酶学分析方法及酶活性测定复习与练习

1、酶学分析方法及酶活性测定复习与练习一、有关酶的基本理论知识1、酶浓度与酶促反应速度的关系是？2、底物浓度与酶促反应速度的定量关系式是？3、影响酶促反应速度的因素主要有哪些？4、 Km 及 Vm 代表的含义及它们在临床酶活性测定中应用及意义。二、酶活性测定的基本知识1、酶活性的概念及酶活性单位如何表示表示2、目前酶活性单位有、 、 三种表示方式。？3、解释酶活性国际单位、催量（Katal）的概念，并比较两者的关系？4、酶活性单位的计算：几类计算公式要求理解并熟练应用。1）通用公式2）惯用单位的计算公式（测定产物生成类的计算公式；测定底物消耗类的计算公式）3） * 连续监测法根据摩尔吸光系数进行酶

2、活性浓度的计算；* 连续监测法因素F 值（全自动化生化仪多用K 表示）的计算和应用？三、 酶活性的测定方法1、酶活性测定的基本原则是什么？2、酶反应时间进程曲线有、三个时期酶活性测定是在期测定，此时期反应速度不受 的影响也称期3、根据反应时间，酶活性测定分为两类方法是 和 两种从概念、结果计算、优缺点叙述并比较两类方法？其中连续监测法4、按检测对象的酶活性测定方法分为 和 法；其直接法的方法类型有哪些？5、何谓酶偶联反应？写出酶偶联反应的基本模式？什么是待测酶、辅助酶、指示酶？6、 何谓工具酶？酶作为工具应用于临床生化检验可进行酶活性测定或进行代谢物浓度（底物）的测定时一般有哪两大指示系统？何

3、谓-Trinder 反应？ Trinder 反应的主要缺点或影响因素有哪些？7、何谓同工酶？同工酶分析的常用原理有哪些？检测同工酶有何临床意义？并举例说明？8、酶活性测定条件及影响因素有哪些？9、从几个酶类测定（如 AMY、ALT、LD、ALP|等）的实验操作中，讨论酶活性测定应注意的问题？10、试述影响血清酶的生理变异有哪些？11、酶活性测定，标本的采集、处理、贮存及样品试剂比有何要求？四、体液酶测定：1、常用于临床协助诊断的血浆酶有哪些？用于协助诊断心肌损伤、肝脏疾病、胰腺疾病、骨骼骨骼肌、前列腺疾病等的常用的血清酶有哪些？常用的临床诊断酶谱有哪些？2、将各血清酶活性测定的方法学原理进行分

4、析归纳，请总结出有哪几大反应基础。3、 书写出 AMS、 ALP 两种 （化学比色法、（连续监测法）方法及ALT、 AST、 GGT、 LDH 、CK 酶测定 （连续监测法）反应原理、主要试剂成分和作用？影响结果准确性因素有哪些？评价 LD-L 反应和LD-P 反应试剂盒的优缺点？4、血清ALT、 AST、 ALP、 GGT、 AMS、 CK、 LD 等酶测定的临床意义？五、选择题：A 1、 K m 是指反应速度为最大反应速度一半时的A 底物浓度B 酶浓度C 激活剂浓度D 温度E 抑制剂浓度D 2、根据1976年国际生化学会生化委员会规定，酶的一个国际单位是指A最适条件下，每小时催化生成1mm

5、ol/l 产物的酶量B最适条件下，每分钟催化生成1mmol/l 产物的酶量C最适条件下，每小时催化生成1umol/l 产物的酶量D 特定条件下，每分钟催化1umol 底物产生变化所需的酶量E 25及其它最适条件下，每分钟催化1umol 底物产生变化所需的酶量E 3、 IFCC 推荐法测定AST 的辅助酶是A G6PD B HK C POD D LDH E MDHB 4、以NAD (P)或NAD (P) H为指示系统的酶活性测定主波长应设置为：A 293nm B 340nm C 405nm D 380nm E 500nmD5、以NAD还原为NADH反应为基础的生化分析，采用波长及吸光度变化为：A

6、、340nm A下降B、405nm A上升C、500nm A下降D、340nm A上升E、405nm A下降A 6、淀粉酶测定显著升高主要见于：A、溃疡病穿孔B、急性胰腺炎C、甲亢D、糖尿病E、肾病综合症C 7、正常成人血清LD 同工酶电泳区带的结果应符合：A LD1>LD2>LD3>LD4>LD5B LD1<LD2<LD3<LD4<LD5C LD2>LD1>LD3>LD4>LD5D LD3>LD1>LD2>LD4>LD5E LD4>LD1>LD2>LD3>LD5B 8、 I

7、FCC 推荐法测定ALP 选择用哪种缓冲液A 乙二胺B AMP C Tris D 甘氨酸E 二乙醇胺C 9、单底物酶促反应的最适底物浓度的确定原则：A 1Km B 2Km C 1020Km D 100Km E 越大越好B 10、前列腺疾病最敏感的指标是：A ALP B ACP D CHE D AMY E ASTC 11 自动化生化分析仪测定酶活性常用计算K 值的主要原因是A 方便 B 准确 C 无标准品和校正品D 酶校正品不准确D 12、GPTM定时，底物液中的a酮戊二酸的量比丙氨酸的量小近百倍的原因是A 防止酶促反应时，丙酮酸生成过量B 保证酶有足够的底物C防止基质中PH小于7.4 D 减少

8、a酮戊二酸与2. 4二硝基苯肌的呈色反应E a酮戊二酸过多可激活酶的活性D 13、AST测定(速率法)的试剂中，不含有A大冬氨酸B NADH Ca 酮戊二酸D 丙氨酸E Tris 缓冲液C 14、酶联反应中最后一个外加酶称为：A 偶联酶B辅酶C 指示酶D 工具酶E同工酶D 15、 ALP 测定(King法)其底物是A 铁氰化钾B 酚C 4 AAPD 磷酸苯二钠E 丙氨酸B 16、血清A LT测定中，标准曲线为抛物线的干扰物为A丙酮酸 B 2.4 二硝基苯肥C 谷氨酸D a 酮戊二酸E 2.4 二硝基苯腺B 17、ALT测定（R F）终止酶促反应是用A 0. 4 mol/LNaOH B 2. 4

9、 二硝基苯肥C a 酮戊二酸2. 4二硝基苯腺D 磷酸盐缓冲液E 碳酸盐缓冲液A 18、血清ALT测定（R F法），下列哪些情况会导致结果偏低:A制作标准曲线所用的丙酮酸钠变质B 标本严重溶血C 对照管混浊未被发现D 水浴温度偏高（升至5 0C）E 血清与基质混合匀后未及时放入3 7 C水浴保温A 19、1 0 0 n Kat单位酶量等于A6 I UD278IUB 27.8IUE 1667IUC 16 6. 7 I UE 20、根据米氏方程，不符合S与Km的关系的是A当S>>Km时，反应速度与底物浓度无关，成零级反应B当S < < Km时，反应速度与底物浓度成正比，成一

10、级反应C 当S = Km 时，V = Vm/2D 度量两者的单位是相同的E 当S = Km/3 时，V = 67% Vm天冬氨酸+a酮戊二酸-草酸乙酸+丙酮酸+NADH -孚L酸+ NADA 丙氨酸+ a酮戊二酸 -丙氨酸+谷氨酸 B 谷氨酸C 肌酸+ATP - 磷酸肌酸+ ADP DE草酸乙酸+NADH -苹果酸+ NADB 21、AST催化的反应D 22、LDH催化的反应C 23、CK催化的反应A 磷酸苯二钠B 铁氟化钾C 4 -AAPD 酚E 碱性试剂B 24、AL P (K ing )测定C 25、D 26、A 27A ALT B ALP C氧化剂显色剂标准物底物GGT D AMS E

11、 CK-MBA 28、肝细胞急性损伤最好的指标C 29、肝占位性病变D 30、急性胰腺炎E 40、心肌梗死B 41、骨骼疾病A NAD （ P） H 指示系统B POD 指示系统C 两者均有D 两者均无C 42、葡萄糖测定C 43、 TG 测定B 44、胆固醇测定B 45、尿酸测定D 46、尿TP 测定（ ALT AST 胆汁酸 胆红素、肌酐等）B 速率法D 两者均无B 离子选择电极法测定D 两者均无A 平衡法C 两者均有A 47、 GOD-POD 测葡萄糖B 48、碱性苦味酸法测肌酐C 49、 GLDH 测尿素A 酶试剂法测定C 两者均有C 50、血清钠、钾测定C 51、血清氯、钙的测定A

12、52、血清磷的测定D 53、血清总蛋白、清蛋白测定A 54、血清ALT、 AST 测定ABCD 55、酶偶联方法测定酶活性的有：A ALT B AST C CK D AMY E LDHABCD 56、下列哪些因素影响酶活性的测定A 缓冲液的种类和离子强度B PHC 反应温度D 激活剂浓度E 比色皿光径BC 57、酶促反应指示物的检测波长为405nm 的有A NADHB 4-硝基酚C 5-氨基-2-硝基苯甲酸D 磷钼酸E NADPHABCD 58 A LT测定时，U A-BA的意义有A 消除2. 4二硝基苯肌溶液的A值B 消除a 酮戊二酸2 . 4 二硝基苯腺的A值C 消除血清色素的干扰D 消除

13、血可能存在的酮酸的干扰BC 59、属于 Trinder 反应的色原物是:A H2O2 B 酚 C 4-AAP D POD E CODACDE 60以下说法正确的是A.当S<<Km时，反应速度与底物浓度成正比，成一级反应B.当S>>Km时，反应速度与酶浓度成正比，酶促反应呈一级反应C.零级反应时V=Vman=KED . 一级反应是用工具酶测定各种代谢物浓度的方法学基础E.零级反应是用于测定酶活性或浓度的方法学基础ABCD 61溶血时对测定结果有影响的血清酶是A、 CK B、 LDC、 ALTD、 AST E、 GGTABE 62、 ALP 活性升高可见于A、多发性骨月中瘤

14、B、骨折 C贫血D、甲低 E、阻塞性黄疸AE 63、 G6PD 可用于测定A、葡萄糖 B、淀粉酶 C、乳酸脱氢酶D、碱性磷酸酶E、肌酸激酶ACDE 64、下列代谢物与其酶法测定所用试剂的组合，正确的是A、尿酸一尿酸酶一过氧化氢酶B、葡萄糖一葡萄糖氧化酶一葡萄糖-6-磷酸脱氢酶C、尿素-尿素酶-谷氨酸脱氢酶D 、三酰甘油 脂蛋白脂肪酶 甘油激酶E、胆固醇一胆固醇氧化酶一过氧化物酶ABDE 65、下列酶活性测定描述正确的是A、可测定产物的生成量B、可测定底物的消耗量C、与底物浓度无关D、需最适温度E、需最适的酸碱度补充选择题：A 1 当底物浓度大于Km 时，此时的反应速度为A.零级反应B. 一级反

15、应C.二级反应D.混合级反应E.无法确定反应级D 2、为保证酶动力学分析，底物浓度最好是：A 0.5KmB 2Km C 25KmD 1020Km E 100Km3、连续监测法测定ALT 所用的底物通常是：对硝基苯酚磷酸钠C 4、测定下列哪种血清酶有助于鉴别ALP 的来源A ACP B AMS C GGTD LD E CKB 5、疾病时血清及尿液淀粉酶升高，应除外：A.急性胰腺炎B .肝炎 C.肠梗阻 D.急性腮腺炎 E.溃疡病穿孔其它练习：1、以 NAD+ 还原为 NADH 反应为基础的生化分析,采用波长是nm, 吸光度变化为 . 当测定时其S:R=1:20 时 （酶速率法） 结果计算是IU/L= A/minx factor, factor 为（附 NADH 在 340nm 毫克分子吸光系数为6 22）2、S GPT测定中底物成分要求DL丙氨酸的浓度为2 0 0 mmol/L a 酮戊二酸浓度为2 m