吉林省长春市2018届高考生物三轮复习生物技术实践微生物的培养与应用1

1、生物技术实践一一微生物的培养与应用1、下表是某同学列出的分离土壤中微生物培养基的配方数据表，据此回答下列问题:培养基配方含量培养基配方含量KHPQ1.4g葡萄糖10.0gNazHPQ2.1g尿素1.0gMgSQ?7H00.2g琼脂15.0g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL（1）培养微生物的培养基中，一般都含有碳源、 氮源、等营养物质。若用于培养乳酸菌，培养基中除上述营养物质外，还需要添加 _ 。细菌能利用尿素作为氮源，是由于其能合成 _ 酶。（2） 在对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定时，还需在培养基中加入 _ 指示剂。接种前一般采取_ 对培养基进行灭菌。（3） 某同学在 4 个培养

2、基上分别接种稀释倍数为105的土壤样液 O.ImL,培养后菌落数分别为 161、155、158、170 个，则每毫升原土壤样液中尿素分解菌的数量为 _。某同学在纯化土壤中的尿素分解菌时，培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是_ 。（4） 常采用 _ 法将纯化得到的目的菌长期保存。2、对十二烷基苯磺酸钠（LAS）是洗涤剂的主要成分，LAS 对人体的皮肤、血液、肝脏有一定的危害，LAS 不易被生物降解，从而容易造成环境污染。某同学尝试从长期被洗涤剂污染的土壤中筛选 出 LAS 降解菌，并对该菌种进行培养和计数。回答下列问题：（1） 该同学从长期被洗涤剂污染的土壤中取样后，将样本置于在以_ 作为唯一

3、碳源的液体培养基上进行培养，该培养基为 _，其作用是 _ 。（2） 经过初步培养后， 该同学对获得的 LAS降解菌溶液进行梯度稀释， 吸取 105稀释倍数的降解菌 液各 0.1mL,分别涂布在三个平板上，一段时间后形成的菌落数依次为20、14、14,该同学以平均 菌落数 16 进行计数。1以平均菌落数 16 进行计数，可求得原菌液中LAS 降解菌的浓度为 _个/mL。2你认为该同学的计数方法是否正确？ _ （填“正确”或“不正确”），说明理由2（3）稀释涂布平板法不适宜用于某些食品工业（比如酸奶等）的质量检测，原因是_ ，此时应采用_ 统计细菌的数目。33、毒死蜱（C9H1C3NOPS）是一种

4、有机磷杀虫剂，长期使用将导致土壤中农药残留严重。某研究小组从长期施药的韭菜温室土壤（偏酸性）里分离出能降解毒死蜱的木霉，并对其降解特性进行初步研究。请回答：（1） 用于分离木霉菌种的培养基属于 _培养基。配制此培养基时，应加入_作为唯一碳源。接种前，将培养基在适宜温度下放置适当的时间，观察培养基，以确定培养基是否被污染。（2） 纯化木霉时，统计出 0.2mL 的稀释液在稀释倍数为 105的平板上的平均菌落数为 40 个，则每 mL 样液中的菌落数为 _ 个。用此法测定木霉数量，实际活菌数量要比统计的菌落数量_，原因是_ 。（3）探究 pH 对木霉降解毒死蜱活性的影响研究小组向不同 pH 的培养

5、基中分别加入 100 mg/L 毒死蜱，5 天后检测毒死蜱的残留量（图1）。由图可推知：在偏酸性的土壤中， _ 。研究小组向不同 pH 的培养基中分别加入 100 mg/L 毒死蜱，再分别接种 1 mL 木霉悬液，混合均 匀，5 天后检测毒死蜱的残留量（图 2）。在此韭菜温室土壤中，若要提高木霉对毒死蜱的降解活性， 可对土壤作何处理？_ 。4、生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的。请回答下列问题：（1） 培养大肠杆菌所用的 LB 培养基一般用_ 法灭菌。检验大肠杆菌的含量时，通常将水样用_进行一系列的梯度稀释。（2） 将稀释后的水样分别接种到LB 固体培养基， _（填“正置/倒置”）于恒

6、温培养箱，在_ C 条件进行培养。用该方法统计样本菌落数时 _ （填“需要/不需要”）设置对照组。（3）对于生活饮用水中大肠杆菌的数量统计，也可以采用滤膜法，该法是利用滤膜的直径_4（填“大于/小于”）大肠杆菌的直径，将大肠杆菌留在滤膜上进行的计数。（4） 下图表示培养和纯化大肠杆菌的部分操作步骤，下列相关叙述错误的是_（多选）。A. 步骤倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置B. 步骤接种环火焰上灼烧后迅速蘸取菌液后划线C. 步骤多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落D. 步骤恒温培养箱培养后可用来对大肠杆菌进行计数1、 【答案】 水和无机盐 维生素 脲 酚红 高压蒸汽法 1.61X108菌液浓度过高（土壤溶液稀释不够）甘油管藏2、 【答案】LAS 选择 初步筛选 LAS 降解菌，并增大其浓度1.6X107不正确 应涂布多个稀释倍数的稀释液，以获得菌落数在30-300 个的平板置的食品容易变质，导致大量目的菌死亡，而稀释涂布平板法只能测活菌数目显微镜计数法3、 【答案】 选择 毒