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文档简介

1、实验方案设计范文实验指的是科学研究的基本方法之一根据科学研究的目的尽可能地排除外界的影响突出主要因素并利用一些专门的仪器设备而人为地变革、控制或模拟研究对象以下关于实验方案设计是小编为各位读者们整理收集的希望能给大家一个参考欢迎阅读与借鉴一、实验名称:临时装片、切片、涂片的制作、观察和指导二、实验目标:让学生通过独立自主的制作临时装片、切片、涂片的方法来感知细胞的形态和结构从而使学生对细胞达到一定的认识为以后的教学作下铺垫制作临时装片的成功对提高学生的生物学兴趣和生物科学素养都起着重要的作用同时这样锻炼了学生的动手能力也培养了学生的自己动脑思考的能力三、实验方法及步骤:(一)实验材料:显微镜、

2、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、吸水纸、解剖针、毛笔、滴管、擦镜纸;清水、碘酒溶液;西红柿、空心莲子草、洋葱;创可贴(切片时可能会有人受伤)(二)实验步骤:1 、临时装片的制作准备擦用擦镜纸把载玻片和盖玻片擦拭干净改进:将洁净的纱布改为擦镜纸擦拭玻片时要注意用左手的拇指和食指夹住玻片的两端右手的拇指和食指衬垫上洁净的纱布后夹在玻片两面同时擦拭以防将玻片损坏滴用滴管在载玻片中央滴12 滴清水改进:在制片时至少滴 2 滴清水这样加盖玻片时盖玻片下的空间中水较充盈气泡就少细胞的活性也较好取用刀片在洋葱表面上划“井”字(大约 .5cm2)用镊子撕取外表皮问题:由于叶表皮皱缩、学生不熟练等导致撕下的表皮薄膜

3、过厚在显微镜视野中难以找到理想的观察对象致使实验效果较差改进:首先将洋葱鳞片叶切成宽的纵向窄条再用刀片将洋葱鳞片叶内侧表皮划成小块( 切忌划透 ) 然后用镊子夹住所划表皮的边缘将其轻轻取下( 洋葱鳞片叶内侧表皮易与叶肉分离操作简便)即可这一改进降低了实验操作难度提高了制片质量放把撕取的表皮浸入载玻片上的水滴中并展平盖盖玻片盖用镊子夹起盖玻片使它的一边先接触载玻片上的水滴然后缓缓地放下盖在要观察的材料上染色染:将玻片倾斜 1 度左右从高的一侧滴入碘液让其自己流入玻片问题:染色时书中要求是把 12 滴碘液滴在盖玻片的一侧然后用吸水纸从盖玻片的另一侧吸引使染液浸润标本的全部然而部分同学可能将盖玻片下

4、所有水全部吸干做出的装片会有很多的大气泡且气泡将细胞掩盖了或者有人将气泡误认为细胞改进:染色时不用吸水纸吸水而是将玻片倾斜 1 度左右这个角度一定不能太大太大水就会流出盖玻片下的小空间然后从较高一侧的盖玻片与载玻片的缝隙往里滴碘液让碘液自己流进盖玻片下如果有液体流到盖玻片外用吸水纸擦拭但一定要强调不能从盖玻片边缘吸水盖玻片周围一定要有充盈的液体这样才不会出现大气泡镜检用显微镜观察2 、临时切片的制作选材选择软硬适度的材料先截成适当长度一般以 23mm为宜(便于手持即可)材料太软可用马铃薯块茎、 胡萝卜根或肥皂将欲切取的材料夹住一起进行切片本实验用空心莲子草可直接用于切片切片用三只手指夹住空心莲

5、子草(使其高于手指右手持刀片(刀片用水润湿)将空心莲子草削去一层形成平面刀口向内与断面平行以均匀的动作自左前方向右后方快速拉刀滑行切片 (注意要整个臂部用力而不要腕部用力)镜检如此连续动作切下一些薄片然后用毛笔将最薄的几片材料移至滴有一滴清水的洁净的载玻片中央盖上盖玻片用显微镜观察3 、临时涂片的制作把成熟的番茄果肉放在培养皿内让汁液流出( 汁液中有均匀的离散细胞 ) 吸取汁液滴在洁净的载玻片上将涂抹的液滴滴于载玻片的中央或偏右约14 处左手持载玻片或放在平台上右手持另一载玻片作推片先慢慢向右移动让短边接触溶液两载玻片的夹角约为345 度再向左迅速推载玻片即可涂成一均匀的薄片(也可用解剖针、牙

6、签、火柴杆等涂成薄片盖上盖玻片即可)四、预期结果:1 、成功观察到了洋葱表皮细胞、 西红柿果肉细胞及空心莲子草茎的结构2 、通过使用显微镜对细胞的观察同学们对显微镜的使用有进一步的了解和认识3 、通过学生们对临时装片、切片、涂片独立自主的制作使得大家基本掌握制作临时装片、切片、涂片的方法4 、通过对细胞结构的观察使同学们对于细胞的形态和结构有更进一步的了解五、指导方法与指导流程:讲解实验中涉及到的知识点 ( 植物细胞的结构徒手切片的方法临时装片、切片、涂片的制作方法显微镜的使用方法 )演示实验强调实验注意事项让学生自己实验(教师进行巡回指导及时发现和纠正学生中的问题做到重点深入个别指导与普遍照

7、顾相结合)实验总结(1、对比洋葱表皮细胞与西红柿果肉细胞的差别; 2、由同学们提出发现的问题号召所有的人一起讨论解决问题)一实验目的1 、学习从土壤中分离、纯化微生物的原理与方法2 、学习、掌握微生物的鉴定方法3 、对提取的土样进行微生物的分离、 纯化培养并进行简单的形态鉴定4 、对简单鉴定后的微生物进行生理生化鉴定并由鉴定结果查伯杰氏手册以确定分离出微生物的品种二. 实验原理淀粉酶是一种液化型淀粉酶它的产生菌芽孢杆菌广泛分布于自然界尤其是在含有淀粉类物质的土壤等样品中从自然界筛选菌种的具体做法大致可以分成以下四个步骤:采样、增殖培养、纯种分离和性能测定1 、采样:即采集含菌的样品采集含菌样品

8、前应调查研究一下自己打算筛选的微生物在些地方分布最多然后才可着手做各项具体工作在土壤中几乎各种微生物都可以找到因而土壤可说是微生物的大本营在土壤中数量最多的当推细菌其次是放线菌第三霉菌酵母菌最少除土壤以外其他各类物体上都有相应的占优势生长的微生物例如枯枝、 烂叶、腐土和朽木中纤维素分解菌较多厨房土壤、 面粉加工厂和菜园土壤中淀粉的分解菌较多果实、蜜饯表面酵母菌较多;蔬菜牛奶中乳酸菌较多油田、炼油厂附近的土壤中石油分解菌较多等2 、增殖培养(又称丰富培养)增殖培养就是在所采集的土壤等含菌样品中加入某些物质并创造一些有利于待分离微生物生长的其他条件使能分解利用这类物质的微生物大量繁殖从而便于我们从

9、其中分离到这类微生物因此增殖培养事实上是选择性培养基的一种实际应用3 、纯种分离在生产实践中一般都应用纯种微生物进行生产通过上述的增殖培养只能说我们要分离的微生物从数量上的劣势转变为优势从而提高了筛选的效率但是要得到纯种微生物就必须进行纯种分离纯种分离的方法很多主要有:平板划线分离法、稀释分离法、单孢子或单细胞分离法、菌丝尖端切割法等三实验材料1 、器材:小铁铲和无菌纸或袋、培养皿、载玻片、盖玻片、普通光学显微镜、量筒、滴管、吸水纸、无菌水试管(每支 4.5mL 水)、烧杯、三角瓶、电炉、玻璃棒、接种环、镊子、搪瓷杯、恒温培养箱、高温灭菌锅、移液枪(枪头)、天平、滤纸、 pH试纸等 2、试剂:

10、配制牛肉膏蛋白胨培养基的原料(牛肉膏、NaCl、琼脂、蛋白胨)、 Lugol 氏碘液、 .2%可溶性淀粉液、结晶紫染液、番红染液、碘液、 95乙醇、 .5 番红水染液、无菌水等3、土样:取自桂林师专 1 栋宿舍楼后面土壤地下1cm左右四实验方法步骤1 、采集土样带上小铁铲和无菌袋到土豆地采集较细碎土壤2 、样品稀释在无菌纸上称取样品 1g 放入 1mL无菌水的三角瓶中手摇 1 分钟使土和水充分混合用 1mL无菌吸管吸取 .5mL 注入 4.5mL无菌水试管中梯度稀释至13 、分离用稀释样品的同支吸管分别依次从 1、1、1 样品稀释液中吸取 lmL 注入无菌培养皿中然后倒入灭菌并融化冷至5左右的

11、固体培养基小心摇动冷凝后倒置于37温箱中培养 48 小时培养基的配制称取蛋白胨1.g ;NaCl.5g ;牛肉膏 .3g ;琼脂 1.5g ;pH6.4 左右;1ml 水定容4 、初步鉴定对多种菌进行形态特征的观察、简单染色、革兰氏染色以及芽孢染色观察记录结果5 、淀粉酶鉴定6 、1) 实验原理:细菌能否产生 淀粉酶主要依据是鉴定有能否分解淀粉淀粉酶该酶可以把淀粉分解因淀粉遇碘变蓝色如菌落周围有无色圈说明该菌能分解淀粉2) 步骤:将培养的的各种待测菌种接种在含有.2%淀粉液的牛肉膏蛋白胨培养基中培养基的配制称取蛋白胨1.g ;NaCl.5g ;牛肉膏 .3g ;可溶性淀粉 .2g ;琼脂 1.

12、5g ;pH6.4 左右; 1ml 水定容(注:先将可溶性淀粉加少量蒸馏水调成糊状再加到溶化好的培养基中调匀)倒置于 37温箱中培养 1824 小时后取出平板向皿中注入l 滴 Lugol 氏碘液因淀粉遇碘变蓝色如菌落周围有无色圈说明该菌能分解淀粉8 、纯化从平板上选取淀粉水解圈直径与菌落直径之比较大的菌落用接种环沾取少量培养物至斜面上并进行 23 次划线分离挑取单菌落至斜面上培养后观察菌苔生长情况并镜检验证为纯培养四实验结果五个人总结1 、在分离实验中原土样的 13g/mL 浓度中得到 5 种不同的能够分解淀粉的菌落经初步淀粉酶实验 1 号菌的淀粉分解圈大 2 号、3 号、4 号次之 5 号最小2 、在淀粉酶试验中 3 号培养基感染杂菌出现不同菌落故后面不再对其处理;其它菌种均得到较纯的单菌落淀粉酶实验结果不变与上面相同3 、各种菌落的革兰氏染色中大部分为阳性菌体形态多为椭圆形趋于杆状只有 4 号菌为

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