阳极损毁海马腹侧下托可减少成瘾大鼠的条件位置偏爱

1、阳极损毁海马腹侧下托可减少成瘾大鼠的条件位置偏爱【关键词】条件位置偏爱；海马；电解损毁；吗啡依赖；药物渴求【Abstract 】 AIM: To investigate whether the ventral subiculum(VSUB) lesi ons can release the drug crav ing from drug addicted rats. METHODSiemale SD rats were trained to acquire the morphine conditioned pl ace p refere nee (CPP). After the p refer

2、e nee was established, the rats were divided to 3 groups. The lesi on group (n=20) received the electrolytic lesi ons of VSUB, the sham lesi on group (n=10) received the sameoperation to the lesion group but no current passed, and the control group (n=10) received no op erati on. After 5 d recovery,

3、 the 3 groups underwent the CPPtesting again to observe the extent of drug craving. RESULTS: A histological test was p erformed on po stlesi on rats after a behavioral test, and the lesions were found confined to the VSUB.The time that the lesi on group spent in the drug paired side was sig nifica n

4、t decreased ( ±) s pared with both sham group ( ±) s and control group ( ±) s . (P100 s则认为动物产生了明显的偏爱，低于此值者不入选 样本.穿越次数低于20次的动物，说明运动不活跃，CPF测量值误差较大，该 动物剔除出样本.动物分组将已经建立地点偏爱的大鼠完全随机分配至三个试验组.损 毁组（20只）；假手术组（10只），只将电极插入，不做损毁；空白对照组（10 只），不做任何处理，笼养5 d.阳极损毁大鼠10 g/L戊巴比妥钠腹内注射（50 mg/kg），麻醉后固定于 立体定向仪

5、上，门齿杆位于耳间线下方 mm双侧VSUB颅骨表面投影点钻孔，将 损毁电极依照大鼠脑立体定位图谱下至靶点，双侧坐标以Bregma为原点，AP-mm, ML ± mm, DV - mm 5，通直流电进行损毁，电极接直流电源阳极，电流 （1 mA），通电时间30 s，完成后取出电极，缝合.全部手术均保证无菌操作， 防止动物发生感染.动物术后恢复5 d，之后进行行为测试.术后地点偏爱测试与前述的地点偏爱测试方法相同，分别测试每只大鼠在A, C两箱的停留时间，记录成表.组织学检查测试完成后，损毁组及假手术组大鼠在戊巴比妥钠深度麻醉 下以生理盐水，10 g/L多聚甲醛混合10 g/L亚铁氰化钾

6、，40 g/L多聚甲醛PBS 溶液的顺序依次灌注，取脑，做冰冻切片（冠状，片厚60卩m）,尼氏染色观察损伤范围.统计学处理：CPP测量结果以训练前后以及手术前后的白箱时间改变值 作为统计量，数据处理使用软件，采用配对 t检验及单因素方差分析（Oneway ANOVA）显著性水平取 a =2结果组织学评定采用双盲法，由第三人在显微镜下观察神经缺损范围，将损 毁位置不准确或损毁区域过大过小的个体从样本中去除 .损毁位置组织学观察： 损毁组损毁范围较准确的局限于双侧 VSUB%域内，损毁区内神经元及周围组织 包括路过的纤维均已变性坏死，形成空洞，空洞周围组织镜下未见异常.这样的 损伤在以Bregma

7、为原点，AP mm mm范围内均能被观察到.假手术组仅见针 道附近轻微损伤，VSUBX域除针道外并无明显改变（图1）.图1腹侧海马下托损毁范围组织学检查各组大鼠在白箱停 在手术损毁VSUB后, （±） S,而假手术组测试大鼠在7 d的训练完成后，测定一次术前偏爱， 留时间增加值为（±） S,经检验，PV,说明CPP已经形成. CPP时间较术前有明显改变.损毁组白箱停留时间减少值为的伴药侧停留时间减少值为（± ） S，空白对照组伴药侧停留时间减少值为（±） S. 经单因素方差分析，各组间有显著差异，F= P= 以LSDt检验再作组间两两比 较，损毁组与假手

8、术组（PV）,损毁组与空白对照组（PV）均有显著差异，而假 手术组与空白对照组（P=）没有显著差异.以上结果说明阳极损毁 VSU列以降 低大鼠对吗啡的条件位置偏爱.3讨论本实验观察到手术损毁VSUB寸于抑制吗啡成瘾大鼠的位置偏爱有着明 显的作用，并且从另一个角度支持边缘系统的谷氨酸能神经元在复吸表达中的重 要作用.条件位置偏爱是用来衡量药物奖赏作用的一项指标2.药物心理依 赖的形成过程，是给药-激活奖赏环路-产生欣快感-形成顽固记忆的过程.VSUB是海马重要的输入输出结构，与许多脑区既有传入又有传出纤维的，这些 脑区有些与奖赏环路关系密切，有些则是大鼠感受外界信息的主要传入部位.Vorel等1

9、发现刺激VSUB可诱发大鼠的药物渴求，在本实验中损毁 VSUB 区会使大鼠对伴药侧的偏爱程度明显减轻，提示VSUB在药物渴求的产生中起着重要作用.另外Meyers等6发现损伤海马的背侧可以抑制 CPP的形成，而损 伤腹侧则作用不明显，说明海马的背侧相对于腹侧更多参与了药物成瘾的获得过 程.上述研究提示海马作为学习记忆环路中的一环，不管是在药物渴求的形成过程还是药物渴求的发生中，都起着极其重要的作用.&n bsp;对于防止复吸而言，阻止药物渴求的表达是关键.阻止渴求表达有两种途径， 一是去除有关渴求的记忆内容，另一个就是阻断渴求记忆的提取表达过程.实验 虽然证明了大脑是将用药感受的记忆和

10、对药物的渴求单独存放在一个区域的，但对药物渴求的记忆究竟存储在哪里？它是与其他记忆混合存放还是单独储存？ 现在都还没有很确实的研究结论，所以第一种途径就无法实现7.而环境暗 示所诱发的渴求的表达，海马及 VSU列能参与其中.损毁这个环节，使渴求无 法提取并表达，就能起到阻止复吸，戒除心理依赖的效果.普通遗忘是因为大脑 提取机制暂时失效引起的，而损毁VSUB阻止渴求表达却是永久的，不可恢复的. 相对于平时的遗忘，这种损毁所引起的结果对于消除渴求防止复吸来说正是我们 希望得到的.当然，对于VSUB勺功能，一定不仅仅限于是药物渴求的提取通路，我 们的实验所能说明的可能只是其许多功能中的一种.鉴于海马

11、在学习记忆中的 重要作用和不可替代的位置，单纯观察损毁 VSUB寸药物渴求的影响是远远不够的.损毁VSUB会有较严重的副作用么？这种损伤究竟对大脑功能有多大影响？ 这种影响相对于滥用药物引起的危害究竟谁轻谁重，还需要进一步深入探讨，也 是决定该方法能否作为一种治疗方法的关键.这些问题我们将在今后的工作中 进一步研究.【参考文献】1 Vorel SR, Liu XH.hippocampal theta burst stimulationRela pse to coca in eseek ing afterJ: . Scienee, 20XX,292:1175-1178.2 Bardo MT,Be

12、vins RA.does it add to our preclinical J .Con diti oned p lace p refere nee, whatPsycho pharmacology, 20XX,153:31-43.3 Herzig V, Schmidt WJ.Rep eatedtesti ng of p lacep refere nee exp ressi on for evaluatio n of an ticrav in gdrug effects JAmi no Acids, 20XX,28(3):309-317.4王庆丰,高国栋.伏隔核的外壳部和核心部毁损对大鼠吗啡觅药5coordi nates行为的影响J.第四军医大学学报,20XX,24（ 9）:773-775.P axi ons G, Wats on C. The rat brain in stereotaxic6M .1998 San Diego, CA: Academic Press.Meyers RA, Zavala AR, Janet L.