养出现阳性的时间比外周血早2小时以上污染问题污染问题 可接受的污染概率在可接受的污染概率在2%2%以下，即便是最佳的标本采集流程以下，即便是最佳的标本采集流程也不能完全避免污染也不能完全避免污染 常见的污染细菌也可能是引起感染的病原菌 很多情况下，可能的污染会来自一个或一套血培养瓶 如果没有第二套

7、血培养，要给出有疑问的培养结果的如果没有第二套血培养，要给出有疑问的培养结果的临床意义是几乎不可能的临床意义是几乎不可能的 药敏试验对于污染菌是无需做的药敏试验对于污染菌是无需做的标准需氧瓶 259789 蓝 色 血和无菌体液 10mlBacT/ALERT SA BacT / ALERT 3D 120 血培养仪各种血瓶简介血培养仪各种血瓶简介血瓶名称血瓶名称 货货 号号 瓶盖颜色瓶盖颜色 标本名称标本名称 最佳标本量最佳标本量标准厌氧瓶 259790 紫 色 血和无菌体液 10mlBacT/ALERT SN中和抗生素瓶 259791 浅绿色 血和无菌体液 10mlBacT/ALERT FA中和

8、抗生素瓶 259793 橙 色 血和无菌体液 10mlBacT/ALERT FA儿童培养瓶 259794 黄 色 血 新生儿 0.51ml 2岁以下 1-3mlBacT/ALERT PF 2岁以上 4ml痰结核培养瓶 259797 红 色 痰和无菌体液 0.5mlBacT/ALERT MP血结核培养瓶 251011 黑 色 血和无菌体液 35mlBacT/ALERT MB （259799）浆膜腔积液浆膜腔积液 脑脊液标本的采集脑脊液标本的采集尿液标本尿液标本 应在用药前或停药应在用药前或停药3 35 5天后留取标本，并天后留取标本，并 使尿液在膀胱内停留使尿液在膀胱内停留6 68h8h以上，早

9、晨起床以上，早晨起床 后第一次尿阳性率较高（睡前少饮水）后第一次尿阳性率较高（睡前少饮水） 尿液是良好的培养基，尿液标本必须在尿液是良好的培养基，尿液标本必须在2 2个小时内送检个小时内送检，于，于4 4中可保存中可保存1818小时小时泌尿道感染、尿道感染：膀胱炎、（肾盂）肾炎、肾/膀胱结核结果解释结果解释 正常情况下从肾脏排泌至膀胱的尿液是正常情况下从肾脏排泌至膀胱的尿液是无菌的，但膀胱中的尿液经尿道排出体无菌的，但膀胱中的尿液经尿道排出体外时可受到尿道中细菌污染，而出现细外时可受到尿道中细菌污染，而出现细菌菌 清洁中段尿标本中清洁中段尿标本中 革兰阴性杆菌菌落计数革兰阴性杆菌菌落计数101

10、05 5CFU/mlCFU/ml 革兰阳性球菌革兰阳性球菌10104 4CFU/mlCFU/ml有诊断意义有诊断意义标本来源标本来源菌落数菌落数CFU/mlCFU/ml结果评价结果评价清洁中段尿清洁中段尿1 110104 41 1101010104 4( 10104 4 -10 -105 5 )10105 5无意义，仅报告菌落数及革兰染色特征，并注明是纯无意义，仅报告菌落数及革兰染色特征，并注明是纯培养或是混合菌生长。培养或是混合菌生长。纯培养有意义（尤其是革兰纯培养有意义（尤其是革兰阳性球菌生长阳性球菌生长），需进行），需进行细菌鉴定和药敏试验；混合菌生长无意义，仅做革兰细菌鉴定和药敏试验；

11、混合菌生长无意义，仅做革兰染色镜检。染色镜检。 纯培养或混合菌生长都有意义，需进行细菌鉴定和药纯培养或混合菌生长都有意义，需进行细菌鉴定和药敏试验；敏试验；4 4种以上细菌生长无意义，报告标本污染。种以上细菌生长无意义，报告标本污染。导尿导尿10103 33 3种以内细菌生长都有意义，需进行细菌鉴定和药敏试种以内细菌生长都有意义，需进行细菌鉴定和药敏试验；验；4 4种以上细菌生长无意义，报告标本污染。种以上细菌生长无意义，报告标本污染。耻骨上膀胱穿刺耻骨上膀胱穿刺任意数目任意数目都有意义，所有细菌均需做细菌鉴定和药敏试验。都有意义，所有细菌均需做细菌鉴定和药敏试验。不同方法采集的尿标本培养结果

12、评价不同方法采集的尿标本培养结果评价痰标本留取质量的好坏直接影响到对下痰标本留取质量的好坏直接影响到对下呼吸道病原学的诊断，导致抗菌治疗失呼吸道病原学的诊断，导致抗菌治疗失败，以及造成耐药菌的出现败，以及造成耐药菌的出现痰液是临床细菌学检验最常见的标本痰液是临床细菌学检验最常见的标本但不是下呼吸感染诊断的最佳标本但不是下呼吸感染诊断的最佳标本瘘管则以无菌方法采取组织瘘管则以无菌方法采取组织碎片碎片厌氧菌检查厌氧菌检查厌氧菌是人体许多部位（如皮肤、口咽部、肠厌氧菌是人体许多部位（如皮肤、口咽部、肠 道和泌尿生殖道）正常菌群中的一部分，因此道和泌尿生殖道）正常菌群中的一部分，因此 下列材料无需做厌

13、氧培养：下列材料无需做厌氧培养： （1 1）咽、鼻、尿道或直肠拭子）咽、鼻、尿道或直肠拭子 （2 2）咳出的痰，通过支气管镜取的分泌物）咳出的痰，通过支气管镜取的分泌物 排出或导出的尿、粪及胃内容物排出或导出的尿、粪及胃内容物需厌氧培养的标本需厌氧培养的标本中华检验医学杂志2000年第2期 深部伤口或软组织脓肿的脓，特别是伴有恶臭或含有硫磺颗粒时 可疑为气性坏疽或少见的严重产气或坏死性感 染取得的组织 粘膜部位的感染灶取得的材料 从脑、肺、肝或其他器官的脓肿的材料 无菌区感染灶的吸出液，包括血液、脑脊液、 腹水、胸水、关节液等 人或动物咬伤感染的材料 变色的或置于紫外线下发荧光的渗出物 可疑引

14、起肉毒杆菌食物中毒的食物 为排除或尽量减少正常菌群中厌氧菌的污为排除或尽量减少正常菌群中厌氧菌的污染，染，用注射器抽取标本比用拭子更好用注射器抽取标本比用拭子更好，特，特别适用于下列临床情况别适用于下列临床情况 从未开放的脓肿抽取脓液从未开放的脓肿抽取脓液 通过胸腔穿刺抽出的胸腔液通过胸腔穿刺抽出的胸腔液 从耻骨联合上方做膀胱穿刺吸出从耻骨联合上方做膀胱穿刺吸出 或从或从肾俞口管收集的尿肾俞口管收集的尿 气管切开吸取的肺分泌物气管切开吸取的肺分泌物 穿刺抽出的腹腔液穿刺抽出的腹腔液 通过腰椎穿刺抽出的脑脊通过腰椎穿刺抽出的脑脊 窦道标本窦道标本正确地运送厌氧菌标本正确地运送厌氧菌标本临床标本一

15、旦离开人体部位，在进入厌氧临床标本一旦离开人体部位，在进入厌氧环境前，必须防止大气中氧的毒性作用。环境前，必须防止大气中氧的毒性作用。应及时将取材的拭子、塑料导管内的少量应及时将取材的拭子、塑料导管内的少量液体、吸入注射器的标本装入厌氧生物袋液体、吸入注射器的标本装入厌氧生物袋或运送培养基管中，在运送过程中要保持或运送培养基管中，在运送过程中要保持厌氧状态厌氧状态努力为各种微生物的生存提供保障努力为各种微生物的生存提供保障保持标本的原始性保持标本的原始性及时送检及时送检涂片与培养哪个更好涂片与培养哪个更好 ？涂片涂片 及时、无抗菌药物干扰 无法给出准确的感染病原及药敏培养培养 明确病原，可靠的药敏 检测周期较长、抗菌药物的干扰 细菌细菌 厌氧菌厌氧菌 有正常菌群存在的部位有正常菌群存在的部位 厌氧培养生长生长 见到