紫外分光光度法测定米非司酮血药浓度

1、    紫外分光光度法测定米非司酮血药浓度        摘要目的：介绍应用紫外分光光度法测定米非司酮血药浓度的方法。方法：以氯仿为提取液，甲醇为溶媒，在304 nm处进行测定。血浆标准曲线线性范围424 g.ml-1(r=0.999 7)。结果：平均回收率(93.3±4.6)%，RSD日内(2.1±0.8)%，RSD日间(3.1±0.4)%。应用该法对10例孕妇进行米非司酮血药浓度测定，其浓度在1020 g*ml-1之间。结论：分析结果表明该方

2、法简便可行。关键词米非司酮，紫外分光光度法，血药浓度Determination of mifepristone in human plasma by UV-spectrophotometryXiong Fengying, Jian Jie, Zhou Shuqun,et al(Liuzhou Workers Hospital, Guangxi 545005)Determination of mifepristone in plasma by UV-spectrophotometry was described. Trichloromethane was used as extraction s

3、olvent, methyl alcohol as solvent. The linear range was 424 g.ml-1 (r=0.999 7). The average recovery was (93.3±4.6)%, The RSD of within-day was 2.1%, and between-day was 3.1%. UV detection wavelength was 304 nm. The results showed that this method was simple and feasible.Key wordsmifepristone,

4、UV-spectrophotometric method, blood concentration抗早孕新药米非司醇(Mifepristone,RU486)用于临床以来，具有良好的抗早孕效果1.2。围绕其临床药理亦出现了不少的研究报道3.4.5。本文探讨了以紫外分光光度法测定米非司酮血药浓度的方法，现报道如下。1仪器、试剂与试药1.1仪器日本岛津UV-2401紫外分光光度计；XW-80型旋涡混合器(上海第一医学院仪器厂)；80-2型离心沉淀器(上海手术器材厂)。 1.2试剂无水乙醇；三氯甲烷；甲醇(均为分析纯)。1.3试药国产全合成米非司酮片剂(每片含25 mg米非司酮，北京第三制药厂，批号9

5、60502)。2试验方法2.1片剂中米非司酮的提取和提纯片剂中米非司酮的提取取米非司酮2片，置乳钵中研磨细，加10 ml氯仿提取两次，过滤，收集滤液，再用氯仿荡洗试管及冲洗滤纸，合并滤液及洗液，于55°C左右水浴蒸发，得黄色米非司酮粗提物。将粗提物加入少量新鲜蒸馏水，滴加稀盐酸，轻摇使提取物完全溶解，过滤，容器再用少量蒸馏水荡洗两次，合并洗滤液，用氢氧化钠试液调pH10左右，用氯仿20 ml分两次进行萃取。取氯仿液于55°C左右水浴蒸干，得黄色米非司酮提纯物。经扫描测定在波长304 nm处有最大吸收峰，见附。附米非司酮的紫外谱2.2标准曲线制作与回收率试验2.2.1标准曲线

6、制作精密称定米非司酮纯品适量，加甲醇溶解并稀释成浓度为0.4 mg.ml-1的标准溶液。另取6份各1 ml空白血浆，分别加入米非司酮标准液50，100，150，200，250，300 l，振荡混匀后静置2 min，以无水乙醇沉淀血浆蛋白，离心，过滤上清液，以少量无水乙醇分次清洗蛋白沉淀，过滤，合并滤液于80°C90°C水浴蒸至无乙醇味，取出放冷，加0.1 mol.L-1氢氧化钠0.2 ml，氯仿5 ml，振荡回提，吸取氯仿层于另一试管，于70°C80°C水浴蒸干。最后加甲醇5 ml，混匀，以空白血浆提取液为空白，在304 nm波长处测定吸收度。以浓度(C

7、)对吸收度(A)作直线回归，得回归方程：A=0.0 473C-0.0 511(r=0.999 7)，血浆标准曲线线性范围424 g.ml-1。本法测定最低检测浓度为4 g.ml-1。2.2.2回收率试验取空白血浆1 ml加入不同浓度的标准品(8，16，24 g)，混匀，按2.2.1法操作，在波长304 nm处测定，结果见表1。表 1回收率和精密度试验结果(n=6)加入量g回收率%日内误差RSD/%日间误差RSD/%896.8±3.22.33.41695.1±2.52.22.72488.0±2.11.83.2±s93.3±4.62.1±

8、0.83.1±0.42.3孕妇米非司酮血药浓度测定2.3.1受试者及给药方法10位健康女性，年龄2030岁。经确诊处于妊娠期，为正常宫内妊娠，孕周7周。自愿来我院实施药物流产，经检查后，均采用米非司酮药物流产法。受试者口服米非司酮50 mg.d-1,bid，连服3 d，第4 d早晨静脉取血23 ml，肝素抗凝，离心，取血浆待测。2.3.2米非司酮紫外分析取1 ml血浆样品，按标准曲线步骤提取稀释后，以甲醇为空白(血浆甲醇空白校正值A为0.099)，以紫外分光度法于304 nm波长处测定，计算时将实测A减去校正值A，代入回归方程，10例孕妇测定及计算结果见表2。 3讨论3.1米非司酮回

9、归方程显示药物浓度与吸收度之间线性良好(r=0.999 7)，平均回收率(93.3±4.6)%；重现性也良好，RSD日内为2.1%，RSD日间为3.1%，说明本法是可行的。表 210例孕妇血药浓度的测定结果受试者年龄/岁AC/g*ml-11270.19615.662280.17513.443300.16612.484230.22819.045230.18013.966230.22218.407240.24020.318230.19415.449230.18814.8110260.16011.80±s25.0±2.60.2±0.0315.5±2.

10、73.2米非司酮在体内主要代谢产物有去单甲基米非司 酮(RU42633)，去双甲基米非司酮(RU42848)和羟基米非司酮(RU42698)等三种6.7。本方法测定含量为米非司酮及其三种代谢产物的总量。用紫外分光光度法测定10例孕妇的血药浓度为1020 g.ml-1。 作者单位：广西柳州市工人医院柳州545005参考文献1吴尚纯，高纪.抗孕激素RU486抗早孕.实用妇产科杂志，1990，6(6)：2832林新中.米非司酮临床应用进展.中国医院药学杂志，1994，14(8)：3713石建平，苏贾谱，朱艳霞.两种国产米非司酮片剂的相对生物利用度研究.同济医科大学报，1993，22(6)：4274刘金茂，宋维葵.抗早孕新药米非司酮的药理作用及临床应用.医药导报，1994(1)：325贺昌海.RU486