病原生物学实验二

1、1会计学病原生物学实验二病原生物学实验二3.3.半固体穿刺接种法：半固体穿刺接种法：保存菌种或观察细菌的动力和生保存菌种或观察细菌的动力和生化反应。化反应。4.4.液体接种法：液体接种法：用于肉汤、蛋白胨水、糖发酵管等液体用于肉汤、蛋白胨水、糖发酵管等液体培养基的接种。培养基的接种。四四种种接接种种方方法法菌落与菌苔菌落与菌苔菌落菌落菌苔菌苔菌膜菌膜菌沉淀菌沉淀均匀浑浊均匀浑浊对照对照有动力有动力 现象现象无动力无动力 现象现象 一.肠道杆菌的生物学性状 二.S-S培养基的特性及用途 三.分离培养方法 主要内容（一）肠道杆菌的生物学性状 埃希菌属：大肠埃希菌沙门菌属：伤寒沙门菌 甲型、乙型、丙

2、型副伤寒志贺菌属：痢疾志贺菌肠杆菌科的重要菌属及代表菌种1.相似的形态染色乳糖发酵试验 肠道致病菌 肠道非致病菌 多数不发酵乳糖 多数发酵乳糖 2.活泼的生化反应初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌 +/- - +伤寒杆菌 - - +痢疾杆菌 - 大肠杆菌 硫化氢 乳糖 葡萄糖 菌名 三种细菌的生化反应 成成 分分含量（含量（g/Lg/L）作作 用用牛肉膏牛肉膏5 5营养成分营养成分乳糖乳糖1010营养成分，发酵营养成分，发酵蛋白胨蛋白胨5 5营养成分营养成分胆酸钠、胆酸胆酸钠、胆酸- -脱氧胆脱氧胆酸钠盐混合物（三号酸钠盐混合物（三号）3.53.5抑制抑制G+G+、大部分大肠菌群和变形、大部分大

3、肠菌群和变形杆菌杆菌柠檬酸钠柠檬酸钠8.58.5抑制抑制G+G+、大部分大肠菌群和变形、大部分大肠菌群和变形0.1%0.1%煌绿溶液煌绿溶液0.33ml0.33ml抑制抑制G G+ +、大部分大肠菌群和变形、大部分大肠菌群和变形硫代硫酸钠硫代硫酸钠8.58.5检测硫化氢的产生检测硫化氢的产生10%10%柠檬酸铁溶液柠檬酸铁溶液10ml10ml检测硫化氢的产生检测硫化氢的产生1%1%中性红溶液中性红溶液2.5ml2.5ml指示剂指示剂琼脂琼脂1717凝固剂凝固剂（二）SS培养基 （Salmonella Shigella Agar ） （二）SS培养基细细 菌菌SS平板平板大肠杆菌大肠杆菌粉红色粉

4、红色大菌落大菌落痢疾杆菌痢疾杆菌无色细小，半透明菌落无色细小，半透明菌落伤寒杆伤寒杆菌菌无色细小无色细小 半透明菌落半透明菌落 ( (中间有黑色沉淀）中间有黑色沉淀）SS培养基中菌落特点 （三）粪便标本的分离培养1.1.空气中细菌的检查（空气中细菌的检查（每个班每个班2 2个平皿个平皿） 原理：原理：根据空气中携带有微生物气溶胶（以固体或液根据空气中携带有微生物气溶胶（以固体或液体微小颗粒分散于空气中的分散体系称为气溶胶，其中的气体微小颗粒分散于空气中的分散体系称为气溶胶，其中的气体是分散介质）粒子在地心引力的作用下，以垂直的自然方体是分散介质）粒子在地心引力的作用下，以垂直的自然方式沉降到琼

5、脂培养基上。式沉降到琼脂培养基上。 方法：方法：在室内选择一处放一个平皿。揭开皿盖，皿盖在室内选择一处放一个平皿。揭开皿盖，皿盖扣置于皿底下，暴露扣置于皿底下，暴露放置放置15min，即盖上皿盖，放入，即盖上皿盖，放入37 培培养养24小时，观察结果。小时，观察结果。细菌在自然界的分布细菌在自然界的分布2.2.紫外线对细菌的影响紫外线对细菌的影响（每个实验室（每个实验室2 2个培养皿）个培养皿） 分三次接种，分三次接种，每次取一环。第每次取一环。第一次密涂接种后一次密涂接种后旋转旋转60度二次密度二次密涂接种，然后同涂接种，然后同方向旋转方向旋转60度后度后再次密涂接种。再次密涂接种。方法方法：取一普通平皿培养基，取一普通平皿培养基，一部分写上一部分写上“前前”，另一部分，另一部分写上写上“后后”，然后将手指在写，然后将手指在写有有“前前”的部分沾一下，再将的部分沾一下，再将手指用酒精进行消毒，在写手指用酒精进行消毒，在写有有“后后”的部分沾一下。放入的部分沾一下。放入3737温箱培养温箱培养2424小时小时后观察。后观察。 （每个实验室（每个实验室4 4个平皿）个平皿）5.5.自选细菌进行培养自选细菌进行培养(4(4个个) )方法方法：取一普通平皿培养基，用棉签沾取生理