基因工程的两个基本特点是

1、填空题1基因工程是 年代开展起来的遗传学的一个分支学科.2基因工程的两个根本特点是：(1) , (2).3 .基因克隆中三个根本要点是： ; 和.4 .通过比拟用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段,可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的 .5 .限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原那么命名的,第一个大写字母取自 第二、三两个字母取自 ,第四个字母那么用 表示.6 .局部酶切可采取的举措有：(1)(2) 等.7 .第一个别离的限制性内切核酸酶是 ;而第一个用于构建重组体的限制性内切 核酸酶是.8 .限制性内切核酸酶 BsuRI和Haem的来源不同

2、,但识别的序列都是 ,它们属于9 .DN臊合酶I的Klenow大片段是用 切割DN咪合酶I得到的分子量为76kDa 的大片段,具有两种酶活性：(1) ; (2) 的活性.10 .为了预防 DNA的自身环化,可用 去双链 DNA.11 . EGTA离子螯合剂.12 .测序酶是修饰了的 T7 DNA聚合酶,它只有 酶的活性,而没有 酶 的活性.13 .切口移位(nick translation) 法标记 DNA的根本原理在于利用 的 和的作用.14 .欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式,通常可采用或.15 .反转录酶除了催化 DNA勺合成外,还具有 的作用,可以将DNA

3、-RN冻种双链中的 水解掉.16 . 基因工程中有 3种主要类型的载体： 、17 .就克隆一个基因(DNA片段)来说,最简单的质粒载体也必需包括三个局部： 、.另外,一个理想的质粒载体必须具有低分子量.18 . 一个带有质粒的细菌在有 EB的培养液中培养一段时间后, 一局部细胞中已测不出质粒, 这种现象叫 .19 . pBR322是一种改造型的质粒,它的复制子来源于 ,它的四环素抗性 基因来自于 ,它的氨芳青霉素抗性基因来自于 .20 . YAC的最大容载水平是 , BAC载体的最大容载水平是 .21 . pSCl01是一种 复制的质粒.22 . pUCl8质粒是目前使用较为广泛的载体.pUC

4、系列的载体是通过 和两种质粒改造而来.它的复制子来自 , Amp抗性基因那么是来自 .23 .噬菌体之所以被选为基因工程载体,主要有两方面的原因：一是 ;二24 .野生型的M13不适合用作基因工程载体,主要原因是和 .25 .黏粒(cosmid)是质粒一噬菌体杂合载体,它的复制子来自 、COS位点 序列来自 ,最大的克隆片段到达 kbo26 .野生型的 噬菌体DNA宜作为基因工程载体,原因是： (1)(2)(3) .27 .噬菌粒是由质粒和噬菌体 DNA共同构成的,其中来自质粒的主要结构是 ,而来自噬菌体的主要结构是 .28 .噬菌体载体由于受到包装的限制,插入外源DNM段后,总的长度应在噬菌

5、体基因组的的范围内.29 .在别离DNA寸要使用金属离子螯合剂,如EDT保口柠檬酸钠等,其目的是 .30 .用乙醇沉淀 DNA寸,通常要在 DNA中加人单价白阳离子,如 NaCl和NaAc,其目的31 .引物在基因工程中至少有 4个方面的用途：(1) (2) (4).32 . Clark发现用Taq DNA聚合酶彳#到的PCR应产物不是平末端,而是有一个突出碱基末端的双链DNA子.根据这一发现设计了克隆PCRT物的 .34 .乙醇沉淀DN33在cDNA的合成中要用到 S1核酸酶,其作用是切除在 A 的原理是 35 .假定克隆一个编码某种蛋白质的基因,必须考虑其表达的三个根本条件：(1) .36

6、 .受体细胞的感受态是 .37 . DNA重组连接的方法大致分为四种：(1) (2)(3)4).38 .将含有外源基因组一个酶切片段的质粒称之为含有一个 ,各种此类质粒的 集合体称之为构建了一个 .39 .将含有一个 mRNA勺DNA考贝的克隆称作一个 ,源于同一批 RNA制备物的 克隆群那么构建了一个.40 .只要知道基因组中某一特定区域的局部核甘酸组成,用 可以将这段DNA进 行百万倍的扩增.41 .人工感受态的大肠杆菌细胞在温度为 时吸附DNA,时摄入DNA42 .目前,在重组体的筛选中,已经开展了许多构思巧妙、具有极高准确性的筛选方法.大致可以分为：(1)(2)(3)(4)43 . P

7、CRT增筛选重组体是比拟简便白筛选方法,它适合于 .44 .核酸杂交探针可分为两大类：DNA探针和RNAa针.其中DN琳针又分为 探针和 探针O45 .如果用限制性内切核酸酶切割双链DNAT生5'突出的黏性末端,那么可以用 进彳T 3'末端标记.如果用限制性内切核酸酶切割DNA产生白是3'突出的黏性末端,可以用 进彳T 3'末端标记.46 .单链 DN琳针的标记可以采用以下方法：(1)(2)(3)47 .根据 Northern 杂交的结果可以说明： .48 . 差 示 杂 交 (differentialhybridization) 技 术 需 要49 . RNA

8、分子经凝胶电泳后按大小不同分开,然后被转移到一张硝酸纤维素膜(尼龙膜)上,同一放射DN琳针杂交白技术称.50 .在 技术中,DNA艮制性片段经凝胶电泳别离后,被转移到硝酸纤维素膜(或尼龙膜)上,然后与放射性的 DNAa针杂交.51 .可用T4 DNA聚合酶进行平末端的DNA标记,由于这种酶具有 和的活性.52 .根据外源片段提供的遗传表型筛选重组体,必需考虑三种因：(1)(2)(3).53 . Northern 印迹和 Southern 印迹有两点根本的区另1J :(2) .54.放射免疫筛选的原理基于以下三点：(1)(2) (3).5!i工程生产蛋白质药物,经历了三个开展阶段.第-阶段,将人

9、的基因转入细菌细胞.第二阶段,将人的基因转入小鼠等动物的细胞.这两个阶段都是进行细胞培养,提取药物.第三阶段,将人的基因转入活的动物体,饲养这些动物,从乳汁或尿液中提取药物.1将人的基因转入异种生物的细胞或个体内,能够产生药物蛋白的原理是基因能控 制蛋白质的合成.2人的基因能和异种生物的基因拼接在一起,是由于它们的分子都具有双螺旋结构,都是由四种脱氧核甘酸 构成,基因中碱基配对的规律都是A 与T. C与Go3利用转基因牛、羊乳汁提取药物工艺简单,甚至可直接饮用治病.如果将药物蛋 白基因移到动物如牛、 羊的膀胱上皮细胞中,利用转基因牛、羊尿液生产提取药物比乳汁提取药物的更大优越性在于：处于不同发

10、育时期的雌、雄动物都可生产药物.55、复性是指,杂交是指.56 .入 噬菌体的最大克隆片段是 kb, Cosmid的最大克隆片段可到达 kb.57 . 0即为质粒的拷贝数,根据质粒拷贝数的多少,质粒可以分为和,质粒多数是一些具有转移水平的大质粒；0质粒多数是一些不具有转移水平的小质粒.58 .启动子Promotor是指.通常一个 Gene是否表达,是关键的一步,是起决 定作用的.在转录过程中,Promoter还是的结合位点.59 .同一种质粒DNA ,以三种不同的形式存在,电泳时,它们的迁移速率是60 .基因突变Gene mutation 的类型有,等.61 .碱裂解法提取质粒DNA的原理是.

11、62 .基因突变Gene mutation 的类型有,等.63 .Gene cloning 的目的是,常用的方法有、和等.64 .PCR 反响过程分为三个步骤,即,和.65 .番茄在运输和贮藏过程中,由于过早成熟而易腐烂.应用基因工程技术,通过抑制某种促进果实成熟激素的合成水平,可使番茄贮藏时间延长,培育成耐贮藏的番茄新品种,这种转基因番茄已于1993年在美国上市.请答复：1促进果实成熟的重要激素是 .2在培育转基因番茄的基因操作中,所用的基因的“剪刀是 ,基因的 “针线是 ,基因的“运输工具是 .3与杂交育种、诱变育种相比,通过基因工程来培育新品种的主要优点是 、 和 O66 .科学家通过基

12、因工程培育抗虫棉时,需要从苏云金芽抱杆菌中提取出抗虫基因,“放入棉的细胞中与棉的 DNA吉合起来并发挥作用,请答复以下有关问题：1从苏云金芽抱杆菌中切割抗虫基因所用的工具是 ,此工具主要存在 于 中,其特点是 .(2)苏云金芽抱杆菌一个 DN后子上有许多基因,获得抗虫基因常采用的方法是 “鸟枪法.具体做法是：用 将苏云金芽抱杆菌的 切成许多片段,然后将 这些片段 ,再通过 转入不同的受体细胞, 让它们在各个受体细胞中大量 ,从中找出含有目的基因的细胞,再用一定的方法把 别离出来.(3)进行基因操作一般要经过的四个步骤是： 、67 .干扰素是治疗癌症的重要物质,人血液中每升只能提取0.05mg干

13、扰素,因而其价格昂贵,平民百姓用不起.但美国有一家公司用遗传工程方法合成了价格低廉、药性一样的干扰素,其具体做法是：(1)从人的淋巴细胞中提取能指导干扰素合成的 ,并使之与一种叫质粒 的DNA结合,然后移植到酵母菌内,从而让酵母菌来 .(2)酵母菌能用 方式繁殖,速度很快,所以能在较短的时间内大量生产 .利用这种方法不仅产量高,并且本钱较低.(3)科学家陈炬在这方面也做出突出奉献,他成功地把人的干扰素基因嫁接到了烟草 的DNA分子上,其物质基石和结构根底是 .(4)烟草具有了抗病毒水平,这说明烟草体内产生了 ,由此可见,烟草和人 体合成蛋白质白方式是 ,从进化的角度来考虑,证实了人和植物的起源

14、是68 .基因工程技术对人类产生的影响既有积极的一面,同时也存在着很多需要继续探讨和解决的问题,这些问题主要表现为 、等四个 方面.69 .干扰素是治疗癌症的重要物质,它必须从人血中提取.每升人血只能提取 ,故价格昂贵,现在美国加利福尼亚的基因公司采用如以下图所示的方法生产干扰素,据此答复：(1)把干扰素基因从人体的 DNA中直接别离出来,此种方法称为 .从人的 细胞中取出干扰素基因,此基因在基因工程中称为 .(2)将此基因插入细菌质拉切口处,用 酶使它和经过处理的细菌质粒基因结合,然后移植到酵母菌体内,使酵母菌具有 .(3)酵母菌能以 方式繁殖,此繁殖方法速度快,既提升了产量,又降低了成70

15、 .利用基因工程生产蛋白质药物,经历了三个开展阶段.第一阶段,将人的基因转入细菌细胞.第二阶段,将人的基因转入小鼠等动物的细胞.这两个阶段都是进行细胞培养,提取药物.第三阶段,将人的基因转入活的动物体,饲养这些动物,从乳汁或尿液中提取药物.(1)将人的基因转入异种生物的细胞或个体内,能够产生药物蛋白的原理是基因能控制.2人的基因能和异种生物的基因拼接在一起,是由于它们的分子都具有双螺旋结构,都是由四种 构成,基因中碱基配对的规律都是 .3利用转基因牛、羊乳汁提取药物工艺简单,甚至可直接饮用治病.如果将药物蛋白基因移到动物如牛、羊的膀胱上皮细胞中, 利用转基因牛、羊尿液生产提取药物比乳汁提取药物

16、的更大优越性在于：处于不同发育时期的 动物都可生产药物.71 .据调查,随着化学农药的产量和品种逐年增加,害虫的抗药性也不断增强,造成的危害很严重.如近年来,棉铃虫害在我国大面积爆发,每年造成经济损失达 100万元以上,针对这种情况,我国科学工作者研究发现一种生活在棉铃虫消化道内的苏云金芽抱杆菌能分泌一种毒蛋白使棉铃虫致死,而此毒蛋白对人畜无害.通过科技攻关,我国科技工作者已成功地将该毒蛋白基因导入棉花植株体内,并实现了表达.由于棉铃虫吃了新品种“转基因抗虫棉植株后就会死亡,所以,该棉花新品种在近年推广后,已收到了很好的经济效益.请据以上所给材料,答复以下问题：1害虫抗药性的增强是 的结果.2

17、 “转基因抗虫棉新品种的培育应用了 新技术.3限制毒蛋白合成的基因结构中的编码区的特点是 .4转基因抗虫棉抗害虫的遗传信息传递过程可以表示为 .5该科技成果在环保上的重要作用是 .72 .世界上成功构建的第一个体外重组DN册子是在年完成的.73 .质粒载体能够克隆大小的DNA片段,噬菌体能够克隆大小的DNA 段.74 .外源基因在动物的血液中表达,从而可以在动物血液里直接提取外源基因的产物,这种基因产品的生产方式叫.75 .用琼脂糖凝胶电泳时,DNA片段越大,离点样孔越,而DNA段越小,离点样孔越.76 .用化学降解法进行 DNA测序时,必须具有个反响系统,用酶促合成法法进行DNA测序时,必须

18、具有个反响系统.77 .电转化的原理是在受体细胞上施加短暂的高压电流脉冲后,结果在细胞膜上形成许多,从而使容易进入到受体细胞内.78 .入噬菌体根据接受外源 DNA的方式不同,可以分为和两种类型载体.79 .互为同裂酶的两种限制性核酸内切酶来源,产生的粘性末端.80 .酵母双杂交系统通常含有两个载体,一个载体含有酵母转录因子 6人14的,另一个载体必须含有 GAL4的.81 .目前抗虫转基因植物常常用到的外源基因主要是,从而到达杀死害虫的目的.82 .在转基因植物中,常用的显色或发光标记的报告基因有,等83 .感受态细胞是指84 . PCR反响体系含有 , , , .85 . PCR反响的根本

19、过程为 ,86 .引物与模板的退火温度一般为 ,延伸温度一般为 87 . PCR1环次数一般设定为 ,过多的循环次数会导致 的出现.88 . , , 可用于LCR产物的检测.89 .引物3 '端最正确碱基选择是 和.90 . PCR的标本处理的根本要求是 91 . PCR的反响体系一般选用 .92 . PCR反响的缓冲液提供了 PCR反响 与 常用的为93 . PCR的反响体系中,Mg2+的浓度一般保持在 ,常用的是94 . TaqDNA聚合酶具有 ,缺乏 因此无.95 .在变性过程中,为预防反响液的蒸发,可在反响管中参加96 . PCR反响时应设立以下实验对照： ,.97 .定量PC

20、W、须设立98 .启动子Promotor是指.通常一个Gene是否表达,是关键的一步,是起决定作用的.在转录过程中,Promoter还是的结合位点.99 .外源蛋白在大肠杆菌中的表达部位一一、一一、一一.100 .克隆基因表达载体的主要构成元件一一、一一、一一.101 .高等哺乳动物受体细胞的条件是一一、一一、一一、一一、一一.102 .基因工程诞生于年.103 .基因工程中外源 DNA与载体DN册子所形成的杂合分子叫.104 .外源基因在人体表达,使人体能克服某一缺陷或疾病,这种基因工程技术叫 .105 .将抗性基因转入农作物中,使之具有某种抗病水平,得到的农作物叫.106 .用载体制作转基

21、因植物时,最常用的载体是质粒.107 .粘粒载体能够克隆大小的DN/#段,人工酵母染色体 YAQt归够克隆大小的DNA段.108 .DNA自动测序标记的是,常规 Sanger双脱氧链终止法标记的是109 .显微注射技术一般是在显微镜下将目的DNA分子注射进入动物受精卵的中,从而产生转基因动物.110 .基因工程构建基因重组体是指将与的进行连接重组.111 .用琼脂糖凝胶电泳时,DNA片段越大,离点样孔越,而DNA片段越小,离点样孔越.112 .Northern 杂交的用途主要是用来检测在特定组织的情况. 113.粘粒载体是由和两局部组成的.114 .质粒载体能够克隆大小的DNM段,噬菌体能够克

22、隆大小的DNA片段.115 .重组 DNA导入宿主的一般方法有,和等.答 案 1. 702 . 1分子水平上的操作；2细胞水平上的表达3 .克隆基因的类型；受体的选择；载体的选择4 .限制性酶切图谱5 .属名的第一个字母；种名的前两个字母；株名6 . 1减少酶量；2缩短反响时间；3增大反响体积7 . EcoK; EcoRl8 . GGCC异源同工酶9 .枯草杆菌蛋白酶；15'-3'合成酶的活性；23'-5'外切核酸酶10 .碱性磷酸酶；5'端的磷酸基团11 . Ca2+12 . 5'-3'合成； 3'-5' 外切13 .

23、DNA聚合酶I : 5' 3'外切核酸酶；5' 一 3合成酶14 . S1核酸酶切割；DNA聚合酶补平15 .核酸水解酶 H; RNA16 .质粒DNA病毒DNA质粒和病毒 DNA杂合体17 .复制区：含有复制起点；选择标记：主要是抗性基因；克隆位点：便于外源DNA的插入18 .质粒消除或治愈19 . pMBl; pSCl01 ; pSF2124R质粒20 . 1000kb; 300kb21 .严紧22 . pBR322和 M13; pMBl;转座子23 .它在细菌中能够大量繁殖,这样有利于外源DNA的扩增；对某些噬菌体如 噬菌的遗传结构和功能研究得比拟清楚,其大肠杆菌

24、宿主系统的遗传也研究得比拟详尽24 .没有适宜的限制性内切核酸酶识别位点；选择标记25 .质粒；噬菌体；4526 . 1分子量大,2酶的多切点,3无选择标记27 .复制区；IG区28 . 75%105%29 .螯合Mg2格子,抑制核酸酶的活性30 .中和DNA分子的负电荷,增加 DNA分子间的凝聚力31 . 1合成探针；2合成cDNA 用于PC或应；4进行序列分析32 . T一载体33 .第二链合成时形成的发夹环34 .乙醇使DNA分子脱水35 . 1保持正确的可读框2能够使其转录的启动子 3具有译的起始和终止信号36 .接受外源DNA的生理状态37 . 1黏性末端连接；2平末端连接；3同聚物

25、接尾连接；4接头连接法38 .基因组DNA克隆；基因组DNA文库39 . cDNA隆；cDNAC库40 .聚合酶链式反响PCR41 . 0 C; 42 C42 . 1遗传学方法；2物理筛选法；3核酸杂交法；4表达产物分析法43 .插入外源片段的种类较多,大小又极为相似的重组体的筛选44 .基因组 DNA cDNA45 . Klenow酶填补的方法；T4DN咪合酶46 . 1用M13噬菌体载体合成单链 DNA针；2从mRN阪转录合成单链cDNA探针；3 用不对称PC*成单链DNA探针47 .外源基因是否进行了转录48 .两种不同的细胞群体能够表达不同的基因,即在一个群体中能够表达一些基因,而 在

26、另一个细胞群体中不能表达这些基因49 . Northern 印迹50 . Southern E?迹51 . 5'3'合成酶；3'5'外切核酸酶52 . (1)克隆的是完整的基因；(2)使用的是表达载体；(3)不含内含子53 . (1)印迹的对象不同：Northern 是RNA Southern是DNA (2)电泳条件不同,前者是变性条件,后者是非变性条件54 . (1)抗体能够被吸附到固体支持物上；(2)同一个抗原可以同几种抗体结合；(3)抗体能够被标记55 .互补单链重新配对恢复成双链；同源单链重新配对恢复成双链.56 .23; 4557 .单个细胞中所含有的

27、质粒DNA分子数目；严谨型；松弛型；严谨型；松弛型58 .基因转录过程中限制起始的部位；转录起始；RNA聚合酶59 . SC DNA>L DNA>OC DNA60 .简单的插入或缺失；单个碱基的置换；系统的缺失、插入或成串碱基的置换61 .在碱性条彳下,DNA变性,在高盐条件下,只有超螺旋构象的质粒DNA复性.62 .简单的插入或缺失；单个碱基的置换；系统的缺失、插入或成串碱基的置换63 .获得目的基因片断；功能克隆；表型克隆；定位克隆64 .变性；复性；延伸65 . (1)乙烯(2)限制性内切酶DNA连接酶运载体(3)目的性强育种周期短克服远缘杂交的障碍66 . (1)限制性内切酶微生物一种限制酶只能识别一种特定的核甘酸序列,并在特定的位点切割(2)限制性内切酶DNA 分别与运载体结合运载体 复制带有目的基因的DNA片断(3)提取目的基因测与表达67. (1)干扰素基因(2)出芽生殖目的基因与载体结合合成干扰素干扰素将目的基因导入受体细胞目的基因的检(3)都是脱氧核甘酸组成的,都具有双螺旋结构(4)干扰素相同的 相同的68 .平安性问题 生态环境影响问题公众接受性问题 社会伦理道德问题69 . (1)鸟枪法(或散弹射击法)目的基因(2) DNA1接干扰素基因(3)出芽70 . (1)蛋白质