MSC检定规程模板2015版药典

1、 1 / 6 委托检验 检验项目和规程 检品名称： 委托单位名称（公章）： 委托单位地址： 联系人和联系电话： 日期： 第5代细胞 1鉴别试验 1.1细胞形态 检定标准：在倒置显微镜下观察，细胞应贴壁生长，呈长梭形。 1.2 STR图谱鉴别 检定标准：应表达人的16个等位基因，为单一细胞来源。 1.3流式细胞仪检测细胞表面标记物 按照BD公司的人间充质干细胞分析试剂盒(BD货号562245)说明进行。 检定标准：CD73、CD90、CD10595%；CD11b、CD19、CD34、CD45、HLA-DR2%。 1.4种属间细胞污染检查（PCR法） 检定标准：应为人源细胞，无种属间交叉污染。 1

2、.5染色体核型分析 2 / 6 检定标准：参考正常中国人体细胞的G显带带型标准，染色体数量应为46 XX或者46 XY，染色体结构应无缺失、重复、倒位、易位。 2细菌、真菌检查 取细胞培养上清液样品,参照中华人民共和国药典2015年版无菌检查法（通则1101）进行检查，应为阴性。 3分支杆菌检查 取至少107个活细胞样品用培养上清制备细胞裂解物,参照中华人民共和国药典2015年版无菌检查法（通则1101）进行检查，应为阴性。 4支原体检查 4.1培养法 取细胞培养上清液样品,参照中华人民共和国药典2015年版（通则3301）进行检查，应为阴性。 4.2 DNA荧光染色 取细胞培养上清液样品,参

3、照中华人民共和国药典2015年版（通则3301）进行检查，应为阴性。 5细胞内、外病毒因子检查 5.1细胞形态观察及血吸附试验 细胞接种于细胞培养瓶中，参照中华人民共和国药典2015年版第三部生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程进行，细胞持续培养2周逐日镜检，细胞形态正常，无病变，血吸附试验阴性。 5.2体外不同指示细胞接种培养法检测病毒因子 细胞接种于细胞培养瓶中，按照体外不同指示细胞接种培养法（中国药典2015版三部生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程）进行。细胞形态正常，血吸附试验阴性，血凝试验阴性。 3 / 6 5.3动物体内接种法 5.3.1乳鼠脑内及腹腔接种 取细胞

4、悬液注射于出生24小时内的乳鼠腹腔和脑内，按照中国药典2015版三部生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程中要求，21天后乳鼠应至少有80%健存。 5.3.2小鼠脑内及腹腔接种 取细胞悬液注射于小鼠腹腔和脑内，按照中国药典2015版三部生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程中要求，21天后小鼠应至少有80%健存。 5.3.3豚鼠腹腔接种 取细胞悬液注射于豚鼠腹腔，按照中国药典2015版三部生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程中要求，42天后豚鼠应健存，解剖无结核病变。 5.4鸡胚接种检查 取细胞悬液注射于57日鸡胚卵黄囊，按照中国药典2015版三部生物制品生产检定用动物细胞

5、基质制备及检定规程中要求，应至少80%存活。 取细胞悬液注射于911日龄鸡胚尿囊腔，按照中国药典2015版三部生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程中要求，应至少80%存活，尿囊液血凝试验应为阴性。 5.5特殊人源病毒检查 5.5.1 HIV检查 按照中国药典2015版三部生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程中要求， 应为阴性。 4 / 6 5.5.2 HBV检查 按照中国药典2015版三部生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程中要求，应为阴性。 5.5.3 HCV检查 按照中国药典2015版三部生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程中要求，应为阴性。 5.5.4 H

6、CMV检查 按照中国药典2015版三部生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程中要求，应为阴性。 5.5.5 EBV检查 按照中国药典2015版三部生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程中要求，应为阴性。 5.5.6 HPV检查 按照中国药典2015版三部生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程中要求，应为阴性。 5.5.7 HHV检查 按照中国药典2015版三部生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程中要求，应为阴性。 5.6牛源病毒检查 按照中国药典2015版三部生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程中要求，应为阴性。 5.7猪细小病毒检查 5 / 6 按照中国药典

7、2015版三部生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程中要求，应为阴性。 5.8逆转录病毒检查 参照中国药典2015版三部附录逆转录酶活性检查法，应为阴性。 6免疫学反应检测 6.1淋巴细胞增殖抑制试验 按照淋巴细胞增殖抑制试验法检测，应具有抑制淋巴细胞增殖的能力。 6.2特定淋巴细胞亚群检测 按照特定淋巴细胞亚群检测法检测淋巴细胞Th1Th17增殖抑制率和Treg增殖促进率。 6.3淋巴细胞分泌TNF-抑制试验 按照淋巴细胞分泌TNF-抑制试验法检测，应具有抑制淋巴细胞分泌TNF-能力。 7诱导分化能力检查 7.1成骨分化 细胞在体外成骨诱导培养后，茜素红S染色分析成骨细胞分化能力。 7.2成脂分化 细胞在体外成脂诱导培养后，油红O染色检测细胞内红色脂肪滴。 8细胞活性检测 8.1细胞数和细胞存活率 血细胞计数板对细胞计数，台盼蓝染色法检测细胞平均存活率应不低于90% 6 / 6 8.2细胞生长曲线 用细胞计数方法绘制细胞生长曲线来判断细胞活力。 8.3细胞周期测定 用流式细胞术进行细胞周期测定。 9成瘤性检测 9.1裸鼠体内接种试验 按照中国药典201