榛花对四氧嘧啶性糖尿病小鼠肝糖原含量的影响

1、榛花对四氧卩密唳性糖尿病小鼠肝糖原含量的影响作者：蔡英兰，金香子，朴丽花，李相伍【摘要】 目的 观察榛花对糖尿病小鼠肝糖原含量的影响. 方 法用四氧喀唳制作小鼠糖尿病模型，共设 6 个组，即正常对照组、 糖尿病对照组、药物对照组及大、中、小剂量实验组（榛花浓缩液 5. 00, 2.50,1.25mL/kg）,实验周期为 3 周，采用组织化学方法显示肝糖原.结果 大、 中、 小剂量榛花浓缩液实验组肝糖原含量明显增多. 结 论榛花可促进肝组织糖原合成.【关键词】糖尿病，实验性;肝糖原;植物，药用；小鼠榛花具有降低血糖作用，目前己被证实的降低血糖作用机制有促 进胰岛 B 细胞的分泌功能， 提高血清胰

2、岛素水平;作用于受体或受体后 水平，增加胰岛素受体数目或提高亲合力;抑制胰高血糖素分泌;促进 周围组织及靶器官对糖的利用；清除自由基及抗脂质过氧化等1,2. 前期实验结果表明，榛花具有清除自由基及抗脂质过氧化作用，而对 受损胰岛 B细胞的再生和修复作用不明显.本实验通过组织化学方法 观察了榛花对糖尿病小鼠肝糖原含量的影响，为探讨榛花的降低血糖 机制提供实验依据.1 材料1. 1 实验动物 取昆明种雄性小鼠，体重为（202） g,由延边 大学医学部实验动物科提供.1.2 药品与试剂榛花采集于长白山地区，采用水提取法提取， 具体方法为取榛花780g,加蒸镯水1500mL煮沸30minlh,过滤后浓

3、 缩至200mL,灌封备用.盐酸二甲双腕片为贵州圣济堂制药有限公司产 品，批号为20020109;四氧喘噪为香港 FARC0 化学供应公司产品.1. 3 仪器 Leica820 型组织切片机为德国产，OLWUS VAN0X 型 万能显微镜为日木产，TD-2000 型真彩病理细胞显微分析系统为北京 天地百年科技有限责任公司产品.2 方法2.1 四氧喀唳性糖尿病小鼠模型的制作 取雄性小鼠，先适应性 喂养1 周，禁食 24h,自由饮水.将四氧喘唳用生理盐水配制成 7g/L 注射液，每只小鼠按 70mg/kg 剂量尾静脉 1 次性注射给药.注射后第 5 日测定空腹血糖，将空腹血糖值大于 10. 00m

4、mol/L 者判定为糖尿病模 型制作成功3,4.2.2 分组及处理 取正常小鼠 10 只为正常对照组,取糖尿病小鼠 50只，随机分为 5 个组，分别为糖尿病对照组、药物对照组及榛花大、 中、小剂量实验组.实验期间各组小鼠均给予块料喂养，大、中、小剂 量实验组每日分别灌服给予榛花浓缩液 5. 00, 2.50, 1.25mL/kg;药物 对照组每H 灌服给予盐酸二甲双月瓜 lg/kg;糖尿病对照组和正常对照 组每日灌服给予相应体积的蒸懈水.实验周期为 3 周.2.3 组织化学观 察实验周期结束后将小鼠脱颈处死，迅速剖取肝脏，将肝组织在 4C Carnoy 氏液中低温固定 68h,经乙醇梯度脱水，

5、二甲苯透明，石蜡 包埋，切成 5 Um 切片，行碘酸雪夫氏（PAS）反应显示肝糖原5. 对照实验:用唾液消化肝组织中的糖原后再行 PAS 反应.染色后在显微 镜下观察并拍片，并利用病理显微分析系统进行定量分析，每组随 机选择 5 张标本，每张标本中再随机选择 3 个视野，在 400 倍显微镜 下测定每个视野的糖原颗粒面积百分比.2.4 数据处理应用 SPSS10. 0 统计软件进行方差分析.3 结果肝糖原经 PAS 反应染色后，在光学显微镜下呈紫红色颗粒.正常 对照组肝糖原颗粒含量丰富，染色深（图 1）;糖尿病对照组肝细胞糖 原颗粒含量明显减少，染色浅（图 2）;药物对照组与大、中、小剂量 实

6、验组肝细胞糖原颗粒含量明显增多，染色较深（图 3图 6）,其中 以大剂量实验组的变化最为明显， 接近正常对照组.肝糖原定量统计分 析结果表明，大、中、小剂量实验组肝糖原面积百分比与糖尿病对照 组比较明显升高，有显著性差异（P<0.01,表 1）.表 1 肝糖原定 量分析结果4 讨论肝脏是糖代谢的主要器官，主要通过促进糖原合成、葡萄糖利用 及抑制糖异生等途径使血糖降低，而肝脏的糖代谢主要是在胰岛素的 诱导下完成的.四氧喀唳性糖尿病小鼠体内胰岛素水平明显下降，肝脏 糖代谢出现紊乱，糖原合成降低，葡萄糖利用减少，糖异生加强，导 致血糖升高.本实验组织化学染色结果表明，糖尿病对照组小鼠肝

7、细胞 内糖原颗粒含量明显减少，着色浅，提示糖尿病小鼠肝细胞合成糖原 功能明显减弱，与文献报道相符6 .3 周实验周期后，药物对照 组及大、中、小剂量实验组肝糖原含量与糖尿病对照组相比较明显增 多，着色也较深，其中大剂量实验组变化最为明显，接近于正常对照 组，提示榛花能够改善糖尿病小鼠肝内糖代谢紊乱，增强肝细胞合成 糖原的功能，从而降低血糖.【参考文献】1 林兰，魏军平.中西医结合防治糖尿病回顾与展望J.医学研究通讯，2000, 29 (6) :49.2杨晓晖，张力，吕仁和.中药降低血糖复方治疗实验性糖 尿病研究进展J.中国中西医结合杂志，1998, 18 (3) :85.3朱愉，多秀瀛.实验动物的疾病模型M.天津:科技翻 译出版社，1997.252.4徐淑云.药理实验方法学M.第 2 版.北京:人民卫生岀 版社，19