苯甲酸钠急性毒性试验

1、安徽科技学院食品药品学院本科毕业论文苯甲酸钠的急性毒性试验食品质量与安全111:王文静学号：2302110120摘要:苯甲酸钠的急性毒性试验目的：根据实验动物小鼠的苯甲酸钠的致死剂量水平初步估计其对人类的可能毒害的危险性。为了对苯甲酸钠毒性性质的进一步了解， 找出其剂量一反应和剂量一效 应的关系。方法：经查阅资料得小鼠的 LD50值为2512mg/kg ,通过霍恩式法设计出剂量组。通过经口灌胃方式染毒，观察小鼠中毒症状。结论：苯甲酸钠毒性为3级，属于低毒物质。中毒症状出现的时间与灌胃剂量存在直接线性关系：剂量越大，死亡就越快，死亡率就越高.。关键字：苯甲酸钠急性毒性LD50值 灌胃染毒1.引言

2、1.1苯甲酸钠性质：苯甲酸钠是酸性防腐剂，一般用在酸性条件下，在酸性条件下能转 化为有活性的苯甲酸，因此防腐的机理同苯甲酸。其防腐功能在pH为2.5 4.0时最佳。在碱性介质中则无杀菌和抑菌作用。由丁苯甲酸钠的水溶性远大丁苯甲酸，在水介体系中 更容易溶解和分散，而且在空气中稳定，因此比苯甲酸常用得多。苯甲酸钠亲油性较大， 易穿透细胞膜进入细胞体内，干扰细胞膜的通透性，抑制细胞膜对氨基酸的吸收；进入细 胞体内电离酸化细胞内的碱储，并抑制细胞的呼吸酶系的活性，阻止乙酰辅酶A缩合反应, 从而起到食品防腐的目的。1.2苯甲酸钠的作用及限量：苯甲酸钠是很常用的食品防腐剂，有防止变质发酸、延 长保质期的效

3、果。在饮料、罐头、果汁、冷食、酱油、醋等食品领域有着广泛应用，也可 作为饮料的防腐剂。苯甲酸钠低蠹。近年来对其蠹性的顾虑使得它的应用受限，对它的使 用作出限制。应用在食品中的限量为 0.1%,不允许用丁食用肉类和维生素 B1中。可参见 苯甲酸。苯甲酸钠的ADI值05mg/kg （即每人每天每千克体重可允许摄入 0 5毫克）， 相当丁 60kg成人的终身摄入无蠹作用剂量是每天 300mg中国规定苯甲酸钠在饮料中的最 大使用量为0. 2g/kg，即一个成年人每天喝一升饮料，苯甲酸钠为 200mg比国际规定的 ADI值还低。1.3急性蠹性试验设计：本研究采用小鼠经口染蠹，急性蠹性试验主要测定半数致死

4、 量，观察中蠹表现，确定蠹作用方式，为业急性和慢性试验的观察指标及剂量分组提供参 考依据。本试验采用灌胃染蠹是将配成一定浓度梯度的溶液，装入灌胃针，注入受试小鼠 的胃内。实验所选小鼠体重差别不大，所以受试小鼠一次灌胃体积在0.4ml/只。急性蠹性中蠹重点观察症状如下：器官系统观察及检验项目中毒后反应中枢神经系统功能及躯体运动行为与动作体位、叫声、活动异常，不安或卧倒。振颤、运动失调、麻痹、惊觉,对刺激反应易兴奋，感觉迟钝或过敏。肌肉张力松弛或紧张自主神经系统瞳孔放大或缩小腺体分泌垂涎，流泪，出汗2.呼吸系统鼻鼻孔溢出液体材呼吸表现呼吸徐缓或过速，困难或衰竭- 料与方法2.1实验材料：小白鼠16

5、只（室温，自由饮水摄食），鼠笼，鼠粮。2.2仪器与试剂仪器：灌胃针，洒精棉，100ml容量瓶若干，烧杯，分析天平。试剂：苯甲酸钠150mg/ml,蒸僻水。2.3 实验动物处理取16只小鼠，随机分成A、B、C、D四组，每组四只小鼠。分别称取每只小鼠重量， 记录并做标记，分别为头部，前腿，腹部，后腿。将试验小鼠将分组后的小鼠置丁同一笼 中喂养，禁食一夜，饮水正常。2.4实验设四个剂量组浓度将查阅相关资料得到的苯甲酸钠 LD50值安排在在第二组与第三组之间，根据霍恩式法 计算出各小组浓度如下：1.00*10 3mg/kg、2.15*10 3mg/kg、4.64*10 3mg/kg、10.00*10

6、3mg/kg ,且每个剂量组浓度组 距为2.15倍。禁食一夜后对小鼠进行灌胃操作。各组小鼠灌胃水平组别ABCD灌胃水平1.00*10 3mg/kg2.15*10 3mg/kg4.64*10 3mg/kg10.00*10 3mg/kg小鼠灌胃死亡前后体重变化体重/g 芝别标记部位一AA'BB，CC，DD头部25.222.329.128.323.207前腿26.721.726.324.1928.022.56腹部22.120.827.525.2626.824.55后退28.320.725.923.4829.727.81按上表对小鼠进行分次灌胃，灌胃前用洒精棉对灌胃针进行消蠹。灌胃结束之后2-

7、3h 可以进行喂食。灌胃完成后，观察小鼠是否有反常症状以及死亡情况并记录。2.5观察指标观察小鼠的异常症状及死亡数急性毒性重点观察的中毒症状记录表观察时间现象记录第一组(A第二组(B)第三组(C)第四组(D)11.27上午(灌胃 实验结束即 计)时各鼠反应降低，活 动量减少，饮食量减少，身体抽搐各鼠反应降低，活 动量减少，饮食量减少，身体抽搐各鼠反应降低，活 动量减少，饮食量减少，身体抽搐各鼠反应降低，活 动量减少，饮食量减少，身体抽搐下 午各鼠反应降低，活 动量减少，饮食量减少，身体抽搐各鼠反应降低，活 动量减少，饮食量减少，身体抽搐各鼠反应降低，活 动失调，饮食量少，身体抽搐各鼠反应降低，

8、活 动失调，饮食量少，身体抽搐11.28上 午各鼠活动减少，身体抽搐，饮食正常各鼠活动减少，身体抽搐，饮食正常死亡三只，肺部破 裂，心脏变黑，肾 脏，肝脏肿大 另外一只活动少， 身体抽搐，饮食正 常全部死亡肺部破裂心脏变黑肾脏，肝脏肿大下 午各鼠活动减少，饮 食正常各鼠活动减少，饮 食正常小鼠活动减少，饮 食正常11.29上 午各鼠活动，饮食均正常各鼠活动，饮食均正常小鼠活动，饮食正常下 午各鼠活动，饮食均正常各鼠活动，饮食均正常小鼠活动，饮食正常11.30上 午各鼠活动，饮食均正常各鼠活动，饮食均正常小鼠活动，饮食正常下 午各鼠活动，饮食均正常各鼠活动，饮食均正常小鼠活动，饮食正常12.1上

9、 午各鼠活动，饮食均正常各鼠活动，饮食均正常小鼠活动，饮食正常下 午各鼠活动，饮食均正常各鼠活动，饮食均正常小鼠活动，饮食正常12.2上 午各鼠活动，饮食均正常各鼠活动，饮食均正常小鼠活动，饮食正常下 午各鼠活动，饮食均正常各鼠活动，饮食均正常小鼠活动，饮食正常3. 实验结果如上观察记录表，经第一次灌胃染蠹 23h后，四组(A,B,C,D)小鼠均反应降低，运动量 减少，进食量减少，身体抽搐。在 24h后给药剂量大的小鼠第三，四组小鼠刚开始异常亢 奋，运动量增大，呼吸急促而后精神萎靡，行动迟缓，卧倒，蜷缩，垂涎及抽搐症状，最 后死亡。36h后，剩余的小鼠活动，饮食渐渐趋丁正常。实验结果：四组小鼠

10、死亡数目分 别为0, 0,3,4，通过查阅霍恩法LD5o计算用表得出小鼠经口染蠹的苯甲酸钠的 LD5o值，查 表知 LDo=3830mg/kg，可信限为 2.61-5.62。4. 结果分析实验过程中，小鼠出现抽搐，行动迟缓，呼吸减慢，精神萎靡及死亡等中蠹表现，说 明苯甲酸钠具有一定的蠹性，应引起食品生产过程中防腐剂苯甲酸钠应用的注意。在24h后剩余小鼠中蠹状况渐渐好转，说明苯甲酸钠不在机体内蓄积。查阅资料：苯甲酸钠进入 机体后，在9-15小时内，大部分与甘氨酸化合成马尿酸，从尿中排出，剩余部分和葡萄 糖醛酸化合成葡萄苜酸而解蠹，通过尿排出体外。在代谢方面小鼠与人较为接近，急性蠹 性试验表明苯甲

11、酸钠届丁低蠹性物质，苯甲酸钠灌胃小鼠半数致死量为LD5°=3830mg/kg,95%勺可信限为2.61-5.62。5. 结论实验结果表明：在安全范围内使用苯甲酸钠对机体是没有影响，过量使用苯甲酸钠会 引起致癌，致畸及死亡。苯甲酸钠届丁低蠹物质，中蠹症状出现的时间与灌胃剂量存在直 接线性关系，剂量越大死亡率就越高，急性蠹性经口试验可提供在短时间内经口接触受试 物所产生的危害信息，为进一步试验剂量选择提供依据，并初步估测可能的蠹作用机制， 为实验结果外推至人提供参考依据。苯甲酸钠这种化学物质，对人类有利也有害。我们应 该尽量减少食用含有苯甲酸钠做防腐剂的物质，取利避害，正确对待苯甲酸钠。参考文献1、沈建忠，动物蠹理学M.北京：中国农业出版社，2