技能项目十一酱油中氨基酸态氮的测定

1、For personal use only in study and research; not for commercial use膅技能项目十一酱油中氨基酸态氮含量的测定 双指示剂甲醛滴定法、电位滴定法芁一、目的与要求膀1. 了解食品中氨基酸态氮的来源、作用及测定方法羆2. 领会和掌握双指示剂甲醛滴定法及电位滴定法基本原理、操作要点。薆3. 进一步巩固滴定分析和电位滴定法的基本操作技能。羃二、测定原理罿氨基酸含有羧基和氨基，利用氨基酸的两性作用，加入甲醛固定氨基的碱性，使羧 基显示出酸性，用氢氧化钠标准溶液滴定后进行定量，用双指示剂或电位滴定法确定终 点。肆测定步骤：样品采集与处理T样液制

2、备T测定T数据处理。羇三、仪器与试剂蒁仪器：酸度计、磁力搅拌器、100mL容量瓶、50mlM式滴定管羂试剂： 36甲醛溶液、 0.050mol/L 氢氧化钠标准溶液、 0.1%酚酞、 0.1%百里香酚蓝。膆 四、测定步骤肄 1.0.050 mol/L 氢氧化钠标准溶液配制与标定（学生自己设计）膃 2. 双指示剂甲醛滴定法测酸态氮螁吸取酱油25mL于250mL容量瓶中，用蒸馏水定容，加 5 g活性炭脱色，用干燥滤 纸过滤。芆吸取滤液25mL3份，分别置于250ml锥形瓶中。先加6滴0.1 %酚酞，用氢氧化钠滴定至淡红色（pH=8.2 ）。加入10mL甲醛，再加1mL 0.1%百里酚蓝（50 %乙

3、醇溶液），此 时溶液为黄色，再用氢氧化钠漓定至淡蓝紫色为终点 （pH=9.2） 。同时做空白试验。记录 加甲醛后滴定所消耗的氢氧化钠量，即可计算出氨基酸态氮的含量。2）电位滴定法准确吸取酱油5.0mL，置于100mL容量瓶中，用蒸馏水定容，混匀后吸取 20.0mL, 置于200mL烧杯中，加水60mL,插入酸度计的指示电极和参比电极，开动磁力搅拌器， 用0.05mol / L NaOH标准溶液滴定至酸度计指示pH8.2，再准确加入甲醛溶液 10mL,混匀。继续用0.05mol / L NaOH标准溶液滴定至 pH9.2，记录用去氢氧化钠标准溶液的毫升 数，供计算氨基酸态氮含量用。薀试剂空白试验

4、：取水80mL,先用0.05mol /L氢氧化钠标准溶液滴定至pH8.2(记录用去氢氧化钠标准溶液的毫升数，此为测总酸的试剂空白试验)。再加入10mL甲醛溶液,继续用O.05mol / LNaOH标准溶液滴定至酸度计指示 pH9.2。第二次所用氢氧化钠标准溶 液毫升数为测定氨基酸态氮的试剂空白试验。莆五、结果记录与处理1.2.祎结果记录莂测定 次数莈双指示剂甲醛 滴定法蒆电位滴定法芆双指示剂甲醛 滴定法肄电位滴定法莁NaOH标准液浓 度/ (mol / L)蒃加甲醛后耗NaOHt/ mL薂加甲醛后耗NaOH量/ mL膀空白加甲醛后 耗 NaOH量/ mL薆空白加甲醛后 耗 NaOH量/ mL芄

5、1衿23平均2.结果计算式中：p -样品中氨基酸态氮的含量，g/ 100mL；Vi测定用的样品稀释液加入甲醛后消耗氢氧化钠标准溶液的体积，mL；V?试剂空白试验加入甲醛后消耗氢氧化钠标准溶液的体积，mL;V3样品稀释液取用量，mL;V4样品的体积，mL;V-样品稀释液的总体积，mL;c NaOH标准溶液的浓度，mol/ L;0.014 1mL I.OOOmol /L氢氧化钠标准溶液相当氮的克数。六、注意事项1. 酱油中的铵盐影响氨基酸态氮的测定，可使氨基酸态氮测定结果偏高。因此要同 时测定铵盐，将氨基氮的结果减去铵盐的结果比较准确。同时吸样要准确2. 终点判断要准确，指示剂法滴定终点不明显，可

6、借助于广泛pH试纸比较确定终点。3. 电位滴定法准确快速，可用于各类样品游离氨基酸含量的测定，酸度计要较正。七、思考题比较上述两法优缺点仅供个人用于学习、研究；不得用于商业用途。For personal use only in study and research; not for commercial use.Nur f u r den pers?nlichen f u r Studien, Forschung, zu kommerziellen Zwecken verwendet werden.Pour l ' e tude et la recherche uniquementa des fins personnelles; pasa des fins commerci