安卡拉病综述2015-12-6

1、 心包积液肝炎综合征（安卡拉病） 刘会芳 石家庄神九所 2015-12-6 一、安卡拉病的历史与流行情况 二、主要症状、病变 三、我国流行株的序列与基因进化树 四、安卡拉病在我国的暴发的原因和流行预测 四、安卡拉病的治疗 五、安卡拉病的预防 一、安卡拉病的历史与流行情况 安卡拉病简史：它是腺病毒1群C种4亚型毒株，最初于1987年发生于巴基斯坦的安拉卡地区，俗称为安卡拉病，后发生于中东、东北亚、南北美洲、欧洲，它与包涵体肝炎还不一样。我国2015暴发于山东的安卡拉病已蔓延至河南、江苏、安徽、河北、山西、陕西、辽宁、内蒙、吉林、湖北、四川等地，两广单独另发生的，这需要做相应的基因测序和比对工作。

2、在疾病流行过程中，疾病暴发程度可能减轻，死亡率也有所下降，但个别地方、个别区域疾病发生仍很严重。感染家禽主要是：肉鸡、肉杂、蛋鸡、黄鸡、麻鸡、土鸡以及鸭、鹅、鸽等。雏禽和青年家禽发病居多，但成年家禽仍有一定比例的发病，发病比较晚的也有，如400多天山西运城某鸡场的蛋鸡。一般发病在1070天之间，发病最早的可见第6日龄（山东某肉杂鸡场），发病晚的可见300多日龄（河北某种鸡场），集中死亡时间主要在1530天之间，病程一般有20天，日均死亡率约为13%，死淘率达1030%，发病越早，则死亡率越高，如果发病期间，有流感、新城疫、大肠杆菌、沙门氏菌等病毒或细菌混合感染，则死亡率大幅增加，最近，河南许昌

3、地区某地青脚麻鸡死亡率创下记录，1万只20多日龄麻鸡10多天死亡9900多只，几近全军覆灭。一般患病鸡群的排毒时间在48周左右。二、主要症状、病变最明显的特征就是心包腔有黄色或淡黄色积液，液体从0.58ml不等，心包液内有时能检到腺病毒，也有时能检测到细菌。 肺水肿，肝略肿大，部分鸡的肾脏有尿酸盐沉积甚至出血或胰腺出血。 一般从肝脏中容易检测到病毒。 有时腺胃与肌胃交界处出血。心包囊中淡黄色清亮积液，肺水肿、肝脏肿胀和变色、肾脏肿大，伴有肾小管变性肿胀。在心脏和肝脏出现多个局灶性坏死区域，伴随单核细胞浸润。在肝细胞内有嗜碱性包涵体。染片镜检，能看到肝细胞内形成明显大而近圆形的嗜碱性包涵体。在电

4、镜下，可见细胞核内有大量的病毒颗粒。 三、我国流行株的序列与基因进化树我国现在主流行的山东莘县毒株也属于腺病毒I群C种4亚型流行株。腺病毒毒株图示如下： 无囊膜，有纤突及头部的头节，主要是Hexon和Penton蛋白，内部有核衣壳包裹遗传DNA。我所已对山东流行株已分离，并进行了一些相关工作。该病毒株毒力较强，鸡胚有应激现象，胚体及内脏器官出血。鸡胚生长变慢，比正常对照明显小很多。 用引物在PCR仪上能较快检测出病毒来，如果拿到纯化毒株，再扩增时，病毒量会变很大。目前除山东株外，还有石家庄株和大连株等。 我们对Hexon的部分基因进行测序，基因序列已传至美国GenBank（基因库）上，申请号：

5、1868443 登陆号：kt999720。从网站上看，这可能是中国2015年首个上传的腺病毒I群基因序列。相关基因序列如下： LOCUS Seq1 1128 bp DNA linear VRT 03-NOV-2015DEFINITION hexon protein gene, partial cds.ACCESSION Seq1VERSIONKEYWORDS .SOURCE Gallus gallus (chicken) ORGANISM Gallus gallus Eukaryota; Metazoa; Chordata; Craniata; Vertebrata; Euteleostomi

6、; Archelosauria; Archosauria; Dinosauria; Saurischia; Theropoda; Coelurosauria; Aves; Neognathae; Galloanserae; Galliformes; Phasianidae; Phasianinae; Gallus.REFERENCE 1 (bases 1 to 1128) AUTHORS Zhu,w., Wang,h., Liu,h., Liu,j., Wang,y., Wang,c., Xu,l., Gao,y. and Song,q. TITLE Fowl aviadenovirus 4

7、isolate from ShanDong,hexon protein gene,partial cds JOURNAL UnpublishedREFERENCE 2 (bases 1 to 1128) AUTHORS Zhu,w., Wang,h., Liu,h., Liu,j., Wang,y., Wang,c., Xu,l., Gao,y. and Song,q. TITLE Direct Submission JOURNAL Submitted (04-NOV-2015) Shijiazhuang SHENJIU Animal and Poultry Disease Institute

8、, Institute, ShiJiaZhuang heping West Road No. 598, ShiJiaZhuang, HeBei 050000, ChinaCOMMENT Bankit Comment: TOTAL # OF SEQS:1. #Assembly-Data-START# Sequencing Technology : Sanger dideoxy sequencing #Assembly-Data-END#FEATURES Location/Qualifiers source 1.1128 /organism="Gallus gallus" /p

9、roviral /mol_type="genomic DNA" /isolate="liver" /host="chicken" /db_xref="taxon:9031" /country="China" /collection_date="2015" CDS 1.>1128 /note="Fowl aviadenovirus 4" /codon_start=1 /product="hexon" /translation=&qu

10、ot;TRAVLQPYCGTAYNPLAPKESMFNNWSETAPGQNVSASGQLSNV YTNTSTSKDTTAAQVTKISGVFPNPNQGPGRNPLRRVQNANTGVLGRFAKSQYNYAYG AYVKPVAADGSQSLTQTPYWIMDNTGTNYLGAVAVEDYTNSLSYPDTIVVPPPEDYDD YNIGTTRALRPNYIGFRDNFINLLYHDSGVCSGTLNSERSGMNVVVELPDRNTELSYQ YMLADMMSRHHYFALWNQAVDQYDPEVRVFSNDGYEEGAPSYAFNPEAVGAGEGYGPD LSQIKLYTNNTAANDK

11、NTAVANATTNFYFGTVPSYEIDISATQRRNFIMANIAEYLPD RYKFSISGFDATSVAPTTYEYMNKRVPLTNVVDMSRTWCAVG"BASE COUNT 262 a 388 c 283 g 195 tORIGIN 1 acgagggccg tccttcagcc ctactgcggc acggcttaca acccgctggc tcccaaggag 61 tccatgttta acaactggtc ggagacggca cccgggcaga acgtgtccgc ctccggtcag 121 ctgtccaacg tctataccaa cacga

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13、tggccgt cgaggactac 421 accaacagcc tctcgtaccc agataccata gtcgtgccgc ctcccgagga ctacgacgat 481 tataacatag gcaccacgcg tgcgctcagg cccaactaca tcgggttcag ggataacttc 541 attaacctgc tgtatcacga ctccggcgtg tgctcgggca ccctcaactc ggagcgttcg 601 ggcatgaacg tggtggtcga gctgcccgac cggaataccg agctcagcta ccagtacatg 6

14、61 ctggccgaca tgatgtcccg ccatcactat ttcgccctgt ggaaccaggc cgtggaccag 721 tacgaccccg aggtgcgagt cttctccaat gacggttacg aagaaggcgc gcccagctac 781 gccttcaacc ccgaagcggt aggcgcggga gaaggctacg gccccgatct cagtcaaatt 841 aaactctaca ccaacaacac cgccgcgaac gacaaaaaca ccgccgtggc taacgccact 901 accaacttct acttcg

15、gcac ggtaccctcc tacgaaatcg atatcagcgc tacccagagg 961 cgcaacttta tcatggccaa catcgccgag tatctgcccg accgttacaa gtttagcatc 1021 tccggcttcg acgccaccag cgtcgcgcct accacctacg agtacatgaa caagcgcgtc 1081 cccctcacca acgtcgtcga catgtcacga acgtggtgcg cggtgggg根据这些基因序列，进行进化树遗传分析，图示如下：由此可见，病毒变化不大，在亚、美常态形存在。四、安卡拉病在

16、我国的暴发的原因和流行预测我国发病，主要是有病毒毒株基础性存在，它最少能够通过接触进行水平传播。发病的另外两个原因，一是“种”蛋的垂直传播问题，二是低质量非SPF蛋做的疫苗的污染问题，一些厂家的疫苗有可能有嫌疑。检测图如下：随机抽检8个厂家产品，其中4个厂家产品的嫌疑特征片段高于普通种鸡胚和SPF的背景基因片段。 综合以上分析，在当下的养殖模式下，此病不可能被根除，还会不断地发病，从思想上和产品上应做好长时间的治疗和预防准备。 四、安卡拉病的治疗最好的治疗方案就是特异性的血清或提纯的卵黄抗体注射治疗，饮水也有一定的效果，只能起到一定的低病毒潜伏时的清除作用。养殖户十几年前就发现，发病后的鸡产的蛋对此病有治疗和“预防”作用。现在的机理也一样，给鸡注射新分高的毒株疫苗，收获高免鸡蛋，提纯抗体。本动物的血清成本较高，不适合做商品鸡使用。 市场上的抗体含量问题：有效抗体含量越高，效果则越明显，相关检测图如下：好的抗体一般在1ng/L，有的是.，有的是.，也有的仅.，还有的含量为0。造成这种情况的原因可能有以下几种：一是不能分离到病毒，只能用病死鸡的器官做一些组织苗，而器官的病毒含量不稳定，所以免疫效果就差。二是加水比较多。至于抗体含量为零的问题，则超出本文讨论范围内，这