人工牛黄检验操作规程

1、人工牛黄检验操作规程、范围：本标准规定了人工牛黄的检测方法和操作要求；适用于本公司人工牛黄的质量检测、引用标准：中国药典 2000年版一部附录，卫生部标准 WS132 Z-122-98、质量标准：指标名称法定标准性状本品应为黄色疏松的粉末鉴别1 、 2 、 3 、 4应呈正反响检查水分 13.0%胆红素 0.63%四、试剂：1、冰醋酸AR2、糠醛AR3、硫酸AR4、氯仿AR五、仪器和用具1、紫外分光光度计2、恒温枯燥箱六、对照品1、胆酸对照品2、猪去氧胆酸对照品3、贝斯来对照品4、胆红素对照品七、操作步骤1 性状 本品为黄色疏松的粉末；味苦；微甘。2、鉴别2.1 取本品适量，分为二份，置点滴板

2、上，一份加硫酸，数分钟后显污绿色；另一份加 硝 酸，显红色。2.2 取本品约 100mg 量瓶中，加甲醇，超志处理使充分提取后用甲醇稀释至刻度，静置使澄清，取上清液作为供试品溶液。另取胆酸、猪去氧胆酸对照品，分别加甲醇制成每1ml含 1mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法 2000 版中国药典一部附录 VIB 试验，吸 收 上述供试品溶液4ul，对照品溶液2ul，分别点于同一硅胶 G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-乙醇冰 421:1 为展开剂展开，取出，于 105C 烘约 5 分钟，供试品色谱中，在与对照 品色谱相应的 位置上，显相同的斑点。2. 3 取本品加甲醇制成 1ml2、4 取本品充

3、 100mg3、检查3.1水分 不得过5.0% 2000版中国药典一部附录IXH-法页。3.2 猪去氧胆酸：对照品溶液的配制 精密称取猪去氧胆酸对照品适量，用甲醇制成每1ml含1mg的溶液。供试品的溶液配制 精密称取供试品 100mg 用适量甲醇转移至 10ml 量瓶中，并稀释至 刻 度，密塞、振摇，使样品中猪去氧胆酸溶解，放置，制成每1ml含10mg的溶液，取上清 液作为供试品溶液。检查法 照薄层色谱法2000年版中国药典一部附录 VIB试验，精密量取供试品溶液 4ul 及对照品溶液2ul，交叉点于同一硅胶 G薄层板上，以异辛烷-正丁醚-冰醋酸8:5:5为展开 剂，展开，取出晾干，喷以 10

4、%磷钼酸的乙醇溶液，于105C烘约5分钟，猪去氧胆 酸斑点的颜 色应深于对照品色谱。4、含量测定：4.1 胆酸标准溶液的制备取在105C枯燥至恒重的胆酸对照品12.5mg,精密称定，置25ml量瓶中，加 60%冰醋酸溶液使溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得每1ml 含胆酸 0.5mg。标准曲线的绘制 精密量取标准溶液0.2、0.4、0.6、0.8与1.0ml，分别置于带塞试管 中，均 用60%冰醋酸溶液稀释成1.0ml，加新配制的糠醛水溶液1 100 各1.0ml，在冰浴 中放置5分钟，加硫酸溶液以硫酸50ml蒸馏水65ml混合制成13ml，混匀，在70C水浴 中加热10分 钟，迅速移至冰浴中，放

5、置2分钟，以相应的试剂为空白，照分光光度法2000年版中国药典一 部附录V在605nm的波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。测定法 取本品约1.0g，精密称定，力口 60%冰醋酸溶液数ml,充分研磨，移入50ml量 瓶中， 残渣再加60%冰醋溶液，研磨后，全部移入量瓶中，再用60%冰醋溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密吸取续滤液各1ml，分别置于甲、乙两个带塞试管中，于甲管中加新配制的糠醛水溶液Iml，乙管中加水1ml作空白，按标准曲线的绘制项下的方法自：“在冰浴放置5分钟起，依法测定吸收度。标准曲线计算含量，即得。计算公式:MV 100%含量 % =Ms

6、X 1-水份式中：M从标准曲线中查得每1ml从试品含胆酸的mg数;V:供试品总体积数；Ms :供试品量mg4.2胆红素对照品溶液的制备 取胆红素对照品约10.0g，精密称定，置100ml棕色量瓶中，加氯 仿80ml使溶解，超声处理，使充分溶解，加氯仿稀释至刻度，作为对照储藏液 0.1mol/L 。精密 吸取标准储藏液10.0ml，置50ml棕色量瓶中，加氯仿稀释至刻度，即为标准溶液20ug/ml。标准曲线的绘制精密吸取胆红素对照液4.0、5.0、6.0、7.0与8.0ml分别置于25ml棕色量453nm处测定吸收度。以吸收度为纵座标，浓度为横座标，绘制标准曲线。测定法 取本品约0.08g,精密称定，置100ml棕色量瓶中，加氯仿80ml，超声处理使充分溶解，取出，加氯仿稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液在收 453nm测定吸度，按标准曲线计算含量，即得本品中胆红素 G3H36N4Q的百分含量。本品含胆红素 G3HN1Q 不得少于 0.63%计算公式 :MV 100%含量 % = Ms式中