重症肌无力患者糖皮质激素受体含量与疗效的关系

1、    重症肌无力患者糖皮质激素受体 含量与疗效的关系        【摘要】目的探讨重症肌无力患者外周血白细胞糖皮质激素受体含量与应用糖皮质激素治疗效果的关系。方法用放射免疫法测定41例患者和25名健康对照者血糖皮质激素水平，采用放射性配体结合法测定患者经糖皮质激素治疗前后外周血白细胞糖皮质激素受体含量。结果(1)患者白细胞糖皮质激素受体平均值为(6 765±974)位点/细胞，明显高于正常对照组（2 740±725)位点/细胞（P0.001)

2、。(2)患者血浆皮质醇浓度(458±170) nmol/L, 对照组为(413±156) nmol/L, 二者差异无显著意义。(3)治疗前糖皮质激素受体位点数高者(7 334±599) 位点/细胞，25例治疗效果好，而治疗前位点数低者(5 779±654) 位点/细胞，16例治疗效果差(P<0.05)。(4)重症肌无力患者经糖皮质激素治疗后，糖皮质激素受体位点数较治疗前下降。结论重症肌无力患者外周血白细胞糖皮质激素受体含量增多，增多的程度与近期疗效有关，受体含量高者治疗效果好。【关键词】重症肌无力 受体， 糖皮质激素 糖皮质激素类 A study

3、of the relationship between the contents of glucocorticoid receptors in myasthenia gravis patients and the efficacy of steroid therapyLIU Min*, CONG Zhiqiang, YIN Yongjun, et al. *Department of Neurology, Qingdao Medical College, Qingdao 266003【Abstract】ObjectiveTo investigate the relationship betwe

4、en the contents of glucocorticoid receptors (GCR) in myasthenia gravis and the curative effects of steroid therapy. MethodsThe concentrations of plasma glucocorticoid were measured with radioimmunoassay and the levels of peripheral leucocytes with a whole cell binding assay with 3H-dexamethasons in

5、myasthenia gravis before and after treatment. Results(1) GCR binding mean values were (6 765±974) sites/cell in the peripheral blood leukocytes of 41 myasthenia gravis patients who had not received glucocorticoid for at least two months. They were significantly higher than those of the healthy

6、dorners (2 740±725) sites/cell, P<0.001. (2) The blood plasma mean level of the glucocorticoid in myasthenia gravis patients was (458±170) nmol/L. There was no statistically significant difference between the corresponding mean levels of the patients and the donors(413±156) nmol/L.

7、 (3) After having received glucocorticoid for two months, 25 patients improved with their GCR binding mean values reaching (7 334±599) sites/cell. The therapeutic effects were not better in 16 patients who had lower GCR binding mean values (5 779±654) sites/cell, P<0.05. (4) The GCR bin

8、ding mean values in the myasthenia gravis patients having received glucocorticoid were lower than those in the patients having had no steroid theraphy. ConclusionThe results suggested that there was certain correlation between the increase of GCR values in myasthenia gravis patients and the short-te

9、rm curative effects.【Key words】Myasthenia gravis Receptors, glucocorticoid Glucocorticoids 糖皮质激素(GC)是目前治疗重症肌无力的较常用的免疫抑制剂，有效率高达98%1。糖皮质激素受体(GCR)是GC发挥生理和药理作用的中介物。我们采用放射性配体结合法检测重症肌无力患者外周血白细胞的GCR含量，探讨GCR含量与重症肌无力治疗效果间的关系，以期为临床科学测试GCR，以指导合理使用GC提供可能性。资料和方法一、资料选择到我院就诊的重症肌无力患者41例。都有典型的临床表现，并以新斯的明试验确诊，测定受体前2个

10、月均未曾接受氟美松治疗，男性22例，女性19例，年龄1326岁，平均48岁，病程7天至20年，平均6年。追踪观察用GC治疗2个月后各例患者的情况。选择25名健康人为对照，男13名，女12名，年龄1855 岁，平均37岁。二、方法1. GCR的测定：采用放射配体结合法测定外周血白细胞的GCR含量2。取当天上午89时的抗凝血56 ml,分离白细胞。用Hanks 液(pH=7.20)将白细胞调成(38)×109/L的悬液，取1 ml悬液加30 l 3H-氟美松(最终浓度11.5 nmol/L)作一点法分析。21保温3小时后，磷酸缓冲液终止反应。加体积分数为0.98的甲酸0.1 ml将细胞完

11、全消化后，加8 ml闪烁液，用TRL-CARB4430液体闪烁计数仪计数。以外道比较法校正所得dpm为总结合，用加相同浓度3H-氟美松和1 8002 000倍醋酸氟美松的平行测定管的dpm为非特异结合，总结合减去非特异结合为特异性结合，再换算成结合位点/细胞。2. 血浆皮质醇测定：按药盒说明书操作（中国同位素公司北方试剂研究所）。3. 统计学处理：采用未配对计量资料t检验，比较重症肌无力患者与对照组外周血白细胞的GCR水平，采用配对计量资料t检验比较氟美松治疗2个月前后重症肌无力患者外周血白细胞GCR位点数的变化。结果1. 重症肌无力患者外周血白细胞的GCR水平6 765±974(4

12、 6408 783)位点/细胞较对照组2 740±725(1 9734 150)位点/细胞 明显增高（P<0.001）。2. 治疗前重症肌无力患者血浆皮质醇浓度为(458±170) nmol/L, 对照组为(413±156) nmol/L,二者差异无显著性意义。3. 重症肌无力患者应用氟美松治疗2个月后, 按重症肌无力临床记分量表3，25例疗效良好，治疗前GCR含量为(7 334±599) 位点/细胞，其中2例药物缓解，23例显著改善；16例疗效较差，治疗前GCR含量为(5 779±654)位点/细胞，其中13例部分改善，3例无效。疗效良

13、好者治疗前GCR位点数高于疗效较差者(P<0.05)。4. GC治疗2个月后，重症肌无力患者外周血白细胞GCR位点数较治疗前显著下降(P<0.001)（表1)。表1GC治疗前后重症肌无力患者外周血白细胞的GCR含量（位点/细胞）患者治疗前治疗后疗效患者治疗前治疗后疗效14 6403 987a226 9043 876c24 8852 107a236 9106 123c34 9333 128b246 9174 531c45 1462 419b256 9233 719c55 2851 597b266 9833 937c65 7623 512b277 1364 185c75 7822 94

14、9b287 1882 906c85 8944 623a297 2123 008c96 0313 299b307 2373 698c106 1254 573b317 2644 387c116 1842 900b327 2984 572d126 3273 850b337 3153 614c136 4913 836b347 4853 762c146 5022 796c357 5164 280c156 6934 043b367 8412 619c166 7125 102d377 9123 506c176 7193 796b388 1654 697c186 7283 211b398 3763 240c1

15、96 7452 095c408 6254 729c206 8934 531c418 7835 639c216 9023 650c注：a为无效；b为部分改善；c为显著改善；d为缓解讨论GC是目前治疗重症肌无力较常用且极为有效的生物免疫抑制剂，其作用由GCR介导。国外研究及我们的研究都发现，重症肌无力患者血浆皮质醇浓度正常，而外周血白细胞的GCR含量增多。在GCR平衡解离常数正常的情况下，增加GC浓度，即应用GC治疗重症肌无力，就能在一定程度上增加激素-受体复合物的生成，提高对靶细胞的治疗效应4。重症肌无力的免疫学异常表现在细胞免疫和体液免疫两个方面，患者外周血淋巴细胞总数、B细胞、CD4细胞及其

16、亚群数量正常，而CD8细胞明显减少5，且功能下降。不同T细胞亚群GCR含量不同，其中CD8细胞上有较多的氟美松受体6。依据有关受体的低亲和力结合部位的研究，推测CD8细胞的GCR可能有较多的低亲和力结合位点，生理浓度的GC不能与之结合，而药理浓度的激素可与低亲和力结合位点作用，提高CD8细胞的功能活性，加强对B细胞的抑制。同时，大剂量GC能抑制患者外周血白细胞化学趋向移动，使淋巴细胞，尤其是CD4细胞转移到骨髓，降低CD4/CD8比值，从而抑制B细胞分泌抗体7。本组41例重症肌无力患者用GC治疗前，外周血白细胞中GCR水平高的患者，多对GC治疗敏感，GCR水平较低的患者则对治疗不敏感。国内已有

17、报道，重症肌无力治疗前白细胞GCR位点数高者，GC近期疗效较好8。还有研究证实，白血病、系统性红斑狼疮等患者GCR水平与治疗效果有关，GCR 水平高者治疗效果好9,10。GC类药物广泛用于多种免疫疾病的治疗，同样的疾病，不同的患者疗效各异, 估计与GCR水平有关。因此，在治疗前检测重症肌无力患者外周血白细胞GCR含量，将有助于GC疗效的预后判断。我们的研究还发现，重症肌无力患者经GC治疗后GCR位点数减少。有研究表明，应用GC类药物治疗后细胞GCR位点数减少，减少幅度为20%40%，减少幅度与药量及用药时间无关4。GC对GCR的亲和力无影响，说明调节作用确系结合位点数目的减少，而不是由亲和力的

18、降低造成的。GCR受调节的程度有一定的极限性，一般最多只能减少至正常的20%40%，不可能减少为零，提示GC对GCR的调节有可能是GCR本身介导的。GC对GCR的向下调节的理论在临床上具有重要意义。在某些免疫性疾病中，用GC类药物治疗开始是有效的，但一段时间后作用就减弱甚至消失了。这可能是因为在开始治疗时，外周血白细胞中含有较多的GCR位点，治疗一段时间后，由于GC对GCR的向下调节作用使细胞中GCR位点数减少，导致细胞对GC类药物的敏感性降低，出现GC抵抗。由于GCR减少幅度与药量及用药时间无关，所以临床应用GC类药物时，应注意用药达到最佳疗效的最低剂量、最短时间及最长疗程间隔时间，以将药物

19、副作用控制在最低限度内。作者单位：266003 青岛医学院附属医院神经内科（刘敏、丛志强），病理生理教研室（殷拥军）; 济宁市第二人民医院（刘洪波）参考文献1丛志强，陈光弟，孙兆林. 重症肌无力的免疫抑制疗法. 中国神经精神疾病杂志， 1985,11:15-18.2田英，徐仁宝. 人周围血白细胞糖皮质激素受体的测定. 中华核医学杂志，1983,3:27-30.3丛志强. 重症肌无力临床记分量表. 临床脑电学杂志，1993,2:18-21.4Brentani MM, Marchiori PE, Martins VR. Glucocorticoid receptors of mononuclear leukocytes from myasthenia gravis patients. Acta Neurol Scand, 1985,72:188-192.5Schimizu H, Ichikawa Y, Yoshida M, e