病原体核酸质控物的使用及注意事项学习教案

1、会计学1病原体核酸质控物的使用及注意事项病原体核酸质控物的使用及注意事项第一页，编辑于星期日：十八点 五分。编号靶值（对数值）范 围HBV DNA S15.42106 (6.73)1.70106 1.70107 (6.23 7.23)HBV DNA S23.19106 (6.50)1.00106 1.00107 (6.00 7.00)HBV DNA S39.42105 (5.97)2.95105 2.95106 (5.47 6.47)HBV DNA S42.60105(5.41)8.13104 8.13105 (4.19 5.91)HBV DNA S57.66104 (4.88)2.40104

2、 2.40105 (4.38 5.38)该质控品为液体血清，每支该质控品为液体血清，每支500500 l l，使用时室温放置，使用时室温放置1515分钟使分钟使其充分复融，颠倒或漩涡振荡并瞬时离心后使用。其充分复融，颠倒或漩涡振荡并瞬时离心后使用。第1页/共15页第二页，编辑于星期日：十八点 五分。HCV RNAHCV RNA冻干质控物冻干质控物 （单位：（单位：IU/ml)IU/ml) 编号靶值（对数值）范 围07111.32106 (6.12)4.17105 1.70106 (5.626.62)07121.05106 (6.02)3.31105 3.31106 (5.526.52)0713

3、5.76105 (5.76)1.82105 1.82106 (5.266.26)07156.61103 (3.82)2.09103 2.09104 (3.324.32)07168.72104 (4.94)2.75104 2.75105 (4.445.44)该质控品为冻干血清，每支该质控品为冻干血清，每支300300 l l，使用时用，使用时用DEPCDEPC水复溶，室水复溶，室温放置温放置5 5分钟，漩涡振荡使之充分溶解并混匀，瞬时离心后分钟，漩涡振荡使之充分溶解并混匀，瞬时离心后使用。使用。第2页/共15页第三页，编辑于星期日：十八点 五分。 关于定量单位IU/ml和拷贝数/ml的换算请根据

4、不同试剂的检测结果与该质控品的定值进行比对得出，不同试剂的换算系数会有所不同。IU/ml拷贝数/mlWHO各不同试剂厂家病毒个数“检出单位”（detectable unit） 假设：PCR反应体系内含有1 拷贝的待测分子即可检出 第3页/共15页第四页，编辑于星期日：十八点 五分。DNA/RNA 参考品（质粒等）参考品（质粒等）测量OD260的值得到mg/ml通过与分子量的计算，得到拷贝数/ml不同实验室得到的结果差别很大。第4页/共15页第五页，编辑于星期日：十八点 五分。HCVHCV国际单位与拷贝数换算国际单位与拷贝数换算NGI NGI SuperQuant:SuperQuant: 1 I

5、U/mL = 3.4 copies/ml1 IU/mL = 3.4 copies/ml (NGI Product License Application to FDA ) (NGI Product License Application to FDA )Roche Roche AmplicorAmplicor 1 1 IU/mL = IU/mL = 0.9 copies/ml0.9 copies/ml (Roche Molecular Systems) (Roche Molecular Systems)Cobas AmplicorCobas Amplicor 1 IU/mL = 2.7 cop

6、ies/ml1 IU/mL = 2.7 copies/ml (Roche Molecular Systems) (Roche Molecular Systems)LCx HCV RNA Quantitative AssayLCx HCV RNA Quantitative Assay 1 IU/mL = 3.8 copies/ml1 IU/mL = 3.8 copies/ml (Abbott Diagnostics)(Abbott Diagnostics)Bayer bDNA 3.0:Bayer bDNA 3.0: 1 IU/mL = 5.2 copies/ml1 IU/mL = 5.2 cop

7、ies/ml (Bayer Development Group)(Bayer Development Group) 第5页/共15页第六页，编辑于星期日：十八点 五分。未知未知HCV RNA 样本样本甲实验室 5000拷贝/ml 乙实验室 10000拷贝/ml 丙实验室 50000拷贝/ml 丁实验室 20000拷贝/ml 实验室结果的互通性实验室结果的互通性第6页/共15页第七页，编辑于星期日：十八点 五分。20000IU/mlHCV RNA 样本样本甲实验室 40000拷贝/ml1IU/ml2拷贝/ml 乙实验室 10000拷贝/ml 1IU/ml拷贝/ml丙实验室 50000拷贝/ml1

8、IU/ml拷贝/ml 丁实验室 20000拷贝/ml1IU/ml1拷贝/ml 实验室结果的互通性实验室结果的互通性第7页/共15页第八页，编辑于星期日：十八点 五分。第8页/共15页第九页，编辑于星期日：十八点 五分。22家实验室实验1实验2实验3实验4间隔1周7次10倍稀释8次101/2倍稀释(终点浓度附近）“终点”Report on the evaluation of a candidate standard for NAT assays for HCV RNA。 第9页/共15页第十页，编辑于星期日：十八点 五分。1:101:1001:3161:10001:3160HCV RNA 终点稀释终点稀释:1:100001 12 23 34 45 56 67 78 89 910101111Poisson分布：63的实验室检测结果为阳性的稀释倍数定为“终点”，即1IU/ml。IUIU（international units)international units)的确定：的确定：第10页/共15页第十一页，编辑于星期日：十八点 五分。实验室数方法均值3Amplicor Monitor3bDNA2In-house1NASBA6改良的Amplicor（定性）9单一PCR （定性）6巢式PCR （定性）统计学计算得出均值定值的标准品核酸质控物第11页/共15页第十二页，