医学检验--常用血清酶和同工酶测定的临床意义

1、常用血清酶和同工酶测定的临床意义1. 连续监测法测定血清肌酸激酶（CK）2. 连续监测法测定乳酸脱氢酶（LD）总活性3. 连续监测法测定血清（天）门冬氨酸氨基转移酶（AST）4. 连续监测法测定血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）5. 连续监测法测定血淸碱性磷酸酶（ALP）6. 连续监测法测定血清中谷氨酰基转移酶（GGT）7. 淀粉酶（AMY）测定8. 比色法测定酸性磷酸酶（ACP）连续监测法测定血清肌酸激酶（CK）CK是由两种不同的亚基M和B组成的二聚体C正常人体中有三种同工酶，即CK-BB （CKl）、CK-MB （CK2）和CKTlM （CK3）。CK作用后生成的磷酸肌酸含髙能磷酸键，是肌肉收

2、缩时能疑的直接来源。CK需要镁离子激活。1.原理斷偶联反应测定CK活性浓度。CK磷酸肌酸+ MP 肌 + ATPATF +葡萄糖 - 6-磯酸葡萄糠+ ADF6喩酸葡萄糠+ P-廿甜酸葡萄槪彎.6-« 葡萄犍酸十HAMH十JT在34Onm监测NAD （P） H的生成量，可计算出CK的活性浓度。2. 生理变异年龄、性别和种族对CK含量都有一泄影响。CK含量和肌肉运动密切相关。3. 参考值男性 38174U/L （37OC）:女性 26140U/L （37OC） O4. 临床意义升髙：（1）心肌梗死。心肌梗死发生后24h此酶即开始升高，1248h达最髙IW值，可髙达正常上 限的1012倍

3、，在24天降至正常水平。（2）病毒性心肌炎。（3）肌营养不良症、皮肌炎、骨骼肌损伤。（4）脑血管意外、脑膜炎、甲状腺功能低下等疾病及一些非疾病因素如剧烈运动、务种插管及 手术、肌肉注射冬眠灵和抗生素。降低：甲亢，长久卧床者总CK （主要为CK-MM）可下降。5. CK同工酶检测原理及临床意义CK是由两种不同的亚基M和B组成的二聚体，正常人体中有三种同工酶： CK-BB （CK1（脑型）：主要存于脑组织、前列腺、 肠、肺、腫胱、子言、胎盘及甲状腺中；CK-MB （CKZ）:主要存于心肌；CK-MM（CK3）（肌型；主要存于晉骼肌和心肌。在细胞线粒体内还有好一种CK同工酶，称为CK-Mt。（CK同

4、工酶免疫特性和电泳迁移率各不相同。在电泳时，CK-BB迁移最快，走在阳极白蛋白区： CK-MB居中，位于S和B球蛋白区：CK-MM最慢，位于阴极Y-球蛋白区：CK-Mt迁移率最低，位于 CK-MM 后。电泳后进行酶促反应显色，观察结果。（2）临床意义：IE常血淸中绝大部分为CK-MM的活性,含有少量的CK-MB, CK-BB含呈:极少，用 _般方法测不岀。CK同工酶活性的变化见于以下情况。1） CK-MB是目前公认的诊断急性心肌梗死最有价值的生化指标。（诊断心梗现多用免疫化学法 测定其丿2）肌营养不良：肌肉创伤、皮肌炎患者CK-MM明显增髙。3）心肌梗死以外的心脏疾患有时也可有lflL） CK

5、-MB的轻度升髙。 常见疾病的血清总CK和CK同工酶变化疾病总CKCK同工酶急性心肌梗死常用酶中升高最早（48h）, 24h达峰值,23d恢复正常，中度升高确诊心梗试验之一，大于总 酶的6%有意义，23d恢复 正常心肌炎肌肉损伤（挫伤、 手术、肌注、剧烈运动 等）急性期轻度升髙，可达5倍正常上限。升髙程 度和损伤程度相关，严重者可达IOOOOU/L以 上，肌注仅轻度升高，一日内恢复正常CK-MB可增高，CK-MM升髙为 主，CK-MB/CK活性比V6%多发性肌炎和肌炎明显升音主要为CK-MM神经性肌肉疾患'.;无变化脑血管意外（脑岀血， 脑血栓）部分患者血液和CSF中CK升高CK-BB

6、甲状腺功能低下可高达正常上限50倍主要为CK-MM运动试验可轻度升髙CK-MB正常恶性肿瘤（通常见于前 列腺癌、小细胞肺癌、 消化道癌）不定CK-BB轻度升高连续监测法测定乳酸脱氢酶（LD）总活性乳酸脱氢酚是种含锌的氧化还原酶类，人体以心、肾、卄骼肌含量最丰富，其次为肝、脾、 胰及肺组织含量亦较多。1. 原理乳酸+NAD亠-LD -丙匪酸+NAW+H+34OnJn处吸光度的增加速率与样品中LD活性成正比。2. 生理变异IIILiW LD高低和性别关系不大，婴儿酶活性可达成年人两倍，儿童和少年活性比成年人髙10弔 15%03. 参考值 血清LD-P法：109245U/L （成人）。4临床意义血淸

7、LD活性增髙主要见于心肌梗死、肝病、肺梗死、恶性肿瘤、白血病、恶性淋巴瘤等的辅助 诊断。某些肿瘤转務后所致的胸、腹水中LD活性往往也升高<55. LD同工酶检测原理及临床意义LD是由H亚基和M亚基构成的四聚体，不同的组合方式构成五种同工酶. 込 M M M; M NM NLDH-CHJLDH=CO)LHH.,LDK；LDH=(HxM->(HM：.)(Mj1）方法琼脂糖电泳法血淸LD同工酶目前常用琼脂糖凝胶电泳法测定。2）临床意义LD同工酶在组织中的分布可将其分为三类。以LDI为主，主要在心肌，可占总酶的50%也存在于红细胞内：以LD5为主，存在于横纹肌，肝中也有：以LD3为主，存在

8、于肺、脾等。在成年人存在着如F规律：LD2 > LD1 > LD3 > LDI > LD5 急性心肌梗死发作后早期，LDI升高更早更明显，可致LD1/LD2比值增髙。 活动性风湿性心肌炎、急性病毒性心肌炎及某些溶血性疾病，肾坏死、假性肥大性肌营养不 良等，LDI及LD2的活性也升高。 当急性肺部病变、白血病、胶原病、心包炎、病毒感染等LD2及LD3增髙。而恶性病时，LD3 也常增髙。 肝炎、急性肝细胞损害及骨骼肌损伤时LD5常常增髙。而当心肌梗死并发充血性心力衰竭时， LD5也可升髙。常见疾病LD总酶和LD同工酶的变化疾病LD总酶LD同工酶心肌梗死升高最慢（8Iod）升

9、高时间长（5IOd）可高于正 常上限10倍LD：>LD：,可持续两 周充血性心衰，心肌 炎可高于正常上限5倍ld1>ld3病毒性肝炎部分患者可高于正常上限5倍ld5>ld,肝硬化轻度升高LD明显升髙，LD5>LD原发性肝癌部分病例升高同上梗阻性黄疸不定常 LD1>LD5肌肉损伤视损伤程度而异以LD,升髙为主恶性肿瘤可升高以LDS为主，LDo>LDI连续监测法测定血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）ALT和AST是体内最重要的两种转氨酶,辅酶是磷酸毗哆醛。AST有两种同工酶,分别存在于细胞质（c-AST）和线粒体（m-AST） , ALT绝大多数在细胞质内， 可能有

10、极少量在线粒体中。ALT和AST在于体内多种器官和组织中，以含量从多到少为序：AST为心脏、肝、柠骼肌和肾等： ALT为肝、肾、心、席骼肌等。1. 原理：采用酶偶联反应测左ALT的底物是（】-酮戊二酸和丙氨酸。ALiL-丙氨酸十« -酮戊二酸 丙酮酸十L-谷氨酸LD丙酮酸十NADH+ JT *乳酸十HAlr在34Onin处连续监测吸光度下降速率,从而计算出ALT活性浓度。2. 生理变异：此酶生理变异较小，无统计学意义。3. 临床意义：ALT常作为判断肝细胞损伤的灵敏指标,轻度损伤即升髙，肝病早期诊断C但其他疾病或因素亦会引起ALT不同程度的增高。（1）急性病毒性肝炎ALT阳性率为80

11、%Io0%,最髙可达500U以上，多为ALT>ASTo监测ALT可以观察病情的发展， 并作预后判断。（2）慢性活动性肝炎或脂肪肝ALT轻度增髙（Ioo200U）, 般不超过参考值的3倍,或属正常范围，且AST>ALT,.（3）肝硬化、肝癌ALT有轻度或中度增髙，提示可能并发肝细胞坏死，预后严重。（1）比他原因引起的肝脏损書,如心功能不全时，肝淤血可使ALT、AST明V升岛:某些化学 药物如异烟腓、氯丙嗪、苯巴比妥等可不同程度的损害肝细胞,引（5）柠骼肌损伤、多发性肌炎等亦可引起转氨閒升高。应注重症肝炎由于大量肝细胞坏死，此时血中ALT可仅轻度增高，临终时常明显下降，但胆红素却 进行

12、性升高，即所谓的“酶胆分离”，常是肝坏死征兆。另一种情况是少数人血淸中ALT长期持续升高，肝穿无明显病理改变,预后良好。连续监测法测定血清（天）门冬氨酸氨基转移酶（AST）1. 原理AST门冬氨酸4債-酮戊二酸 草醜乙酸4 -谷氨酸草酰乙酸十KADH+H-苹苹果酸十阿基质是门冬氨酸与戊二酸在34Onin处监测吸光度的下降速率,从而计算AST活性。2. 生理变异：此酶生理变异较小。3. 参考值：成人<45ULo4. 临床意义 主要用于诊断AMI； AST也是肝炎想者的观察指标,且AST/ALT比值对判断肝炎的转归特別有价值; m-AST 顾亦肝实质细胞损害程度、急慢性肝炎的鉴别有一泄价值。

13、常见疾病ALT和AST及其同工酶的变化疾病ALTASTAST/ALT病毒性肝炎明显升高，随病情而异可达正常上 限10100倍同ALT,较ALT轻且恢复早VI. 0与肝硬化 鉴别重症肝炎升高正常上限20倍内，有酶胆分 离现象升高超过ALi>1.0肝硬化常轻度增高升高超过ALT>1.0梗阻性黄疸轻度升髙同ALT常 VI.0溶血性黄疸无变化无变化心肌梗死轻度升高明显升高,与CK和LD比较, 无优点>1.0肌肉损伤正常或轻度升髙急性期可轻度升高>1.0连续监测法测定血清碱性磷酸酶（ALP）ALP指一组底物特异性较低，在碱性坏境屮（最适PHIO左右）能水解很多磷酸单酯化合物的酶。

14、ALPr泛存在各器官组织中，含量以肝为最多,其次为肾、胎盘、小肠、计等，妊娠时胎盘产生 胎盘ALPo一般认为竹中的ALP和件的钙化作用关系密切。血淸中的ALP主要来自肝脏和骨骼。ALP卫要川円储和川Illi系统:欢幕羅断和鉴别诊断,尤其是黄疸的鉴別诊断。1磷酸苯二钠比色法：测定ALP水解底物产生的酚。磷酸苯二钠做底物，2-氨基-2-甲基-1-丙醇或二乙醇胺为磷酸酰 基的受体。在碱性环境下经ALP作用后产生黄色的对硝基酚，根据105nm处吸光度增离速率来计算 ALP活性单位。2. 生理变异ALP变化与年龄密切相关,新生儿ALP略髙于成年人，以后逐渐增髙，20岁后降至成年人值， 到老年期又轻度升高

15、，可能与生理性的激素变化有关。孕妇血淸ALP在妊娠3个月即开始升高，是廿髙最明显的酶,9个月可达Il矗值，约为正常值的2 倍。升髙的ALP来自胎盘，和胚泡壁的细胞滋养层的发育程度直接相关。髙脂餐后，血淸ALP活性升髙。无黄疸肝脏疾病患者血中发现有ALP升高应警惕有无肝癌可能。3. 参考值女性：1 12 岁 < 500U/L： >15 岁 40150U/L；男性：1 12 岁<500U/L： 1215 岁 V750U/L： >15 岁 40150U/L。4. 临床意义：在临床上，IfIl ALP活力测沁常作为肝胆疾病和计骼疾病的临床辅助诊断指标。（1）血清ALP活性升髙：

16、见于骨Paget病、胆管梗阻、恶性肿瘤件转移或肝转移、佝偻病、宜 软化、成卄细胞瘤、甲状旁腺功能亢进及卄折愈合期。（2）血淸ALP活性降低:比较少见，主要见于呆小病，磷酸酶过少症，维生素C缺乏症。甲状 腺功能低下、恶性贫血等也可见血淸ALP下降。常见疾病血清ALP活性变化疾病ALP增髙变形性竹炎极度上升，可达正常上限50倍骨肿瘤（骨细胞癌）中度上升佝偻病（软骨病）可达正常上限13倍梗阻性黄疸明显升高，可达正常上限1015倍肝实质疾病（肝炎、肝硬化）轻度上升，在很少超过正常上限3倍者肝癌常明显上升，无黄疸而有血淸ALP活性上升应考虑肝占位性病 变连续监测法测定血清谷氨酰基转移酶（GGT）GGT是

17、一种底物特异性不髙的酶，能作用于一系列含谷氨酰基的化合物。各器官GGT的理化性质 有差异，用琼脂糖电泳可分出4个区带。GGrL原理"硝基-5-氨基茉甲酸十谷氨醍双甘肽L-Y谷氨SH-拔基-4-硝基苯胺+法甘肽在40541Onm处吸光度增商速率与GGT活性呈正比关系。+谷氨酰双甘肽L-Y谷氨酰-3-竣基-4-硝基苯胺+双甘肽GGT2-硝基-5-氨基苯甲酸黄色2. 生理变异年龄与妊娠对GGT影响不大。男性血中GGT含量明显髙于女性,可能与前列腺有丰富的GGT有关。酗泸亘GGT亟MJUn什高用仗9饮酒/仃关,诊断疾病时必须排除这一因素。3. 参女性：730UL （37oC）。4. 临床意义

18、（1）肾脏含GGT最髙,测泄尿中该酶活性有助于诊断肾小管疾患。（2）GGT主要用于诊断肝胆疾病。原发性肝癌、胰腺癌和乏特壶腹癌时,血淸GGT活性显著升 直，特别在诊断恶性肿瘤患者有无肝转移和肝癌术后有无复发时，阳性率可达90%, GGT同工酶II与 匹联合检测可使原发性肝癌阳性率明显提髙；在肝炎恢复期内，该指标仍升髙时，指示肝炎未愈。（3）墮酒慢件.酒耕中得或长期服用苯巴比妥等药物血淸GGi活性常升髙,口服避孕药会使GGT 值增髙20常见疾病谷氨酰基转移酶的变化疾病增高肝胆疾病（胆石症、炎症）明显增髙，可达正常上限的530倍阳性率 在80%以上肝实质性疾病（肝炎、肝硬化）轻度增高，达正常上限2

19、5倍肝癌明显增高，且阳性率高诱导作用（乙醇、苯巴比妥、抗抑郁药，抗癫 痫药等）轻度升髙，停药后正常淀粉酶（AMY）测定淀粉酶作用于淀粉的“ -1，4糖昔键,Ci-是该酶的激活剂。1. 方法（1）碘-淀粉比色法测定。（2）对-硝基苯麦芽七糖苜法。FNP-G-十 5Hz0. PITP-Gj 十 FBr-G：PNP-G3 + PHT-G； + H；0 必一葡萄¾ . P 肝 + 葡萄糖PNP （对硝基苯酚）的生成引起405nm处吸光度的上升，上升速率与AMY的活力成正比。（3）2-氯-4-硝基苯麦芽三糖昔法。2. 生理变异成年人血中AMY与性别、年龄、进食关系不大，新生儿AMY缺乏，满月后

20、才出现此酶，逐步升 髙，约在5岁时达到成人水平，老年人AMY开始下降，约低25乩3. 参考值碘-淀粉比色法：血淸80180U/L：尿液1001200ULo对-硝基苯麦芽七糖昔法：血淸淀粉酶:220U/L （37OC） O尿淀粉酶：1200UL （37*0 0不同的方法血和尿淀粉酶测定值无可比性。各实验室应针对本实验室选定的方法制定参考值。4. 临床意义淀粉酶主要由唾液腺和胰腺分泌，可通过世小球滤过。升高:（1）急性胰腺炎：UIL和尿中的AMY显著增髙。发病后8-12h IfIL AMY开始增高，1224h达髙 嵯,25天下降至正常。尿AMY约于发病后1224h开始升高，下降比血淸AMY慢，在急性胰腺炎后期测立尿AMY更有 价值。碘-淀粉比色法结果如超过500U有意义。（2）流行性腮腺炎（3）急性阑尾炎、