分子生物学简答题全

1、6.为什么利用 RNAi抑制一个基因的表达较利用反义RNA技术更为彻底.答：RNAi是外源或内源性的双链 RNA进入细胞后引起与其同源的mRNA特异性降解.dsRNA进入细胞后,在 Dicer作用下,分解为 21 -22bp的结合相关酶,形成 RNA介导的沉默复合物 在ATP作用下,将双链SiRNA变成单链SiRNA,进而成为有活性的 RISC,又称为与靶 mRNA结 合,导致其断裂,进而导致其彻底降解.反义RNA是与靶mRNA互补的RNA ,它通过与靶 mRNA特异结合而抑制其译表达,反义 RNA是与靶mRNA是随机碰撞并通过碱基互补配对,所以, mRNA不一定完全被抑制. 8.简述真核基因

2、表达的调控机制.答：(1) DNA和染色质结构对转录的调控：DNA甲基化,组蛋白对基因表达的抑制,染色质结构对基因表达的调控作用,基 因重排,染色质的丧失,基因扩增；(2)转录起始调控：反式作用因子活性调节,包括表达调节、共价调节,配体调节等蛋白质相互作用调节), 反式作用因子与顺式作用原件结合对转录过程进行调控；(3)转录后调控：5'端加帽和3'端多核甘酸化调控,选择剪接调控, mRNA运输调才 mRNA稳定 性调控；(4)译起始的调控：阻遏蛋白的调控,对译因子的调控,对 AUG的调控,mRNA 5 '端非编码区的 调控,小分子 RNA ;(5)译后加工调控：新生肽链

3、的水解,肽链中氨基酸的共价修饰,信号肽调控.9 .简述 mRNA加工过程.答：(1) 5端加帽(由加帽酶催化 5端参加7-甲甘乌甘酸,形成帽子结构m7GpppmNP- ).(2) 3'端参加Poly(A)尾(A、组蛋白的成熟 mRNA无需加polyA尾；B、加尾信号包括AAUAAA 和富含GU的序列；C、加尾不需模板；D剪切过程需要多种蛋白质因子的辅助).(3) mRNA前体的剪接(剪接加工以除去内含子序列,并将外显子序列连接成为成熟的有功能的mRNA分子.内含子两端的结构通常是5-GUAG -3'.选择性剪接的作用机制包括；A使用不同的剪接位点,B选择使用外显子,C、反式剪接

4、,D、使用不同的启动子,E、使用不同的多腺甘酸化位点).(4) RNA的编辑(发生于转录后水平,改编 mRNA序列,CHU或ZG ,增加遗传信息容量).10 .简述生物的中央法那么.答：中央法那么(genetic central dogma),是指遗传信息从 DNA传递给RNA ,再从RNA传递给蛋白质, 即完成遗传信息的转录和译的过程.也可以从DNA传递给DNA ,即完成DNA的复制过程.11 .简述真核生物基因结构及特点.答：真核细胞的基因也是由和两局部组成的；(1)编码区：能的序列.特点：间隔的、不连续的.即能编码蛋白质的序列被不能编码蛋白质的序列分隔开来,成 为一种断裂的形式不能编码蛋

5、白质的序.歹！J.(2)非编码区：有调控作用的核甘酸序列.是中位于编码区上游的核甘酸序列,是RNA聚合酶结合点,能准确地识别的并开始转录,有调控遗传信息表达的作用.12 .简述SNP的特点,SNP如何发挥生物学作用的及研究SNP的意义.答：特点：1数量多,遍布基因组,分布相对平均,据统计,人类群体中大概有 1100万个SNP,约每300bp 就有1个SNP位点,方便挑选位点.2虽有A/C/G/T四种核甘酸,但SNP位点大多是双态,即每个位点在群体中只存在2种核甘酸形式,因此 A心、A/G、A/T、C/G、C/T、G/T、Indel等几种形态,适合开展大规模、高通量、 自动分化的检测.3人类基因

6、组90%的变异形式为 SNP, SNP的遗传很稳定 一一每一代之间不会有太大变化. SNP的研究意义：虽然人类99%以上的DNA序列是相同的,但 DNA序列的变化能对人类对疾病、环境攻击比 如细菌、病毒、毒素和化学物质、药物和治疗的反响产生重大影响.这就使得SNP对生物医学的研究和药物开发、医学诊断的开展有重要意义.SNPs可作为遗传作图研究中的遗传标记,帮助定位和鉴定功能基因.研究者相信SNP图谱将帮助他们熟悉复杂的多基因疾病,如癌症,糖尿病,血管性疾病和某些精神性疾病.13 .简述miRNA的结构特点和生物功能.答：广泛存在于真核生物中, 是一组不编码蛋白质的短序列RNA ,它本身不具有开

7、放阅读框架ORF;通常的长度为2024nt,但在3'端可以有12个碱基的长度变化；成熟的 miRNA5端有一磷酸 基团,3'端为羟基,这一特点使它与大多数寡核甘酸和功能RNA的降解片段区别开来；多数miRNA还具有高度保守性、时序性和组织特异性.miRNA执行一定的生物学功能：对与其互补的mRNA表达水平具有调节作用；一些偏大的miRNA可能参与了基因组的重组装27nt.14 .什么是DNA甲基化？简要说明甲基化的检测方法及其生物学效应.答：胞喀咤和甲基在甲基化酶的作用下形成5'-甲基胞喀咤的过程叫做 DNA的甲基化.DNA甲基化抑制或降低转录水平,在基因转录起始点附近

8、,有高度密集的CpG重复序列,被称为 CpG岛,或HTF岛.推测该序列与基因转录活性有关.检测方法：酶切鉴定：Hpan只能切割未甲基化的 -CCGG- , Hpan如果第二个C被甲基化了就不能切割.Msp I能够识别和切割甲基化或未甲基化-CCGG-.比拟这两种酶切割 DNA产生的DNA片段的差异,可知 DNA片段甲基化的程度与有无.限制性内切酶+Southernbloting ；甲基化特异性PCRMSP;亚硫酸盐变性后测序； 甲基化敏感性单核甘酸引物扩增Ms-SnuPE；甲基化荧光检测； 亚硫酸氢钠变性后限制酶分析COBRA;差异甲基化杂交 DMN;酶的区域性甲基化分析ERMA .15 .何

9、为顺式作用元件？请举出三种真核生物基因的顺式作用元件.答：影响自身基因表达活性的非编码DNA序列,组成基因转录的调控区.例：启动子：转录调节蛋白和RNA聚合酶的结合位点；增强子：是一个有增强转录的顺式作用元件,能够提升一些真核 生物启动子的效率,并能能在启动子的任何方向和任何位置上游或下游作用.沉默子：负性调节元件,当其结合特意蛋白因子时,对基因转录起阻遏作用.16 .以trp操纵元为例简述衰减子的调控机制.答：当细胞中有色氨酸存在时,核糖体能够顺利译出整个前导肽而在终止密码子处停下来.这时,核糖体占据了序列1和局部序列2,使序列2和序列3不能产生有效的配对,因而序列3和序列4配对产生终止子的

10、发夹结构,于是实现转录的终止.当出现Trp饥饿时,核糖体停顿在两个 Trp密码子上,这时,核糖体占据了序列1而留下完整的序列2以便与转录出的或即将转录出的序列3形成二级结构.这样,当序列 4转录出来后仍然是单链状态,即终止子不能形成,于是转录继续 进行下去.23 .在基因转录水平的表达调控方式上,真核生物往往采用正限制系统,而原核生物却往往采用负限制系统,请简要说明其原因.答：这两种调控方式是长期自然选择的结果,也是生物体采用的经济有效的原那么选择的.原核生物 基因组小,基因少而简单,生命繁殖快,多采用负限制的保险机制,即使调节蛋白质失活,酶系 统照样合成,只不过有时浪费一点罢了,绝不会使细胞

11、因缺乏该酶系统而造成致命的后果.另外,采用负限制具有一开俱开,一关俱关的特点,减少不必要的环节；而真核生物基因组大,基因多且复杂,采用正限制具有更大的优越性,转录因子相互作用缺一不可,可以保证真核生物基因表 达调控的严谨性和灵活性以及经济性原那么.24 .根据你的理解说明利用"酵母双杂交系统研究蛋白质间相互作用的原理.答:真核生物的转录因子可以分为两局部,BindingDomain和ActivatedDomain.BindingDomain负责结合在DNA上,ActivatedDomain负责激活转录.二者都是相互独立的区域,但二者单独时都不 能有转录活性,必须结合在一起或相互靠近在

12、一起才有活性.在研究蛋白质相互作用中,将一种蛋白质的基因连接在BindingDomain上,将另一种蛋白质的基因结合在BindingDomain上,蛋白质基因表达后就与转录因子的两个Domain分别结合,两个蛋白质因相互作用而结合在一起,进而使BindingDomain和ActivatedDomain相互靠近在一起,从而形成具有转录活性的转录因子.在欲表达的基因区域连上报告基因,通过报告基因的表达与否, 就可判断蛋白质之间是否发生了相互作用.25 .举三例RNA的研究成就及其在推动分子生物学开展中的重要意义.答：Ribozyme :拓展了酶的概念、内含子自我剪切、生命起源和分子进化.Antis

13、ense-RNA :基因表达调控、基因工程. RNAi :基因表达调控、功能基因组学.26 .简要说明中央法那么的提出对分子生物学研究的理论意义和指导作用.答：中央法那么表达了遗传信息的唯一性、遗传物质的自决性、信息表达的单程性、序列转换的共线 性,为分子生物学研究提供了一个理论框架,分子生物学是一部从DNA到蛋白质的中央法那么的演绎.中央法那么面临的挑战：反转录酶、内含子、不连续转录、非译序列、伴刀豆球蛋白A肽链一级结构的重排、RNA变通性剪切、RNA编辑、以蛋白质为模板的肽链合成、肮病毒的发现.中央法那么的修正：从DNA到RNA到肽链不断有新的遗传信息的参加：DNA :重排RNA :反转录

14、、不连续转录、多种方式剪切、编辑mRNA :跳跃译、折叠肽链：氨基酸重排、蛋白质内含子剪切肮病毒复制27 .比拟两种mRNA的剪切方式的异同.答：Cis-splicing 与 Trans-splicing 的比拟Cis-splicingTrans-splicing以一条pre-mRNA为底物以两条不同来源的pre-mRNA为底物在 splicesome 中完成在splicesome中完成组成型剪接 选择型剪接在成熟RNA的前导序列中拼个外来的 35Nt的剪接前导序列或微小外显子或发生在两 条pre-mRNA间的选择型剪接LariatintronY-intron29. 4种基因表达调控类型的区分

15、：答：正、负调控：调节蛋白缺乏时对操纵子的影响；可诱导、阻遏：操纵子对调节基因表达的小分子所作出反响的特点；有或无Glu调节cAMP-CAP活性的分子生物学机制：Glu代谢物抑制腺甘环化酶、促进磷酸二酯酶调节细胞中cAMP的水平.当缺乏Glu时,生物体内 ATP环化酶会使 ATP变成cAMP , cAMP与CAP蛋白结 合,进入操纵元上 CAP位点,此时RNA聚合酶才能进入结合位点开始转录. 如果不缺乏 Glu的情况下,无法生成 cAMP ,也就无法形成复合物,也不能使 RNA 聚合酶进入结合位点,开始转录.32 .何谓RNA剪接,何谓 RNA编辑？答：RNA剪接:从DNA模板链转录出的最初转

16、录产物中除去内含子,并将外显子连接起来形成一个 连续的RNA分子的过程.RNA编辑RNAediting : RNA编辑是指在 mRNA水平上改变遗传彳t息的过程.RNA编辑是通过比拟成熟的mRNA与相应基因的编码信息时发现的,成熟的mRNA序列中有几种意想不到的变化,包括LfC , CHU ; U的插入或缺失、多个 G或C的插入等.33 .什么是正调控与负调控,试举例说明.答：正调控系统和负调控系统是根据没有蛋白质存在的情况下操纵元对新参加的调节蛋白的响应情 况来定义的.在没有调节蛋白质存在时基因是表达的,参加这种调节蛋白后基因表达活性便关闭.这样的限制系统就叫做负调控系统.如大肠杆菌色氨酸操

17、纵子的调控.相反,如果在没有调节蛋白存在时基因是关闭的,参加这种调节蛋白后基因活性就被开启,这样的限制系统叫做正调控系统.如cAMP-CAP对于乳糖操纵元的正调控.34 .简述空转反响的形成及其结果.答：当无负载的tRNA进入核糖体A位以后,无法形成新的肽键,而 ATP却在不断的消耗,这就是所 谓的空转反响.细胞内出现空转反响时,就会发出一种报警信号,这就是鸟甘5'二磷酸3'二磷酸pppGpp.ppGpp和pppGpp能通过某种方式限制细胞的许多生理过程,以使细胞能够适 应有限的营养条件, 特别是氨基酸的供给.这些非同寻常的代谢产物能够影响某些蛋白质和酶的活性或性质,从而设法解

18、决细胞所碰到的问题.35 .简述突变热点的定义及其可能的机制.答：从理i上讲,DNA分子上每一个碱基都能发生突变,但实际上突变位点并非完全随机分布,而 是某些位点的突变频率大大高于平均数,这些位点就称为突变热点.形成突变热点的最主要的 原因是5-甲基胞喀咤的存在.5-甲基胞喀咤和C一样,在突变剂的作用之下,会产生脱氨基氧化.5-甲基胞嗒咤脱氨基化以后生成T,而T是DNA的正常组分,形成 G-T的不配对状态.形成突变热点还有其他原因.在短的连续重复序列处容易发生插入或缺失突变.突变热点还与突变剂有 关.使用不同的突变剂时出现的突变热点处不同.36 .简述同源重组的机理.答：同源重组发生在 DNA

19、同源序列之间,大肠杆菌的同源重组需RecA蛋白,以Holliday为例说明同源重组的机理：切断：同源联会的两个DNA分子中任意一个出现单链切口,切口由某些DNA内切酶产生.链置换：切口处形成的5'端局部解链,由细胞内类似于大肠菌聚合酶I的酶系统利用切口处的3' OHT成新链,而把原有的链逐步置换出来,使之成为游离的以5'的末端的单链区段,单链反响可以一直进行下去,由此产生的单链区段越来越长.单链侵入：由置换 产生的单链区段侵入到参与联会的另一条DNA分子因局部解链而产生的单链中.loop切除：侵入的单链DNA与参与联会的另一条 DNA分子中的互补链形成碱基配对,同时把侵

20、入单链的同源链置换出来,由此产生D-loop.链同化：loop切除中产生的3' 0Hf头和侵入单链的5'由DNA 连接酶共价连接.异构化：链同化进行过程中,DNA经过一定的扭曲形成异构体.分支迁移：两条DNA分子之间形成的交叉可以沿DNA移动,这一过程叫分支迁移.39 .请解释核甘酸的 C值悖论及其原因.答：最大C值单倍体基因组的总 DNA含量；最小 C值-编码基因信息的总 DNA含量.生物体 进化程度与最大 C值不成明显正相关； 亲缘关系相近的生物间最大C值相差较大；一种生物内最大C值与最小 C值相差极大.原因有：重叠基因、重复基因、间隔基因、跳跃基因、假基因.42 .原核生

21、物与真核生物基因表达调控机制的相似性有哪些.答：共同的起源与共同的分子根底：调控机理上：核酸分子间的互作；核酸与蛋白质分子间的互作；蛋白质分子间的互作.调控层次上：转录水平、转录后水平、译水平、译后水平.原核生物多采用负限制：提供了一个万一保险机制,即万一调节蛋白质失活,酶系统可以照样合成,只不过有时浪费一点,决不会使细胞由于缺乏该酶系统而造成致命的后果.起初,这种酶系统的表达是组成型的,后来细胞中产生一种干预表达的机制给细胞提供了选择优势,演化成现在的负调控系统.真核生物多采用正限制：灵活性：真核生物基因组大,某一种顺式因子出现的机率高,可与多种反式因子结合.严谨性：随机出现套顺式因子和反式

22、因子完全相同组合的机率小.经济合理有效：真核生物特异基因表达,产生细胞分化. 以基因数量100k为例,10%基因表达,在负限制下,需要合成90k的阻遏蛋白；在正限制下,只需要停止合成90k特异反式因子.43 .在Trp缺乏时至少会启动哪 3种调控机制？答：(1)可能会启动可诱导的氨基酸负调控,在缺乏氨基酸的情况下,无活性的阻遏蛋白无法与操 纵子结合,因此可转录用于氨基酸合成酶类.(2)启动严谨反响,当细胞内蛋白质缺乏时,会调节 tRNA与mRNA合成,从而提升蛋白质合 成.(3)前导序列中的弱化效应消除.45 .不依赖Rho因子的终止子为什么被称为强终止子.答：不依赖于 Rho因子的终止子依靠

23、基因末端的富含GC的茎环结构阻止 RNA聚合酶的行进,茎环结构之后还有一段 AT序列促使RNA聚合酶解离,NusA蛋白使RNA聚合酶暂停前进,多 重因素保证转录的终止.46 .病毒、原核、真核基因组的特点？答：(1)病毒基因组的特点：种类单一；单倍体基因组：每个基因组在病毒中只出现一次； 形式多样；大小不一；基因重叠；动物/细菌病毒与真核/原核基因相似：内含子；具有不规那么的结构基因；基因编码区无间隔： 通过宿主及病毒本身酶切；无帽状结构；结构基因没有译起始序列.(2)原核基因组的特点：为一条环状双链DNA;只有一个复制起点；具有操纵子结构；绝大局部为单拷贝；可表达基因约50%,大于真核生物小

24、于病毒；基因一般是连续的,无内含子；重复序列很少.(3)真核基因组的特点：真核生物基因组远大于原核生物基因组,结构复杂,基因数庞大, 具有多个复制起点；基因组DNA与蛋白质结合成染色体,储存于细胞核内；真核基由于单顺反子,而细菌和病毒的结构基因多为多顺反子；基因组中非编码区多于编码区；真核基因多为不连续的断裂基因,由外显子和内含子镶嵌而成；存在大量的重复序列；功能相关的基因构成各种基因家族；存在可移动的遗传因素；体细胞为双倍体,而精子和卵子为单倍体.47 .乳糖操纵子的作用机制？答：(1)乳糖操纵子的组成：大肠杆菌乳糖操纵子含 Z、Y、A三个结构基因,分别编码半乳糖甘酶、透酶和半乳糖甘乙酰转移

25、酶,此外还有一个操纵序列O, 一个启动子P和一个调节基因Io(2)阻遏蛋白的负性调节：没有乳糖存在时,I基因编码的阻遏蛋白2合于操纵序列.处,乳糖操纵子处于阻遏状态,不能合成分解乳糖的三种酶；有乳糖存在时,乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白变构,不能结合于操纵序列,乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖的三种酶.所以,乳糖操纵子的这种调控机制为可诱导的负调控.(3) CAP的正性调节：在启动子上游有CAP结合位点,当大肠杆菌从以葡萄糖为碳源的环境转变为以乳糖为碳源的环境时,cAMP浓度升高,与CAP结合,使CAP发生变构,CAP结合于乳糖操纵子启动序列附近的CAP结合位点,激活 RNA聚合酶活性,促进结构基

26、因转录,调节蛋白结合于操纵子后促进结构基因的转录,对乳糖操纵子实行正调控,加速合成分解乳糖的三种酶.(4)协调调节：乳糖操纵子中的I基因编码的阻遏蛋白的负调控与CAP的正调控两种机制,互相协调、互相制约.48.真核生物转录水平的调控机制？答：真核生物在转录水平的调控主要是通过反式作用因子、顺式作用元件和RNA聚合酶的相互作用来完成的,主要是反式作用因子结合顺式作用元件后影响转录起始复合物的形成过程.(1)转录起始复合物的形成：真核生物RNA聚合酶识别的是由通用转录因子与DNA形成的蛋白质-DNA复合物,只有当一个或多个转录因子结合到DNA上,形成有功能的启动子,才能被RNA聚合酶所识别并结合.

27、转录起始复合物的形成过程为：TF II D结合TATA盒；RNA聚合酶识别并结合 TF II D-DNA复合物形成一个闭合的复合物；其他转录因子与 RNA聚合 酶结合形成一个开放复合物.在这个过程中,反式作用因子的作用是：促进或抑制TFII D与TATA盒结合；促进或抑制RNA聚合酶与TF II D-DNA复合物的结合；促进或抑制转录起始复合物的形成.(2)反式作用因子：一般具有三个功能域(DNA识别结合域、转录活性域和结合其他蛋白结合域)；能识别并结合上游调控区中的顺式作用元件；对基因的表达有正性或负性调控作用.(3)转录起始的调控： 反式作用因子的活性调节：表达式调节 一一反式作用因子合成

28、出来就具有活性；共价修饰一一磷酸化和去磷酸化, 糖基化；配体结合一一许多激素受体 是反式作用因子；蛋白质与蛋白质相互作用一一蛋白质与蛋白质复合物的解离与形成.反式作用因子与顺式作用元件的结合：反式作用因子被激活后,即可识别并结合上游启动子元件和增强子中的保守性序列,对基因转录起调节作用.反式作用因子的作用方式成环、扭曲、滑动、 Oozing.反式作用因子的组合式调控作用：每一种反式作用因 子结合顺式作用元件后虽然可以发挥促进或抑制作用,但反式作用因子对基因调控不是由单一因子完成的而是几种因子组合发挥特定的作用.59. DNA芯片的原理？答：DNA芯片技术就是一种大规模的集成的固相核酸分子杂交,

29、以大量碱基序列的寡核甘酸片段为探针,检测样品中哪些核酸序列与其互补,然后通过定性定量分析得出待测样品的基因序 列及表达的信息.其方法包括芯片的制备、样品的准备、分子杂交和检测分子.74.激活蛋白(CAP)对转录的正调控作用？答：环腺甘酸(cAMP)受体蛋白 CRP (cAMPreceptorprotein ) , cAMP与CRP结合后所形成的复合物 称激活蛋白CAP (cAMPactivatedprotein ).当大肠杆菌生长在缺乏葡萄糖的培养基中时,CAP合成量增加,CAP具有激活乳糖(Lac)等启动子的功能.一些依赖于CRP的启动子缺乏一般启动子所具有的典型的-35区序列特征(TTGA

30、CA ).因此RNA聚合酶难以与其结合.CAP的存在(功能)：能显着提升酶与启动子结合常数.主要表现以下二方面：CAP通过改变启动子的构象以及与酶的相互作用帮助酶分子正确定向,以便与-10区结合,起到取代-35区功能的作用.CAP还能抑制RNA聚合酶与DNA中其它位点的结合,从而提升与其特定启动子结合的概率.78.简述真核生物转录后处理的过程及其分子生物学功能答：5'端加帽：保护 5不被酶解；有利于 mRNA通过细胞核运输；有一定的识别功能,被核 糖体结合.3端加polyA尾：使mRNA在细胞中更稳定；方便运输；与帽子一样可形成特殊的识别位点. 内部甲基化：形成 tRNA等产物.剪接：

31、去除内含子,可变剪接扩充模板的编码信息量.RNA编辑：在mRNA分子水平上对碱基的插入,丧失,修改遗传信息.84. Holliday重组模型经过修正,现成为同源重组模型.简述该模型的五个特点.答：(1)同源配对的链发生断裂,经过局部交换并重新结合；(2)断裂及修复产生交互的产物；(3)重组可发生在DNA的任何位置；(4)交换过程是精确的,没有核甘酸的添加于丧失；(5)基因的转变可造成两个不同等位基因的不等量.104 .什么是增效与减效突变？答：顺式作用的启动子等调控序列的突变不是阻碍相对应的转录单元转录所必需的.然而,转录启动的效率可能会因此而下降,相邻基因的转录会减弱,这样的突变称为减效突变

32、.假设改变启动子序列的突变能提升转录启动的效率,那么这样的突变称为增效突变.114 .简述核糖体的活性中央的二位点模型及三位点模型的内容.答：(1)二位点模型 A位：氨酰-tRNA进入并结合的部位；P位：起始氨酰-tRNA或正在延伸的肽 基-tRNA结合部位,也是无载的 tRNA从核糖体上离开的部位.(2)三位点模型大肠杆菌上的70S核糖体上除 A位和P位外,还存在第三个结合 tRNA的位点,称为E位,它特异地结合无负载的tRNA及无负载的tRNA最从核糖体上离开的位点.115 .简述蛋白质生物合成过程.答：蛋白质合成可分四个步骤,以大肠杆菌为例：(1)氨基酸的活化：游离的氨基酸必须经过活化以

33、获得能量才能参与蛋白质合成,由氨酰-tRNA合成酶催化,消耗 1分子ATP ,形成氨酰-tRNA o(2)肽链合成的起始：由起始因子参与,mRNA与30S小亚基、50S大亚基及起始甲酰甲硫氨酰-tRNA(fMet-tRNAt)形成70S起始复合物,整个过程需GTP水解提供能量.(3)肽链的延长：起始复合物形成后肽链即开始延长.首先氨酰-tRNA结合到核糖体的 A位,然后,由肽酰转移酶催化与P位的起始氨基酸或肽酰基形成肽键,tRNAf或空载tRNA仍留在P位.最后核糖体沿 mRNA5'3方向移动一个密码子距离,A位上的延长一个氨基酸单位的肽酰-tRNA转移到P位,全部过程需延伸因子EF-

34、Tu、EF-Ts,能量由GTP提供.(4)肽链合成终止,当核糖体移至终止密码UAA、UAG或UGA时,终止因子 RF-1、RF-2识别终止密码,并使肽酰转移酶活性转为水解作用,将P位肽酰-tRNA水解,释放肽链,合成终止.116 .大肠杆菌系统表达外源基因必须具备的条件？答：(1)要求外源基因的编码区不能含有内含子；(2)表达的外源片段要位于大肠杆菌启动子的下游,并形成正确的阅读框架；(3)转录出的 mRNA必须有与大肠杆菌 16SrRNA3 ,末端相匹配的SD序列,才能被有效的译成蛋白质.(4)蛋白产物必须稳定,不易被细胞内蛋白酶快速降解,且对宿主无害.117 .解释为什么操纵子和启动子是反

35、式隐性、顺式显性的,而编码阻碍蛋白的基因既是反式显性又是 顺式显性.答：操纵基因和启动子突变只影响顺式基因的表达(反式隐性的),这是由于它们是调控序列,仅仅调节相同DNA分子上的相邻基因的表达.阻遏物基因编码可以扩散的基因产物,因此既能影 响顺式又能影响反式基因的表达 .121 .概括细菌细胞内的转录过程.答：转录是通过 RNA聚合酶RP的作用,以一条 DNA链为模板产生一条单链 RNA的过程.步骤 如下：1与RP全酶的结合：一个 RP全酶分子与彳f转录的 DNA编码序列上游的启动子序列松 弛地结合.2起始：RP往下游移动了几个核甘酸到达启动子的另一段短序列 Pribnow框,紧密地与DNA结

36、合.DNA上的启动子区域解链,RNA便从Pribnow框下游的几个核甘酸处开始合成,通常是 DNA的反义链作为模板.合成几个核甘酸后,因子被释放并被循环使用,以下 的步骤不再需要因子3延伸：四核心酶沿着 DNA模板移动,使 DNA解链,与DNA模板的下 一碱基互补的核甘三磷酸聚合到链上.RP继续在DNA上移动,RNA链从模板链被释放出来,DNA双螺旋重新形成4终止：当所有编码序列被转录后,RP移到一个终止序列,即终止子.转录复合体解体,RP和新合成的RNA从DNA模板脱落下来.124 .区别可诱导和可阻遏的基因调控.答：在可诱导的系统中,操纵子只有在诱导物存在时才开放,没有诱导物时阻碍物结合在

37、操纵子上阻止结构基因的转录. 存在诱导物时,它与阻遏物结合, 使之变构不再与操纵子结合,翻开操纵子.酶的诱导是分解途径特有的,诱导物就是酶的底物或者底物的类似物.在可阻碍系统中操纵子被终产物所关闭.不存在终产物时, 阻碍物不能结合到操纵子上,因此操纵子开放； 存在终产物时,它结合到阻碍物上,改变后者的构象,使其能结合到操纵子上,关闭操纵子.酶阻碍是合成代谢 的特点.125 .衰减作用如何调控中色氨酸操纵子的表达？答：衰减作用根据 tRNATrp的数量去调节 Trp操纵子的表达,而 tRNATrp的数量又取决于细胞中 Trp的水平.Trp操纵子mRNA前导序列很长,包括了编码一个长 14个氨基酸

38、的多肽所需的全部 遗传信息包括一个AUG起始密码和一个 UGA终止密码.这个多肽含有两个相邻的Trp残基,因此色氨酰-tRNA对前导肽的译是必不可少的.衰减作用发生的必要条件是：1译产生前导多肽；2转录和译的偶联.这样,当 RNA聚合酶转录前导序列的同时核糖体就紧接着结 合到新生的mRNA上译产生前导肽.mRNA的前导序列包括两对相似的反向重复序列图中用1, 2, 3和4示.序列2与序列1和3局部互补,这样 1+2或2+3或3+4或1+2和3+4都 能通过碱基配对形成茎环结构.由序列 3和4配对形成的茎环结构与 Trp操纵子的终止子根本 相同.和终止子一样,在其茎的3'一侧具有7个连续

39、的U形成的尾巴.当形成这种衰减子结构时,它就能像终止子一样使转录终止.注意到两个Trp密码位于序列1内,而且前导肽的终止密码在序列l和2之间.这样,如果色氨酸的量是充足的,那么, tRNATrp的含量也能够使前 导肽的译进行到终止密码UGA o结合的核糖体覆盖了 l和2两个区域,这样 1和2、2和3两个序列就不能形成茎环结构,这就使3, 4两个序列形成衰减子环并起到终止子的作用,导致RNA聚合酶分子脱离 DNA模板.另一方面,如果色氨酸缺乏,那么存在的色氨酰-tRNA也很少,导致核糖体停止在两个Trp密码之前,这样核糖体仅盖住区域l,并在序列4被转录之前,序列2和序列3形成茎环结构.这个结构的形成阻止了序列3与序列4形成终止子结构. 于是,出现通读,切操纵子的其他局部被继续转录.事实上,是mRNA上核糖体所在的位置决定mRNA的二级结构和衰减作用是否发生.126 .表观遗传,及调控方式,还有蛋白质通过哪些共价修饰调控其功能？答：表观是指 DNA序列不发生变化但基因表达却发生了可遗传的改变,即基因型未发生变化而表 型却发生了改变.换言之,这是一种DNA序列外的遗传方式.基因组含有两类遗传信息：一类是传统意义上的遗传信息,即DNA序列所提供的遗传信息；另一类是表观遗传学