茶多酚的含量测定

1、茶 多 酚 的 含 量 测 定高锰酸钾直接滴定法目的：掌握高锰酸钾直接滴定法测定茶叶中茶多酚含量的原理及操作原理茶叶中茶多酚易溶于热水，在用靛红作指示剂的情况下，样液中能被高锰酸钾氧化的物质根本上都属于茶多酚物质。根据消耗1mL0.318g/mL 的高锰酸钾相当于5.82mg 茶多酚的换算系数，可计算茶多酚的含量。仪器与试剂仪器：分析天平、电动磁力搅拌器、电热水浴锅、500mL白瓷皿。试剂：1、 0.1%靛红溶液：称取靛红 1g参加少量水搅匀后，再慢慢参加相对密度为1.84 的浓硫酸50mL，冷却后用蒸馏水定容至1000mL ，如果靛红不纯，可下法磺化处理是：称取靛红1g，加浓硫酸50mL，在

2、80 'C烘箱或水浴中加热磺化 46h，用蒸馏水定容至1000mL ，过滤后贮于棕色瓶中。2、 0.630%草酸溶液：准确称取草酸 6.3034g，用蒸馏水溶解后定容至1000mL3、 高锰酸钾标准溶液：称取 AR的高锰酸钾1.27g，用蒸馏水溶解后定容至1000mL 准确吸取0.630%草酸溶液10mL放入250ml锥形瓶中平行3份，参加蒸馏水50mL 再参加相对密度为1.84的浓硫酸10mL摇匀，在7080C水浴中保温5分钟，取出 后用高锰酸钾进行滴定。开始慢滴，待红色消失后再滴第二滴，以后可逐渐加快，边滴边摇，待溶液出现淡红色保持1分钟不变即为终点。计算高锰酸钾溶液的百分比浓度。

3、测定步骤1、供测试液的准备：准确称取茶叶磨碎样品 1g，放在250mL锥形瓶中，参加沸蒸馏 水80mL在沸水浴中浸提30分钟，然后抽滤、洗涤，滤液倒入100mL容量瓶中，冷 至室温，最后用蒸馏水定容至 100mL摇匀。2、测定：取200ml蒸馏水放入白瓷皿 中，参加0.1%靛红溶液5mL，再参加供测试液5mL开动磁力搅拌器，用已标定的高锰酸钾溶液边搅拌边滴定，滴定速度以1滴/S为宜，接近终点时应慢滴。直到溶液由深蓝色转变为亮黄色为止，记下消耗的高锰酸钾毫升数。同时做空白测定。 五、结果计算式中：X茶多酚的含量，% B空白消耗的高锰酸钾毫升数， mL/样品消耗的高 锰酸钾毫升数，mG -高锰酸钾

4、的浓度，% m样品的质量g, V1测定用供测试液 的体积， mL， V2- 供测试液的体积， mL酒石酸铁比色法原理：茶叶中多酚类物质占茶嫩梢干重的 20%35%，由约30种以上的酚类物质所组成，通称茶多酚。按其化学结构分为四类： 1儿茶素类，属黄烷醇类； 2黄酮及黄 酮醇类；3花白素及花青素，即羟基 -4-黄烷醇及其钾盐；4醋酸及缩酚酸 类。其中以黄烷醇类化合物最重要占多酚的 80%左右。纯儿茶素一般为白色无定 形粉末，在空气中极易氧化成棕色物，能溶于水、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯等 有机溶剂中。茶多酚能溶于水、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯，微溶于油脂。对热、酸较稳定， 2%勺溶液加热至120

5、C并保 持 30min，无明显变化。在碱性条件下易氧化变质。酒石酸铁能与茶多 酚 生成 紫褐色络合物 ， 络合物 溶液 颜色的 深浅与茶多 酚 的 含 量 成 正 比。因此可以用比色方法测定。该法可防止高锰酸钾滴定法所产生的人为视 咅冲¥觉误差。茶多酚的测定方法有高锰酸钾直接滴定法和酒石酸铁比色法，由于高锰酸钾直接滴 定法操作比拟复杂，且靠肉眼观察颜色判断终点，如果样品溶液颜色较深时，可能 影响测定结果。本实验将应用酒石酸铁比色法测定茶多酚的含量。仪器与试剂仪器：分光光度计试剂：(1)酒石酸铁溶液：称取 FeS04 7H201.000g含4个结晶水的酒石酸钾钠 5.000g，加蒸馏水

6、溶解后，用蒸馏水稀释至1000mL(2) pH7.5的磷酸缓冲液：60.2gNa2HPO4 12H2Q 5.00gNaH2RD4 2H2Q加蒸馏水溶解后.用蒸馏水稀释至 1000mL步骤(l )样品溶液的制备方法：准确称取茶叶磨碎样品 1g于200mL三角烧瓶中，参加 沸水80mL在沸水浴中浸提30min,然后过滤、洗涤，滤液倒人 100mL容量瓶中， 冷至室温，最后用蒸馏水定容至刻度，摇匀，备用。摇匀,再参加 pH7.5 磷酸缓冲液稀释至刻度。以蒸馏水代替样品溶液参加同样的试 剂作空白。选择540nm波长和1cm的比色杯测定吸光度。计算式中：3茶多酚的含量，% A样品溶液的吸光度值，T样品溶

7、液的总体积，mLV 测定用样品溶液的量，mL m-样品质量，g3.913 用1cm比色杯，当吸光度为1.0 时,试液中茶多酚的浓度为 3.913mg/mL说明及考前须知1、磷酸盐缓冲液在常温下容易生长霉菌,放冰箱中保存或临用时现配。2、样品溶液制备中的考前须知：( 1)较透明的样液,如果味茶饮料,将样液充分摇匀后,直接取样测定(2)较浑浊的样液，如果汁茶饮料、奶茶饮料等，称取充分混匀的样液25mL于 50mL容量瓶中，加95%勺乙醇15mL充分混匀，放置15min,用水定容至刻度，过滤(3)含有碳酸气的样液，如农夫汽茶，量取充分混匀的样液 100mL于250mL的烧杯 中，称取其总量，于电炉上加热至沸，在微沸状态下加热10min,以将二氧化碳排除， 放冷,用水补足原来的质量,摇匀,备用。测定准确吸取试液1ml，注人25mL的容量瓶中，加水4ml和酒石酸亚铁溶液5ml，充分 混合，再加pH7.5磷酸盐缓冲液至刻度，用10mm：匕色杯，在波长540nm处，以试剂 空白溶液作参比,测定吸光度 (A)高效液相色谱采用高效液相色谱法测定绿茶中茶多酚的含量。 在色谱柱为