凝胶渗透层析仪gel

1、凝膠滲透層析儀(gel permeation chromatography ; GPC ) 原理：將微量稀釋後的高分子溶液注入填充有多孔性材料作為靜相的 管柱後，越小的分子愈容易深入靜相孔洞中，而越大的分子則會被排 除在靜相外而隨著動相被沖提出來，因此大小不同的分子鏈在靜相中 的滯留程度不同而達到分離效果，見圖2-6。作為靜相的多孔性材料 則以交聯方式聚合的聚苯乙烯或是經過醚化或醇化修飾的玻璃珠為 主。而孔洞的直徑為10至107埃，約是一般高分子在溶液中的大小。 而為了求得未知高分子樣品的分子量，則會以一系列已知分子量的高 分子標準品來建立一條校正曲線，再經由簡單的比對後，求得未知高 分子樣品

2、的分子量分佈。 Large rnolecule* -ttrrtudvd Iwn si* SmMiCtod *cc«m tn Ml圖2-6凝膠滲透層析儀分離方法示意圖凝膠滲透層析儀型號與操作條件: 凝膠滲透層析儀以有機溶劑當作動相的凝膠滲透層析儀系統其高壓沖提幫浦為JASCO PU-158C型，流速為0.1 ml/min10 ml/min ，分離管柱為Jordi公司所製造之兩根Gel-Mixbed混床式管柱串聯。適用分子量範圍是20020,000。控制樣品注入的多向閥為 Rheodyne7725型，線圈的體積為100卩L,管柱恆溫用之烘箱為ENSHINE所生產之SUPECO-150N型

3、，溫度設定為40C，偵測器-折射率偵檢器為JASCO 公司所生產，型號為RI-1530。四氫咲喃當作動相的凝膠滲透層析儀系統中，動相溶劑的HPL級四氫 夫喃購自Tedia。溶劑需先用孔徑0.45卩m之鐵氟龍濾膜抽氣過濾， 並且置於超音波震盪器中震盪除氣（degas） 30分鐘後再行使用。動相流速保持在每分鐘1mL管柱恆溫烘箱設定在40 C，注射標準品分子量在760到1, 880, 000,在此範圍中分子量對滯留時間成線性，見圖2-2NaOH圖2-2巨起始劑反應機制示意圖凝膠滲透層析儀的樣品配製：將樣品溶解於與動相（四氫咲喃）相同之溶劑中，並且視分子量的大小調整樣品重量百分率濃度介於0.1%0.

4、5%之間；依樣品的不同在 每次注射前將溶解於四氫咲喃的樣品以0.2卩m的鐵氟龍過濾頭將分 析物過濾，注射的樣品量則可藉由注入閥的樣品線圈控制在 100卩L 聚合物分子量的測定-滲透壓法使用半透膜把純溶劑分開對通透過去的物質有選擇性的薄膜问上堆笛势直九半遥屈世閘皓匸刪齐用, T活醱间上植娅.-言辱K的;W、JL<-半"外如劭山羁7侶定蚀畫落U肘落鞭 T<嘶融TTL半劇E凡特何夫定律(Van' t Hoff equation)gas constantCRT溶w體積莫I®(rnole/L)方法1方法2依據熱力學第一定律dE = dw + dqdwrev 二 dE - dqrev和第二定律dqrev 二 TdS dwrev = dE - TdS dwrev 二-irdV -ndV = dE-TdS dE dS z-而+ 丁而dSK = TdV由Boltzmann方程式知體積由V到V+dV所產生的熵變化dS = kln（G）+ dG）-kln（i）co + do）二 kinwV + dV=Nkln v/ dV"CRT凝固點下降度數ATf = Kf xm莫耳凝固點下降常數重量莫耳濃度