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文档简介
1、第二篇病原微生物学第二篇病原微生物学第十章第十章细菌的形态与结构细菌的形态与结构第一节第一节 细菌的大小与形态细菌的大小与形态一、细菌的大小一、细菌的大小二、细菌的形态二、细菌的形态第二节第二节 细菌的结构细菌的结构一、细菌的基本结构一、细菌的基本结构二、细菌的特殊结构二、细菌的特殊结构三、细菌的三、细菌的L型型第三节第三节 细菌的形态检查法细菌的形态检查法教学内容教学内容教学目标教学目标 1、熟悉细菌的形态与大小、熟悉细菌的形态与大小 2、掌握细菌各种结构名称、化学成分、功能、掌握细菌各种结构名称、化学成分、功能 3、熟悉革兰染色法的原理、步骤、意义、熟悉革兰染色法的原理、步骤、意义 细菌:
2、一类具有细胞壁的单细胞原核细胞型微生物。细菌:一类具有细胞壁的单细胞原核细胞型微生物。 第一节细菌大小与形态第一节细菌大小与形态 一、大小一、大小 测量:微米(测量:微米(m) 1m = 1/1000mm。 多数球菌的直径为多数球菌的直径为1.0 m 中等大小的杆菌长中等大小的杆菌长2.0-3.0 m,宽,宽0.3-0.5 m 二、形态二、形态 基本形态:球形、杆形、螺旋形基本形态:球形、杆形、螺旋形球菌、杆菌、螺形球菌、杆菌、螺形菌菌 一)球菌双球菌双球菌 (一)球菌:呈球形或近似球形。(一)球菌:呈球形或近似球形。 分类:分类:1、双球菌双球菌:在一个平面上分裂后两个菌:在一个平面上分裂后
3、两个菌体成双排列,如脑膜炎奈瑟菌体成双排列,如脑膜炎奈瑟菌 2、链球菌链球菌:在一个平面上分裂后多个菌体:在一个平面上分裂后多个菌体粘连呈链状。溶血性链球菌粘连呈链状。溶血性链球菌 3、葡萄球菌葡萄球菌:在多个平面上分裂,分裂后:在多个平面上分裂,分裂后菌体粘附在一起呈葡萄串状,如金黄色葡萄球菌菌体粘附在一起呈葡萄串状,如金黄色葡萄球菌 四联球菌四联球菌:在两个相互垂直的平面上分裂四个菌:在两个相互垂直的平面上分裂四个菌体排列成正方形。体排列成正方形。 八叠球菌八叠球菌:在三个相互垂直平面上分裂成八个菌体在三个相互垂直平面上分裂成八个菌体排列在一起。排列在一起。 双球菌双球菌 链球菌链球菌 葡
4、萄球菌葡萄球菌 (二)杆菌:呈杆状。大小、长短、粗细(二)杆菌:呈杆状。大小、长短、粗细差异较大。差异较大。 依大小分:大杆菌:(如炭疽芽胞杆菌)依大小分:大杆菌:(如炭疽芽胞杆菌)长长3-10 m,宽宽1.0-1.5 m. 中等大小杆菌中等大小杆菌:(大肠杆菌):(大肠杆菌)长长2-3 m,宽宽0.5-0.7 m. 小杆菌:(布鲁菌)长小杆菌:(布鲁菌)长0.6-1.5 m,宽宽0.5-0.7 m. 依形态分:依形态分: 1、棒状杆菌棒状杆菌:末端膨大呈棒状:末端膨大呈棒状 -白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌 2、球杆菌:菌体很短,近于椭圆形、球杆菌:菌体很短,近于椭圆形 -克雷伯菌属克雷伯菌属 3
5、、分枝杆菌:菌体呈分枝生长趋势、分枝杆菌:菌体呈分枝生长趋势 多数杆菌分散存在,有的呈链状排列称为多数杆菌分散存在,有的呈链状排列称为链杆菌。链杆菌。 杆菌菌体两端多呈钝圆形,少数两端平齐杆菌菌体两端多呈钝圆形,少数两端平齐(炭疽)或两端尖细(梭杆菌)(炭疽)或两端尖细(梭杆菌) 球杆菌、链杆菌球杆菌、链杆菌 (三)螺形菌:菌体弯曲,分:(三)螺形菌:菌体弯曲,分: 1、弧菌:菌体长、弧菌:菌体长2-3 m,只有一个弯曲,只有一个弯曲,呈弧形或逗点状,如霍乱弧菌呈弧形或逗点状,如霍乱弧菌 2、螺菌:菌体较长,、螺菌:菌体较长,3-6 m,有数个弯曲,有数个弯曲,较僵硬,如鼠咬热螺菌较僵硬,如鼠
6、咬热螺菌螺形菌弧菌弧菌只有一个弯曲只有一个弯曲螺菌螺菌有若干个弯曲有若干个弯曲弧弧 菌菌螺螺 菌菌 细菌的形态易受温度、细菌的形态易受温度、p、培养基成、培养基成分和培养时间等环境因素影响,仅在适分和培养时间等环境因素影响,仅在适宜的条件下培养宜的条件下培养8-18小时才呈现典型的小时才呈现典型的形态。形态。第二节细菌的结构第二节细菌的结构 基本基本结构结构:所有细菌所有细菌都有都有的结构,如细胞的结构,如细胞壁、细胞膜、细胞质、核质、核糖体、质壁、细胞膜、细胞质、核质、核糖体、质粒等。粒等。 特殊特殊结构:仅结构:仅某些某些细菌具有,如荚膜、细菌具有,如荚膜、鞭毛、菌毛、芽胞等。鞭毛、菌毛、
7、芽胞等。细菌结构模式图细菌结构模式图 (一)细胞壁:细胞膜外的一层坚韧膜状结构,(一)细胞壁:细胞膜外的一层坚韧膜状结构,平均平均15-30nm,占菌体干重的占菌体干重的10-25%。 1、功能、功能 (1)维持细菌固有形态,保护细菌抵抗低渗维持细菌固有形态,保护细菌抵抗低渗外环境。(外环境。(5-25个大气压)个大气压) (2)与细胞膜共同参与菌体内外物质交换。)与细胞膜共同参与菌体内外物质交换。 (3)决定了菌体的抗原性决定了菌体的抗原性。 细胞细胞壁携带多种决定细菌抗原性的抗原决定簇。(壁携带多种决定细菌抗原性的抗原决定簇。(磷壁酸磷壁酸、脂脂多糖多糖等)等) (4)与细菌致病有关:)与
8、细菌致病有关:G-细胞壁上的脂多糖具有内细胞壁上的脂多糖具有内毒素作用。毒素作用。一、细菌的基本结构一、细菌的基本结构细细胞胞壁壁的的功功能能(一)细菌的基本结构(一)细菌的基本结构维持菌体固有外形维持菌体固有外形与细胞内外物质交换相关与细胞内外物质交换相关决定了菌体的免疫原性决定了菌体的免疫原性与细菌致病性有关与细菌致病性有关2、主要成分:、主要成分:复杂,革兰阳性菌和革兰阴性复杂,革兰阳性菌和革兰阴性菌细胞壁组成有较大差异。菌细胞壁组成有较大差异。 (1)革兰阳性菌细胞壁:)革兰阳性菌细胞壁: 肽聚糖肽聚糖 聚糖骨架聚糖骨架 四肽侧链四肽侧链 五肽交联桥五肽交联桥 磷壁酸(特有)磷壁酸(特
9、有) 壁磷壁酸壁磷壁酸 膜磷壁酸膜磷壁酸Wall teichoic acid 由肽聚糖和穿插于其内的磷壁酸组成。由肽聚糖和穿插于其内的磷壁酸组成。 肽聚糖(粘肽):原核细胞特有。为共有成分。肽聚糖(粘肽):原核细胞特有。为共有成分。 革兰阳性菌:由三部分组成革兰阳性菌:由三部分组成 聚糖骨架聚糖骨架:-乙酰葡萄糖胺、乙酰葡萄糖胺、-乙酰胞壁酸,经乙酰胞壁酸,经-1、4糖苷键连接而成。糖苷键连接而成。 四肽侧链四肽侧链:金葡菌:连接在聚糖骨架胞壁酸上,:金葡菌:连接在聚糖骨架胞壁酸上,-丙氨酸、丙氨酸、-谷氨酸、谷氨酸、-赖氨酸和赖氨酸和-丙氨酸丙氨酸 五肽交联桥五肽交联桥:5个甘氨酸个甘氨酸
10、四肽侧链的四肽侧链的第第3位位氨基酸通过五肽交联桥连接到相邻氨基酸通过五肽交联桥连接到相邻聚糖骨架四肽侧链聚糖骨架四肽侧链第第4位位氨基酸上,构成坚韧的三维氨基酸上,构成坚韧的三维立体框架结构。达立体框架结构。达15-50层。层。含含量高,占量高,占G+细胞壁细胞壁干重的干重的50%。-1,4糖糖苷键苷键四肽侧链四肽侧链聚糖骨架(聚糖骨架(N-乙酰乙酰胞壁酸与胞壁酸与N-乙酰葡乙酰葡萄糖胺)萄糖胺)五肽交联桥五肽交联桥革兰氏阳性菌细胞壁成分与结构革兰氏阳性菌细胞壁成分与结构共有组分共有组分肽聚糖肽聚糖聚糖骨架聚糖骨架四肽侧链四肽侧链五肽交联桥五肽交联桥三维立体结构,坚固三维立体结构,坚固 15
11、50层层 磷壁酸:革兰阳性菌磷壁酸:革兰阳性菌特有特有。占细胞壁干重的。占细胞壁干重的50%以上。以上。 类型:(按结合部位)分类型:(按结合部位)分 壁磷壁酸壁磷壁酸:一端与细胞壁中肽聚糖的胞壁酸结:一端与细胞壁中肽聚糖的胞壁酸结合,另一端游离于细胞壁外。合,另一端游离于细胞壁外。 膜磷壁酸膜磷壁酸(脂磷壁酸):一端与细胞膜外层磷脂(脂磷壁酸):一端与细胞膜外层磷脂结合,另一端向外穿肽聚脂糖层游离于细胞壁外。结合,另一端向外穿肽聚脂糖层游离于细胞壁外。 功能:粘附宿主细胞,与细菌的致病性有关。功能:粘附宿主细胞,与细菌的致病性有关。 抗原性强,是革兰阳性菌重要的表面抗原。抗原性强,是革兰阳性
12、菌重要的表面抗原。 其他成分:其他成分: 表面蛋白:链球菌的蛋白,金葡菌的蛋白等,表面蛋白:链球菌的蛋白,金葡菌的蛋白等,与致病性和抗原性相关。与致病性和抗原性相关。 (2)革兰阴性菌细胞壁:)革兰阴性菌细胞壁: 由肽聚糖和外膜组成。外膜为革兰阴性菌由肽聚糖和外膜组成。外膜为革兰阴性菌特有成分。特有成分。 肽聚糖肽聚糖 聚糖骨架聚糖骨架 四肽侧链四肽侧链 外膜外膜 脂蛋白脂蛋白 脂质双层脂质双层 脂多糖脂多糖 脂质脂质A 核心多糖核心多糖 特异多糖特异多糖 肽聚糖:含肽聚糖:含1-3层,层,含含量少,占细胞壁干量少,占细胞壁干重的重的10%左右。仅由聚糖骨架和四肽侧链左右。仅由聚糖骨架和四肽侧
13、链两部分组成。如大肠埃希菌:两部分组成。如大肠埃希菌: 四肽侧链:四肽侧链:第第3位位氨基酸为二氨基庚二酸,氨基酸为二氨基庚二酸,直接与相邻四肽侧链直接与相邻四肽侧链第第4位位氨基酸相连,没氨基酸相连,没有五肽交联桥连接,只形成二维单层较疏有五肽交联桥连接,只形成二维单层较疏松的结构。松的结构。N-乙酰胞乙酰胞壁酸壁酸N-乙酰葡乙酰葡萄糖胺萄糖胺共有组分共有组分肽聚糖肽聚糖革兰氏阴性菌细胞壁成分与结构革兰氏阴性菌细胞壁成分与结构聚糖骨架聚糖骨架四肽侧链四肽侧链 二维平面结构,疏松二维平面结构,疏松 12层层 外膜:位于细胞壁肽聚糖层的外侧,包括:外膜:位于细胞壁肽聚糖层的外侧,包括: 脂蛋白脂
14、蛋白:脂质部分与外膜的脂质双层连接,:脂质部分与外膜的脂质双层连接, 蛋白部分连接在肽聚层的四肽侧链上。蛋白部分连接在肽聚层的四肽侧链上。 脂质双层脂质双层:似细胞膜:似细胞膜 脂多糖脂多糖:是内毒素的主要成分。:是内毒素的主要成分。 由三部分组成:由三部分组成: 脂质脂质:内毒素的毒性部分,无种属特异性:内毒素的毒性部分,无种属特异性-不不同细菌产生的内毒素引起的毒性作用均相似。同细菌产生的内毒素引起的毒性作用均相似。 核心多糖核心多糖:位于脂质的外侧,具有属的特异:位于脂质的外侧,具有属的特异性。性。 特异多糖特异多糖:在脂多糖最外层,若干寡糖:在脂多糖最外层,若干寡糖多糖多糖链,是革兰阴
15、性菌的菌体抗原(抗原),具有链,是革兰阴性菌的菌体抗原(抗原),具有种特异性。种特异性。脂质核心多糖特异多糖G+ 菌与菌与G- 菌细胞壁的比较菌细胞壁的比较细胞壁细胞壁 革兰阳性菌革兰阳性菌革兰阴性菌革兰阴性菌 强度强度 较坚韧较坚韧 较疏松较疏松 厚度厚度 20-80nm 10-15nm肽聚糖层数肽聚糖层数可多达可多达50层层 1-2层层肽聚糖含量肽聚糖含量50%-80% 5%-10% 磷壁酸磷壁酸 有有 无无 外膜外膜 无无 有有 v革兰阳性菌革兰阳性菌 聚糖骨架、四肽侧链、聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥五肽交联桥 三维立体结构,坚固三维立体结构,坚固 15155050层层v革兰阴性菌革兰
16、阴性菌 聚糖骨架、四肽侧链聚糖骨架、四肽侧链 二维平面结构,疏松二维平面结构,疏松 1 12 2层层共有组分肽聚糖肽聚糖溶菌酶溶菌酶作用位作用位点点青霉素作用青霉素作用位点位点N-乙酰胞乙酰胞壁酸壁酸N-乙酰葡乙酰葡萄糖胺萄糖胺溶菌酶溶菌酶作用位作用位点点青霉素作用青霉素作用位点位点3)临床意义项目项目 革兰阳性菌革兰阳性菌 革兰阴性菌革兰阴性菌 细胞壁的关系细胞壁的关系药物的敏感性药物的敏感性 青霉素的作用青霉素的作用有效有效 无效无效 作用部位为肽聚糖作用部位为肽聚糖 -五肽交联桥五肽交联桥 溶菌酶的作用溶菌酶的作用有效有效 无效无效 作用部位为肽聚糖作用部位为肽聚糖 -聚糖骨架聚糖骨架3
17、)临床意义 (二)细胞膜(二)细胞膜 位置:细胞壁内侧,细胞质外侧的柔软有弹性、位置:细胞壁内侧,细胞质外侧的柔软有弹性、半渗透性的生物膜。半渗透性的生物膜。 结构:脂质双层中镶嵌多种蛋白质。结构:脂质双层中镶嵌多种蛋白质。 不含胆固醇不含胆固醇(与真核细胞的区别)(与真核细胞的区别) 功能:功能:1)选择性渗透和物质转运作用)选择性渗透和物质转运作用 2)生物合成作用:物质合成酶、参与生)生物合成作用:物质合成酶、参与生物合成物合成 3)呼吸作用:有呼吸酶)呼吸作用:有呼吸酶 4)形成)形成中介质中介质:细胞膜向细胞质内陷折:细胞膜向细胞质内陷折叠成囊状物。叠成囊状物。 功能:似线粒体。参与
18、细菌呼吸、功能:似线粒体。参与细菌呼吸、生物合生物合成及分裂繁殖、芽胞形成。多见革兰阳性菌成及分裂繁殖、芽胞形成。多见革兰阳性菌。 (三)细胞质(三)细胞质 无色透明胶状物无色透明胶状物 基本成分基本成分:水、蛋白质、脂类、核酸水、蛋白质、脂类、核酸(主要为(主要为RNA)、少量糖和无机盐、多种酶。)、少量糖和无机盐、多种酶。 为新陈代谢的场所为新陈代谢的场所。 胞质中的超微结构主要有:胞质中的超微结构主要有: 1、质粒质粒:染色体外的遗传物质,为环状闭合双链:染色体外的遗传物质,为环状闭合双链DNA分子。分子。 功能:控制细菌某些遗传性状,如菌毛、细菌素、功能:控制细菌某些遗传性状,如菌毛、
19、细菌素、毒素、耐药性的产生等。毒素、耐药性的产生等。 特性:自我复制、传给子代、丢失及在细胞间转移特性:自我复制、传给子代、丢失及在细胞间转移等,与遗传变异有关。等,与遗传变异有关。(一)细菌的基本结构核糖体核糖体质粒质粒胞浆颗粒胞浆颗粒 2、核核蛋白体(蛋白体(核糖体核糖体):游离于细胞质中:游离于细胞质中的微小颗粒。的微小颗粒。 化学成分:化学成分:RNA和蛋白质。和蛋白质。 功能:合成蛋白质的场所。功能:合成蛋白质的场所。 沉降系数为沉降系数为70S,由,由50S和和30S两个亚单位两个亚单位组成。组成。 真核细胞为真核细胞为80S,由,由60S和和40S组成。组成。红霉素链霉素链霉素干
20、扰蛋白质的合成致细菌死亡干扰蛋白质的合成致细菌死亡 3、胞质颗粒:多为储存的营养物质:多糖、胞质颗粒:多为储存的营养物质:多糖、脂类和多磷酸盐等脂类和多磷酸盐等。 异染颗粒:由异染颗粒:由RNA和多偏磷酸盐为主要成分和多偏磷酸盐为主要成分的胞质颗粒,嗜碱性强,用亚甲蓝染色时着的胞质颗粒,嗜碱性强,用亚甲蓝染色时着色较深呈紫色,用特殊染色法可染成与菌体色较深呈紫色,用特殊染色法可染成与菌体颜色不同的颗粒,常见白喉棒状杆菌。颜色不同的颗粒,常见白喉棒状杆菌。 作用:鉴别细菌。作用:鉴别细菌。 (四)核质(四)核质(拟核)拟核) 遗传物质,无核膜、核仁和有丝分裂器。遗传物质,无核膜、核仁和有丝分裂器
21、。 由一条双链环状由一条双链环状DNA反复盘绕卷曲而成。反复盘绕卷曲而成。1-2个,球形、哑铃形。个,球形、哑铃形。 功能:控制细菌的生命活动,是细菌遗传功能:控制细菌的生命活动,是细菌遗传变异的物质基础。变异的物质基础。 二、细菌的特殊结构二、细菌的特殊结构 (一)荚膜(一)荚膜 概念:某些细菌在其细胞壁外包绕一层粘概念:某些细菌在其细胞壁外包绕一层粘液性物质,液性物质,(为疏水性多糖或蛋白质的多聚为疏水性多糖或蛋白质的多聚体,用理化方法去除后并不影响菌细胞的体,用理化方法去除后并不影响菌细胞的生命活动。生命活动。) 有有一般染色法不易着色,在显微镜下看到一般染色法不易着色,在显微镜下看到菌
22、体周围有一层透明圈,用特殊染色法可菌体周围有一层透明圈,用特殊染色法可染成与菌体不同的颜色染成与菌体不同的颜色。 化学组成:多糖、多肽、透明质酸化学组成:多糖、多肽、透明质酸 形成条件:在人或动物体内或营养丰富的培养基形成条件:在人或动物体内或营养丰富的培养基中易形成。中易形成。 染色:不易着色,负染(墨汁)染色:不易着色,负染(墨汁) 功能:功能:1)具有特殊的抗原性:可用于细菌鉴别、)具有特殊的抗原性:可用于细菌鉴别、分型。分型。 2 2)与细菌致病性密切相关:抗吞噬作用,)与细菌致病性密切相关:抗吞噬作用,保护菌体免受或抑制保护菌体免受或抑制溶菌酶、补体、及其他杀菌溶菌酶、补体、及其他杀
23、菌物质的杀伤作用。物质的杀伤作用。 3)荚膜中贮存大量水分,保护细菌免受干)荚膜中贮存大量水分,保护细菌免受干燥,在不良环境中维持菌体代谢。燥,在不良环境中维持菌体代谢。 (二)鞭毛(二)鞭毛 概念:细菌菌体概念:细菌菌体表面表面附有细长并呈波状弯曲的丝附有细长并呈波状弯曲的丝状物。鞭毛长状物。鞭毛长520m,直径,直径1230nm 类型(数量与部位):类型(数量与部位): 单毛菌单毛菌 双毛菌双毛菌 丛毛菌丛毛菌 周毛菌周毛菌 化学组成:蛋白质化学组成:蛋白质 结构:从细胞膜长出,游离于胞外结构:从细胞膜长出,游离于胞外 功能:功能:1)细菌的运动器官)细菌的运动器官 2)致病性有关(有些细
24、菌的鞭毛与细菌)致病性有关(有些细菌的鞭毛与细菌的粘附有关)的粘附有关) 3) 鉴定细菌和进行细菌分类鉴定细菌和进行细菌分类 (根据鞭毛菌的动力和鞭毛的抗原性(根据鞭毛菌的动力和鞭毛的抗原性(H抗抗原)原) (三)菌毛(三)菌毛 概念:概念:大多大多革兰阴性菌和少数革兰阳性菌菌体表面革兰阴性菌和少数革兰阳性菌菌体表面存在着一种比鞭毛更存在着一种比鞭毛更细细、短短而而直硬直硬的丝状物,与细的丝状物,与细菌的运动无关。(电镜下才可见)菌的运动无关。(电镜下才可见) 种类及功能种类及功能: 普通菌毛、性菌毛(普通菌毛、性菌毛(F菌毛)菌毛) 普通菌毛普通菌毛 多,数百根,短而多,数百根,短而直直 粘
25、附,致病粘附,致病性性 性菌毛性菌毛 少,少,1-4根,粗、长、中空根,粗、长、中空 传递遗传物质传递遗传物质 化学成分:蛋白质化学成分:蛋白质F+F-F+F-F+F+F+F+ 雄性菌(雄性菌(F+菌):有性菌毛的细菌。菌):有性菌毛的细菌。 雌性菌(雌性菌(F-菌菌):无性菌毛的细菌。):无性菌毛的细菌。 性菌毛能将性菌毛能将F+菌的某些遗传物质转移给菌的某些遗传物质转移给F-菌,使菌,使F-菌获得菌获得F+菌的某些性状。菌的某些性状。 细菌的耐药性、毒力等性状可通过质粒转细菌的耐药性、毒力等性状可通过质粒转移。移。 (四(四)芽胞芽胞 概念:某些细菌在一定环境条件下,细胞质脱水概念:某些细
26、菌在一定环境条件下,细胞质脱水浓缩,在浓缩,在菌体内菌体内形成的圆形或椭圆形小体。是细形成的圆形或椭圆形小体。是细菌的休眠形式。菌的休眠形式。 形成的细菌:芽胞杆菌属、梭菌属形成的细菌:芽胞杆菌属、梭菌属 形成条件:营养缺乏形成条件:营养缺乏 保存全部生命必需物质:核酸、酶、合成菌体成保存全部生命必需物质:核酸、酶、合成菌体成分的结构分的结构 休眠状态,无新陈代谢休眠状态,无新陈代谢 可发芽:可发芽: 1个细菌个细菌1个芽胞个芽胞1个菌个菌体体 细菌细菌繁殖体繁殖体 芽胞芽胞休眠体休眠体 每种细菌形成一种类型芽胞每种细菌形成一种类型芽胞 功能功能 1)抵抗力强。耐干燥、热、辐射、化学消毒抵抗力
27、强。耐干燥、热、辐射、化学消毒剂剂的作用。的作用。 消毒灭菌是否彻底的标准消毒灭菌是否彻底的标准-最可靠方法为高最可靠方法为高压蒸气灭菌压蒸气灭菌 2)致病性:不直接引起疾病,发芽后形成繁致病性:不直接引起疾病,发芽后形成繁殖体后致病殖体后致病 3)鉴别细菌:根据芽胞位置、鉴别细菌:根据芽胞位置、大小、形状随大小、形状随菌种而异。菌种而异。型细菌:型细菌:细胞壁缺陷型细菌。细胞壁缺陷型细菌。 细胞壁缺陷主要是肽聚糖的缺陷,所以凡能破坏肽细胞壁缺陷主要是肽聚糖的缺陷,所以凡能破坏肽聚糖结构或抑制其合成的物质(抗生素、噬菌体、聚糖结构或抑制其合成的物质(抗生素、噬菌体、溶菌酶等)都能损伤细胞壁而形
28、成溶菌酶等)都能损伤细胞壁而形成L型。型。 原生质体:革兰阳性菌细胞壁主要为肽聚糖,溶菌原生质体:革兰阳性菌细胞壁主要为肽聚糖,溶菌酶可使其失去细胞壁,原生质仅被细胞膜包裹。酶可使其失去细胞壁,原生质仅被细胞膜包裹。 原生质体只能在渗透压与胞浆接近的高渗环境中原生质体只能在渗透压与胞浆接近的高渗环境中存活。存活。 原生质球:革兰阴性菌细胞壁肽聚糖含量少,受损原生质球:革兰阴性菌细胞壁肽聚糖含量少,受损后尚有外膜保护。后尚有外膜保护。 原生质球在高渗与非高渗环境中均能存活。原生质球在高渗与非高渗环境中均能存活。三、细菌的三、细菌的L型型 生物学特性:多形性、革兰阴性、高渗培养、多形性、革兰阴性、
29、高渗培养、 生长缓慢、荷包蛋样菌落、可回复生长缓慢、荷包蛋样菌落、可回复 与医学的关系: 致病性,常引起慢性和反复发作的感染。 临床上,临床上,L型可引起肾盂肾炎、骨髓炎、心型可引起肾盂肾炎、骨髓炎、心内膜炎等,并常在作用于细胞壁的抗菌药内膜炎等,并常在作用于细胞壁的抗菌药物(物(-内酰胺类抗生素)治疗过程中发生,内酰胺类抗生素)治疗过程中发生,且易反复发作。故临床上遇有症状明显而且易反复发作。故临床上遇有症状明显而标本常规细菌培养阴性时,应考虑标本常规细菌培养阴性时,应考虑L型细菌型细菌感染的可能性,宜作专门分离培养,根据感染的可能性,宜作专门分离培养,根据菌落、形态特征、细胞壁是否缺陷及回
30、复菌落、形态特征、细胞壁是否缺陷及回复试验等鉴定菌种,并更换抗菌药物。试验等鉴定菌种,并更换抗菌药物。第三节 细菌形态学检查法 一、一、不染色标本检查法不染色标本检查法 标本不经染色直接镜检:标本不经染色直接镜检:观察活菌的动力观察活菌的动力、大小、大小、活菌的轮廓和繁殖方式等。活菌的轮廓和繁殖方式等。 方法:悬滴法方法:悬滴法、压滴法置普通光学显微镜或暗视压滴法置普通光学显微镜或暗视野显微镜下观察。野显微镜下观察。 二、染色标本检查法二、染色标本检查法 染色多用碱性染料:细菌等电点在染色多用碱性染料:细菌等电点在PH2-5之间,在近中性(之间,在近中性(PH7.2-7.6)的环境中细)的环境
31、中细菌多带负电荷,易与带正电荷的碱性染料菌多带负电荷,易与带正电荷的碱性染料结合。结合。 碱性染料:美蓝、碱性复红、结晶紫等。碱性染料:美蓝、碱性复红、结晶紫等。 常用的染色方法有两种:常用的染色方法有两种: 一)一)单染色法:单染色法: 只用一种染料染色,可观察细菌大小、形只用一种染料染色,可观察细菌大小、形态、排列,但不能鉴别细菌。态、排列,但不能鉴别细菌。 二)二)复染色法:复染色法: 用两种以上的染料染色,将细菌染成不同用两种以上的染料染色,将细菌染成不同颜色,可观察形态外,还能鉴别细菌。颜色,可观察形态外,还能鉴别细菌。 最常用、最重要的有革兰和抗酸染色法。最常用、最重要的有革兰和抗
32、酸染色法。 1、革兰染色法:革兰染色法: 方法:方法:细菌细菌涂片涂片标本固定标本固定 初染:用结晶紫初染:用结晶紫(龙胆紫)龙胆紫) 媒染:碘液,(均被染成深紫色)媒染:碘液,(均被染成深紫色) 脱色:脱色:95%乙醇(有些细菌被脱色)乙醇(有些细菌被脱色) 复染:稀释复红或沙黄(脱色者被染成红复染:稀释复红或沙黄(脱色者被染成红色)色) G+ -染成紫色染成紫色 G- -染成红色染成红色革兰氏染色与细胞壁:革兰氏染色与细胞壁: (1)革兰氏染色)革兰氏染色1、结晶紫初染、结晶紫初染2、碘液媒染、碘液媒染3、乙醇脱色、乙醇脱色4、复染、复染 意义:鉴别细菌:将细菌分成两大类:意义:鉴别细菌:
33、将细菌分成两大类: G+ 和和G- 选择抗菌药物:选择抗菌药物: 大多大多G+ 对青霉素、红霉素、头孢霉素等敏感对青霉素、红霉素、头孢霉素等敏感 G- 对链霉素和卡那霉素等敏感。对链霉素和卡那霉素等敏感。 与细菌致病性有关:与细菌致病性有关: 大多大多 G+ -外毒素致病外毒素致病 G- -内毒素致病。内毒素致病。 2、抗酸染色法:抗酸染色法: 方法:标本固定后方法:标本固定后 先经先经石炭酸石炭酸复红加温染色复红加温染色 用盐酸用盐酸酒精酒精脱色脱色 最后用美蓝(亚甲蓝)复染最后用美蓝(亚甲蓝)复染 抗酸杆菌抗酸杆菌-染成红色染成红色 非非染成蓝色染成蓝色 意义:鉴别抗酸杆菌和非抗酸杆菌意义
34、:鉴别抗酸杆菌和非抗酸杆菌 (三三)特殊染色法:)特殊染色法: 方法:负染色法:用酸性染料(如苯胺黑)或墨方法:负染色法:用酸性染料(如苯胺黑)或墨汁衬底,再用碱性染料染色。汁衬底,再用碱性染料染色。 意义:观察细菌的特殊结构(荚膜、芽胞、异染意义:观察细菌的特殊结构(荚膜、芽胞、异染颗粒等)、鉴别细菌。颗粒等)、鉴别细菌。 作业作业 一、概念:一、概念: 1、中介体、中介体 2、荚膜、荚膜 3、鞭毛、鞭毛 4、菌毛、菌毛 5、芽胞、芽胞 二、单选:二、单选: 1.革兰阴性菌细胞壁成分中,不存在的成革兰阴性菌细胞壁成分中,不存在的成分是分是( ) A.脂蛋白脂蛋白 B.肽聚糖肽聚糖 C.脂质双
35、层结构脂质双层结构 D.脂多糖脂多糖 E.磷壁酸磷壁酸 2.溶菌酶溶菌作用的机理是溶菌酶溶菌作用的机理是( ) A.切断切断N-乙酰葡萄糖氨和乙酰葡萄糖氨和N-乙酰胞壁酸之间乙酰胞壁酸之间-1,4糖苷键联结糖苷键联结 B.竞争合成细胞壁过程中所需要的转肽酶竞争合成细胞壁过程中所需要的转肽酶 C.干扰细菌蛋白质的合成干扰细菌蛋白质的合成 D.损伤细胞膜的通透性损伤细胞膜的通透性 E.干扰细菌干扰细菌DNA的复制的复制 3.细胞浆中具有遗传功能的物质是细胞浆中具有遗传功能的物质是( ) A.核糖体核糖体 B.质粒质粒 C.中介体中介体 D.胞质颗粒胞质颗粒 E.mRNA 4.芽胞决定了细菌的哪一种特性芽胞决定了细菌的哪一种特性( ) A.抗吞噬抗吞噬 B.细菌在体内的扩散能力细菌在体内的扩散能力 C.细菌的细菌的产毒性产毒性 D.细菌的耐热性细菌的耐热性 E.细菌对上皮细胞的粘附性细菌对上皮细胞的粘附性5.存在于细菌细胞壁外的粘液性物质是(存在于细菌细胞壁外的粘液性物质
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