原柱富集高效液相色谱法测定水体中痕量邻苯二甲酸二甲酯

1、原柱富集高效液相色谱法测定水体中痕量邻苯二甲酸二甲酯    The emperor treats talent as tools, using their strongpoint to his advantage.  Silence in times of suffering is the best.  The love of money is the root of all evil.             &#

2、160;        作者：肖尚友 王杰峰 夏之宁 穆小静In a great river great fish are found; but take heed lest you be drowned.  【摘要】  将基于分离柱富集的高效液相色谱法应用于水样中低浓度邻苯二甲酸二甲酯的含量测定。此法的特点是萃取富集和分离分析过程在同一个C18柱上进行，低含量试样在线富集，富集倍数可达近千倍，直接检出限低。对于水样中的邻苯二甲酸二甲酯，在0.110

3、60;g/L浓度范围内线性关系良好;检出限为0.02 g/L;日内和日间检测的相对标准偏差均<3%;实际水样测定时回收率为104.3%105.3%，能够满足轻微污染水样中邻苯二甲酸二甲酯的检测要求。 Manners make the man.  【关键词】  萃取富集, 高效液相色谱, 邻苯二甲酸二甲酯，在柱1 引 言高效液相色谱(HPLC)已在环境分析、药物分析、食品分析等领域得到广泛应用()。但是，HPLC配备的紫外吸收检测器限制了HPLC的检测灵敏度，不能满足低含量组分分析要求。为提高HPLC

4、的检测灵敏度，通常将样品富集后再进行分离与检测。最早采用的富集方法为离线富集，包括液液萃取法和固液萃取法1。但这些方法操作繁琐、还会造成组分流失。固相微萃取技术(SPME) 因具有操作简单、处理时间短、样品量小、无需萃取剂、选择性高等优点得到了快速发展25。但萃取头的使用寿命太短，成本高、容易产生过饱和现象68。在线固相萃取富集方法915，即在分析柱前串联一根富集柱，试样通过富集柱进行预富集后再洗脱、分离和检测(医药学/临床医学论文 )。但其还是存在两点不足：需要在普通HPLC分析仪器基础上增加独立的预富集柱;预富集柱上的样品经洗脱进入分析柱的过程会引起样品区带的展宽，降低柱效。目前

5、，在线固相萃取高效液相色谱(SPEHPLC)分析低浓度物质，并使用C18填料进行预富集的报道已较多，如Tasso等16利用在线富集高效液相色谱联用方法测定了老鼠血浆中的加替沙星的含量，陈素清等7则用此方法测定了老鼠血浆中的穿心莲内酯，富集柱填充的均是C18填料;李崇瑛等17以Spherisorb C18柱为富集柱，利用在线固相萃取富集高效液相色谱法测定了环境水样中的克百威残留，检出限为0.05 g/L。本实验采用C18色谱柱，分时间段来实现萃取富集和分离两种功能。首先，当大量极性试样流经C18柱时，试样中的弱极性组分将被萃取而几乎完全保留在柱头上，形成一段很窄的样品区段。由

6、于采用泵进样，而非进样阀进样，进样量很大，从而达到富集的目的。富集柱与分析柱为同一根色谱柱，称之为原柱富集。本实验以邻苯二甲酸二甲酯(dimethyl phthalate, DMP)标液为对象，建立了原柱富集高效液相色谱方法。将本方法用于水体中痕量(0.02 g/L)的弱极性污染物DMP含量的测定，结果满意。2 实验部分2.1 仪器与试剂原柱富集高效液相色谱分析系统为一台可进行二元梯度洗脱的岛津LC10AT型高效液相色谱仪，包括两台高压输液泵(A泵和B泵均为LC10ATvp型)，一台SPD10Avp紫外检测器; HW2000色谱工作站

7、(上海千谱软件有限公司);Spherisorb C18色谱柱(250 mm×4.6 mm i.d., 5 m，大连依利特分析仪器有限公司)，其中A泵用于进样，B泵用于样品洗脱及分离的流动相输送，两泵管路并入混合器(切换阀)后，连接C18柱。萃取富集与色谱分析过程均在同一根C18柱上进行。混合器为切换阀，在本研究中实现A与B泵的切换功能。甲醇(分析纯，重庆川东化工有限公司化学试剂厂); 邻苯二甲酸二甲酯(分析纯，重庆东方试剂厂)，用甲醇配制成6 mg/L的储备液，水样和流动相均经过0.45 m微孔

8、滤膜过滤并超声脱气。2.2 色谱条件One cannot be in two place at once.  洗脱流动相为V(甲醇)V(水)=6040混合液，流速为0.6 mL/min，柱温为室温，检测波长为240 nm。2.3 实验方法启动程序，首先控制流速比为A泵B泵=0100，使流动相流过柱子，活化色谱柱。然后控制流速比为A泵B泵=1000，输送适量水样流过色谱柱。当水样通过C18柱时，其中的疏水性物质由于疏水作用被富集在柱头上。富集结束后再控制流速比为A泵B泵=0100，此时流动相将柱头上的疏水性物质洗脱下来，经过色谱柱进行分离，于24

9、0 nm波长下检测，用外标工作曲线法对DMP进行定量分析。 分 析 化 学第37卷第8期肖尚友等：原柱富集高效液相色谱法测定水体中痕量邻苯二甲酸二甲酯Manners make the man.         3 结果与讨论When love puts in, friendship is gone.  3.1 流动相的选择流动相的组成对本方法有重要影响，因为富集时DMP与C18填料已达到分配平衡，必须调整流动相的极性使富集在柱子上的组分

10、解吸，然后再进行分离与检测。如果流动相极性减小，待测物分配系数减小，保留时间短，无法与干扰组分分离;反之，待测物保留时间长，峰型展宽严重，柱效降低。以30 g/L DMP溶液为试样，0.6 mL/min富集10 min，在不同极性流动相条件下得到的图谱见图1。由图1可知，当B泵流动相为V(甲醇)V(H2O)=6040，流速为0.6 mL/min时，DMP才能在柱上有一定的保留，并与干扰组分良好地分离。因此，选取V(甲醇)V(H2O)=6040混合液为流动相。The small courtesies sweeten life; the great

11、er ennoble it.  3.2 原柱富集条件的考察The best of friends must part.  Hide one's talents in a napkin.  The peacock has fair feathers, but foul.  3.3 原柱富集HPLC定量分析参数的考察The farmers are the founders of civilization and prosperity.    If they say you are good, ask yours

12、elf if it be ture.  3 3.4 环境水样中DMP的测定采用本方法分析重庆大学校内的人工湖水样，根据外标工作曲线法计算出该水样中的DMP浓度为0.3 g/L。为了评价方法的准确度及系统误差，对该水样进行了加标回收实验，回收率测定结果见表1。由表1数据可知,试样中DMP浓度为0.33.0 g/L时，原柱富集HPLC方法测定的准确度均较高。It is right to put everything in its proper use.  【参考文献】  1 Hu XianGang(

13、胡献刚), Luo Yi(罗 义), Zhou QiXing(周启星), Xu Lin(徐 琳). Chinese J. Anal. Chem.(分析化学)， 2008， 36(9): 116211662 Chen J, Pawliszyn J B. Anal Chem., 1995, 67(5): 253025333 Hou 

14、J G, Ma Q, Du X Z, Deng H L, Gao J Z. Talanta, 2004, 62: 2412464 Polo M, Llompart M, Garcia Jares C, Cela R. J. Chromatogr. A, 2005, 1072: 63725&

15、#160;Jarmalaviciene R, Szumski M, Kormysova O, Klodzinska E, Westerlund D, Krawczyk S, Mickevicius D, Buszewski B, Maruska A. Electrophoresis, 2008, 29(8): 175317606 De F tima 

16、;alpendurade M. J. Chromatogr. A, 2000, 889: 3147 Chen SuQing(陈素清), Liang HuaDing(梁华定), Huang WeiYa(黄微雅), Han DeMan(韩德满), Wang XiMei(王习梅). Chinese J. Anal. Chem.(分析化学)， 2008， 36(7):

17、0;9599638 Zhu Tao(朱 涛), Yang GengLiang(杨更亮), Jiang MingMing(姜明明), Cao WeiMin(曹伟敏). Chinese J. Anal. Chem.(分析化学)， 2008， 36(7): 8958999 Chen L G, Yu A M, Zhuang X D, Zhang&

18、#160;K, Wang X P, Ding L, Zhang H Q. Talanta, 2007, 74: 14615210 Lubov O, Mikhail S, Grigoriy T, Shpigun O, Zolotov Y. Anal. Chim. Acta, 2005, 538: 354011 

19、Brunetto M R, Obando M A, Gallignani M, Alarcon O M, Nieto E, Salinas R, Burguera J L, Burguera M. Talanta, 2004, 64: 1364137012 Li J T, Chen L G, Wan

20、g X, Jin H Y, Ding L, Zhang K, Zhang H Q. Talanta, 2008, 75: 1245125213 Scott S S, Abdul M. J. Chromatogr. A, 2008, 1205: 263514 Chen ZhangYu(陈章玉)， Yang GuangYu(杨光宇)， Miao MingMing(缪明明)， Su QingDe(苏庆德). Chinese J. Anal. Chem.(分析化学)， 2006， 34(5): 67968215 C