血清天门冬氨酸氨基转移酶测定

1、血清天门冬氨酸氨基转移酶测定1 检验目的指导本室工作人员标准操作本检测工程,保证检测结果的准确.2 实验原理本试剂以国际临床化学联合会IFCC推荐方法为根底,所采用的反响原理与反响式如下.样本中的天门冬氨酸氨基转移酶催化 L-天冬氨酸和 a-氧代戊二酸氨基转移,生成草酰乙酸和 L 谷氨酸；在复原型辅酶 INADH+H+和苹果酸脱氢酶MDH 的存在下,草酰乙酸被复原为 L-苹果酸,复原型辅酶 INADH+H+被氧化为辅酶 I NAD,从而使波长 340nm 处的吸光度值下降.通过对波长 340nm 处吸光度值的下降速率进行监测,即可测得样本中天门冬氨酸氨基转移酶ASD的活性L-天门冬氨酸+-酮戊

2、二金T草酰乙酸+L-谷氨酸草酰乙酸+NADH+HMDH苹果酶 L-苹果酸+NAD3 标本3.1 病人准备：12 小时禁食.3.2 类型：血清.3.3 标本存放：3 天内的活性损失：28c 保存：8%1525c 保存：10%标本稳定性：-20C 保存至少可稳定 3 个月.3.4 标本运输：常温条件下保存运输.3.5 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本4 实验材料4.1 试剂：上海复星长征医学科学 AST 试剂盒沪食药监械(准)字 2022 第 2400166 号 YZB/沪 1546-40-2022)4.1.1 试剂组成试剂1(R1):乳酸脱氢酶1365U/LNADH0.26mmol/天冬氨

3、酸 300mmol/LTris 缓冲液 88mmol/L苹果酸脱氢1635U/La 氧代戊二 36mmol/LL-试齐 ij2(R2):4.1.2试剂准备：试剂为即用式.4.1.3试剂稳定性与贮存：在 28c 避光、密封的储存条件下,试剂盒自生产之日起有效期为 12 个月.4.1.4变质指示：当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,说明试剂已变质,不能继续使用.4.1.5考前须知：试剂中含有稳定剂,可能存在一定的刺激作用和毒性,请勿直接接触皮肤及眼睛.一旦接触,即用大量清水冲洗.请勿吞服.4.2 校准品：使用上海复星长征医学科学提供的AST 校准品对自动分析仪进行校准.4

4、.3 质控品：使用正常值、病理值复合限制品.5 仪器AU2700 生化分析仪,罗氏 P800 生化分析仪,西门子ADVIA-2400 生化分析仪,东芝 TBA-120 生化分析仪 6 操作步骤Tris 缓冲液 88mmol/LEDTA5.0mmol/L6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置.6.2 试剂的检测： 仪器开机后,检查各种试剂的位置,体积等确认无误前方可进行测定.6.3 工程根本参数：参见生化检验 AU2700 生化分析仪,罗氏 P800生化分析仪,西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪工程测定.6.4 仪器操作步骤：参见生化检验 AU

5、2700 生化分析仪,罗氏 P800生化分析仪,西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪操作规程.7 质量限制在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析,以 2S 为质控警告限,3S 为失控限,绘制质控图,判断是否在控.8 计算方法以 AST 复合校准品校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结果,以 U/L 报告.9 参考值范围37C：534U/L0.10.6 以 kat/L我室的参考值:13-40U/L10 临床意义丙氨酸氨基转移酶ALT旧称谷丙转氨酶GPT,天门冬氨酸氨基转移酶AST旧称谷草转氨酶GOT.它们是氨基转移酶

6、类的典型代表.氨基转移酶催化氨基从氨基酸转移给-酮酸的反响.ALT 是肝脏的特异性酶,仅在肝胆疾病时显著升高.而 AST 水平的升高和心肌或骨骼肌损伤,以及肝组织损害等都有关.因此同时进行 ALT 和 AST 的检测用于鉴别肝损伤和心肌或骨骼肌损伤.AST/ALT比率可用于肝病的鉴别诊断.比率1 和严重肝病有关,常见慢性肝病.病毒性肝炎,急性风湿性心肌炎、 中毒性肝炎等此酶活性显毒增高.11 操作性能11.1 分析灵敏度：10.0U/L 样本的吸光度变化率AA/min应不小于 0.003.11.2 线性范围：试剂盒线性范围应覆盖5450U/Loa线性相关系数r应不小于 0.990;b550U/L 范围内,线性偏差应不超过3.0U/L;51450U/L 范围内,线性偏差应不超过10%.11.3 准确度：相对偏差B应不大于土 10%11.4 精密度：1重复性：变异系数CS 应不大于 5%2批间差：相对极差R应不大于 5%12 超由范围结果处理试剂的线性范围为 5450U/L.当测定样本中天