浅论人巨细胞病毒感染新生儿血液微量元素的检测

1、浅论人巨细胞病毒感染新生儿血液微量元素的检测 【摘要】 目的：探讨巨细胞病毒(HCMV)感染的新生儿与健康新生儿血液中微量元素的含量差异。方法：采用PCR与ELISA相结合的检测法，选取80例血清及尿液FQCMVDNA阳性、血清CMVIgM抗体阳性的新生儿为HCMV感染阳性组，另阴性的102例为对照组。采用电感耦合等离子体原子发射光谱ICPAES法测定两组新生儿血液中微量元素含量。结果：HCMV感染组血清锌、镁、铁、钙水平均低于对照组，全血铅、血清铜水平均高于对照组。结论：HCMV感染新生儿血液微量元素存在一定的失衡，与HCMV感染具有一定的相关性。 【关键词】 巨细胞病毒; 新生儿; 微量元

2、素Abstract Objective: To explore the relativity between the contents of traces element and the HCMV infection in newborns. Methods: Determined by PCR and ELISA, 80 samples with CMVIgM positive serumn and FQCMVDNA positive in serum and urine were recruited as subject group and 102 samples with those o

3、f negative were enrolled as control group. The contents of traces element in the all the samples were determined by inductively coupled plasma atomic emission spectrometry(ICPAES) method. Result: The content of serum Zn、Fe、Mg、Ca in subject group was distinctly lower than that in control group(P0.05)

4、while the content of serum Cu、Pb in subject group was obviously highter than that in control group(P0.05).Conclusion: There is a certain relationship between the disequilibrium in trace elements and the infection of HCMV. Therefore it is important to balance the trace elements in the newborns with H

5、CMV in fection.Key words human cytomegalovirus; the newborn; trace element人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)流行广泛，是危害人体健康最严重的病毒之一，血清IgG阳性波动率50%100%1，可引起先天性及围产期感染，胎儿早期宫内感染可引起出生缺陷，病死率10%30%。新生儿先天性HCMV感染的发病率为0.15%2.0%，可造成新生儿的先天性小头畸形、视网膜脉络炎、智力障碍等。研究人员发现在病毒感染期间，许多微量元素下降，血清和病毒靶器官组织的微量元素均有显着变化，尤其发现血清中的显着变化优

6、先于靶器官组织受累的初期阶段。同时，微量元素的改变与疾病并发症的发生密切相关。本研究旨在探讨新生儿巨细胞病毒感染与血液中微量元素含量的相关性，为临床提供一项新的辅助诊治依据。1 临床资料1.1 一般资料(1) HCMV感染阳性组为2007年2月至2008年10月我院新生儿病房收治的HCMV感染的足月新生儿80例(其中男46例，女34例;日龄112 d,平均5 d;体质量2 2303 340 g，平均2 722 g)，均血清CMVIgM抗体阳性、血清及尿液FQCMVDNA1.0103拷贝ml-1。对照组足月新生儿102例(其中男57例，女45例;日龄118 d,平均7 d;体质量2 2553 3

7、70 g，平均2 783 g)，均血清CMVIgM抗体阴性、血清及尿液FQCMVDNA1.0103拷贝ml-1。(2) HCMV感染组中出现病理性黄疸71例，占88.8%;ALT升高48例，占60%;体温增高(38 )33例，占41.3%;贫血38例，占47.5%;肝大61例，占76.3%;皮疹22例，占27.5%。1.2 试验条件(1) 德国欧蒙医学实验诊断有限公司(EUROIMMON)提供TORCH检测试剂盒测定血清CMVIgM抗体。(2) 美国BioRad伯乐iclycler全自动PCR分析仪。血液：EDTA2K抗凝血1.5 ml;尿液：取23次尿液放入经处理容器中，离心后取1 ml标本

8、。分别提取DNA，中山安达基因股份有限公司提供试剂进行荧光定量PCR扩增，PCR仪做结果分析。1.0103拷贝ml-1为阳性。(3) 法国JY公司ULTIMA2型电感耦合等离子体原子发射光谱仪。高频发生器频率40.68 MHz，测定高频输出功率1.0 kW，反射功率5 W,载气流量1.0 Lmin-1，等离子气流量12 Lmin-1,护套气流量0.2 Lmin-1，提升量1 mlmin-1，输入狭缝20 m，输出狭缝15 m，观测高度10 mm,血清Zn、Cu、Fe、Mg、Ca测定积分时间3 s，Pb测定积分时间5 s;元素测定波长：Zn 213.856 nm、Cu 324.754 nm、Fe

9、 259.940 nm、Mg 279.553 nm、Ca 393.366 nm、Pb 220.353 nm。标准储备液为美国Spex公司生产多元素混合标液。受检者血清Zn、Cu、Fe、Mg、Ca测定用亚沸高纯水稀释5倍后测定含量，全血Pb用6%硝酸消化后，提取上清液检测。(4) 感染组和对照组的患儿均于清晨空腹4 h以上，股静脉抽取血标本，送检;清晨留取尿液标本，1 h内送检。1.3 统计学处理采用SPSS 14.0统计学软件作两独立样本t检验，P0.05为差异具有统计学意义。1.4 结果HCMV感染组与新生儿对照组比较，血清Zn、Fe、Mg、Ca均均减低(P0.05)，血清Cu、血Pb含量增

10、高(P0.05)。表1 HCMV感染组与新生儿对照组微量元素含量比较2 讨 论本研究显示，新生儿HCMV感染时伴有低锌、低铁、低镁、低钙、高铜、高铅的微量元素失衡表现，血清锌水平明显低于新生儿对照组(P0.01)。锌可以直接参与核酸和蛋白质的合成、能量代谢、氧化还原、细胞免疫和体液免疫。缺锌会减少干扰素(IFN)、IL1、IL2、IL6的生成和释放(这些因子除了直接抑制HCMV的复制外，也能通过激活NK细胞来抵抗HCMV)，并可导致TNF过多分泌，高水平的TNF降低机体抵抗力的同时，促进HCMV感染的发生。感染性疾病初期，由吞噬细胞、白细胞释放一种物质即白细胞内源介质(LEM)对锌、铜代谢起到

11、直接的重要作用。LEM作用于肝细胞表面的转移部位，介导肝细胞摄取锌和大量游离氨基酸进入细胞内膜。所以感染期间，特别是中、早期血清锌浓度下降。Walter等发现，给予锌的螯合剂可抑制病毒的复制，在一定的浓度范围内可明显地保护细胞抵抗病毒的侵袭。根据人巨细胞病毒感染患儿微量元素缺乏的认识，临床上应适当加强对患儿补充锌。 铜也是人体的重要物质，铜和血浆铜蓝蛋白具有酶和氧化活性，能增强机体的防御能力。新生儿HCMV感染时，血清铜的含量较对照组明显增高(P0.01)，这与相关文献报道不符，可能是因为铜元素的增高与LEM关系密切，LEM能够兴奋肝细胞，合成大量铜蓝蛋白和其它急性期反应蛋白，并释放到血中;另

12、有研究表明，血清锌与血清铜之间存在反比关系，血清锌减低则血清铜相应增高。缺铁可直接损伤淋巴细胞的生成，使外周血内T细胞数目减少，中性白细胞杀菌能力减低，细胞清除率降低。引起铁的损失同时也造成了镁的吸收障碍。钙在机体生理活动的调节上具有重要的作用。新生儿HCMV感染时，钙元素含量显着低于对照组(P0.05)，这可能与钙通道的开放、大量钙向细胞内流、参与化学介质的释放等因素有关。铅是对人体有害的重金属元素，对机体的影响是全身性、广泛、多系统的，对体液免疫和T细胞亚群有明显的抑制，动物及人体试验均表明缺铁可使机体增加对铅的吸收。微量元素的变化与病毒感染性疾病发病机制、疾病转归之间的关系正成为研究的热

13、点之一。研究发现，发生HCMV感染会导致血液微量元素的失衡;同时，微量元素的变化也导致了HCMV感染的进一步发展以及并发症的发生，对疾病的治疗和预后有一定的影响。重视微量元素异常与病毒感染的关系研究，对患儿病毒性疾病的防治将具有重要的意义。【参考文献】 1 de J0NG M D，GALASSO G J，GAZZARD B, et al. Summary of the II international symposium on cytomegalovirusJ.J Antiviral Res，1998，39：141. 陈平洋，谢宗德，王涛.更昔洛韦治疗新生儿先天性巨细胞病毒感染的临床研究J.中

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