高中生物选修一2017-2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(29ppt)

1、本课时栏目本课时栏目开关开关第第6 6课时课时 知识知识储备区储备区第第6 6课时课时 人为改变人为改变 自变量自变量 可变可变 影响影响 碱碱 碳源、氮源、水、无机碳源、氮源、水、无机 盐、生长因子盐、生长因子 本课时栏目本课时栏目开关开关知识知识储备区储备区第第6 6课时课时 本课时栏目本课时栏目开关开关第第6 6课时课时 学习学习探究区探究区目的菌株目的菌株 pH 抑制抑制 阻止阻止 DNA聚合酶聚合酶 Taq 热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物 特定特定 抑制抑制 阻止阻止 本课时栏目本课时栏目开关开关第第6 6课时课时 学习学习探究区探究区KH2PO

2、41.4 gNa2HPO42.1 gMgSO47H2O0.2 g葡萄糖葡萄糖10.0 g尿素尿素1.0 g琼脂琼脂15.0 g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL葡萄糖葡萄糖 尿素尿素 凝固剂凝固剂 脲酶脲酶 只有能够以分泌脲酶从而以尿素作为氮源的微生只有能够以分泌脲酶从而以尿素作为氮源的微生物才能在该培养基上生长物才能在该培养基上生长 本课时栏目本课时栏目开关开关第第6 6课时课时 学习学习探究区探究区稀释涂布平板法稀释涂布平板法 一个活菌一个活菌 菌落数菌落数 30300 (平均菌落数平均菌落数涂布的稀释液体积涂布的稀释液体积)稀释倍数稀释倍数

3、本课时栏目本课时栏目开关开关第第6 6课时课时 学习学习探究区探究区稀释度稀释度 二二 第一第一 位同学需设置重复实验组；第二位同学统计的三个菌落数位同学需设置重复实验组；第二位同学统计的三个菌落数相差太大，说明操作有误，需重新实验相差太大，说明操作有误，需重新实验 当两个或当两个或 多个细胞在一起时，平板上观察到的只是一个菌落多个细胞在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 菌落数菌落数 显微镜直接计数显微镜直接计数 本课时栏目本课时栏目开关开关第第6 6课时课时 学习学习探究区探究区本课时栏目本课时栏目开关开关第第6 6课时课时 学习学习探究区探究区非测试非测试 可信度可信度 被测试被测试 相

4、同相同 对照对照 实验实验 本课时栏目本课时栏目开关开关第第6 6课时课时 学习学习探究区探究区本课时栏目本课时栏目开关开关第第6 6课时课时 学习学习探究区探究区C 本课时栏目本课时栏目开关开关第第6 6课时课时 学习学习探究区探究区D 本课时栏目本课时栏目开关开关第第6 6课时课时 学习学习探究区探究区本课时栏目本课时栏目开关开关第第6 6课时课时 学习学习探究区探究区步骤步骤实验操作实验操作操作提示操作提示土壤土壤取样取样从酸碱度接近从酸碱度接近 的的 .土壤中取样。先铲去表层土土壤中取样。先铲去表层土 .左右左右,再取样再取样,将样品装入事先将样品装入事先准备好的信封中准备好的信封中取

5、样用的小铁铲和盛土样的取样用的小铁铲和盛土样的信封都要经过灭菌信封都要经过灭菌制备制备培养培养基基分别配制牛肉膏蛋白胨培养基和分别配制牛肉膏蛋白胨培养基和 为唯一氮源的为唯一氮源的 培养基培养基牛肉膏蛋白胨培养基可以作牛肉膏蛋白胨培养基可以作为为 ,用来判断选择培用来判断选择培养基是否起到了养基是否起到了 .样品样品的稀的稀释和释和涂布涂布称取称取 g土样加到盛有土样加到盛有 mL无菌水的锥形瓶中无菌水的锥形瓶中,充分摇匀；充分摇匀；吸取上清液吸取上清液 mL，转移至盛，转移至盛有有 mL的生理盐水的无菌大试的生理盐水的无菌大试管中管中,按照上图流程进行样品的稀释按照上图流程进行样品的稀释;

6、按照由按照由107103稀释度的顺序分稀释度的顺序分别吸取别吸取 mL进行进行 操作。操作。按照浓度从按照浓度从 到到 的顺序涂布平的顺序涂布平板，不必更换移液管板，不必更换移液管应在应在 旁称取土样旁称取土样;由于初次实验由于初次实验,对于稀释的对于稀释的范围没有把握范围没有把握,因此选择了一因此选择了一个较为宽泛的范围个较为宽泛的范围 ;实验时要对所用的平板、实验时要对所用的平板、试管作好试管作好 。如培养。如培养皿要注明培养基类型、培养皿要注明培养基类型、培养时间、时间、 、培养物等、培养物等中性中性 潮湿潮湿 3 cm 尿素尿素 选择选择 对照对照 选择作用选择作用 10 90 1 9

7、 0.1 平板涂布平板涂布 火焰火焰 103107 标记标记 稀释度稀释度 低低高高本课时栏目本课时栏目开关开关第第6 6课时课时 学习学习探究区探究区培培养养将涂布好的培养皿放在将涂布好的培养皿放在 温度下培养。随着培养时间的延温度下培养。随着培养时间的延长长,会有不同的菌落产生。比较牛会有不同的菌落产生。比较牛肉膏蛋白胨培养基和选择培基中肉膏蛋白胨培养基和选择培基中菌落的数量、形态等菌落的数量、形态等,并做好记录并做好记录在牛肉膏蛋白胨培养基上在牛肉膏蛋白胨培养基上生生长的菌落数目应明显长的菌落数目应明显 .选择培养基上的数目选择培养基上的数目,才说才说明选择培养基有选择作用明选择培养基有

8、选择作用计计数数当菌落数目当菌落数目 时时,选取菌落数选取菌落数在在 的平板进行计数的平板进行计数。在在同一稀释度下同一稀释度下,至少对至少对 个平板个平板进行重复计数进行重复计数,然后求出然后求出 ,并根据平板所对应的稀释度计算并根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目出样品中细菌的数目如果得到了如果得到了 .菌落数目符合要求的平板菌落数目符合要求的平板,则说明稀释操作比较成功则说明稀释操作比较成功;如果学生选取的是同一如果学生选取的是同一种土样种土样,结果相差太远结果相差太远,教师教师需要引导学生一起分析产需要引导学生一起分析产生差异的原因生差异的原因3037 多于多于 稳定稳定 30

9、300 3 平均值平均值 2个或个或2个以上个以上 本课时栏目本课时栏目开关开关第第6 6课时课时 学习学习探究区探究区本课时栏目本课时栏目开关开关第第6 6课时课时 学习学习探究区探究区酚红酚红脲脲 氨氨 红红 本课时栏目本课时栏目开关开关第第6 6课时课时 学习学习探究区探究区本课时栏目本课时栏目开关开关第第6 6课时课时 学习学习探究区探究区本课时栏目本课时栏目开关开关第第6 6课时课时 学习学习探究区探究区本课时栏目本课时栏目开关开关第第6 6课时课时 学习学习探究区探究区D 本课时栏目本课时栏目开关开关第第6 6课时课时 学习学习探究区探究区目的菌株目的菌株稀释涂布平板法稀释涂布平板法显微镜直接计数法显微镜直接计数法本课时栏目本课时栏目开关开关第第6 6课时课时 自我自我检测区检测区A 本课时栏目本课时栏目开关开关第第6 6课时课时 自我自我检测区检测区A 本课时栏目本课时栏目开关开关第第6 6课时课时 自我自我检测区检测区C 本课时栏