HPV分型在宫颈癌检测中的意义

1、 宫颈癌宫颈癌全球聚焦v 宫颈癌成为发展中国家妇女健康和生命的“头号杀手头号杀手”v 宫颈癌的发病趋于年轻化，发病年龄一般在40-60岁v 2006年世界卫生组织指出：如不采取措施，未来10年内因子宫颈癌导致的死亡病例将上升25% 宫颈癌宫颈癌中国关注v 宫颈癌预防已纳入国家医改、重大公共卫生项目和十一五国家重大支撑计划宫颈癌与宫颈癌与HPVHPV昨日回眸宫颈癌与宫颈癌与HPVHPV昨日回眸宫颈癌成为目前癌症中： HPV HPV病毒学 HPV HPV基因结构HPV16早期区（早期区（E E区）区）含含6 6个基因，个基因，是维持病毒复制、是维持病毒复制、编码病毒蛋白、编码病毒蛋白、维持细胞内病

2、毒维持细胞内病毒高拷贝数的基因高拷贝数的基因晚期区（晚期区（L L区）区）含两个结构蛋白最保守的区域长控制区（长控制区（LCRLCR）E6E6 通过抑制p53p53而阻断凋亡E7E7 通过抑制pRB使细胞周期失控E2E2：负性调节E6和E7，维持凋亡和细胞周期的调控。病毒整合时会破坏E2基因的结构，导致失活E4E4：结合并破坏中表层细胞角蛋白网，形成中表层细胞的挖空外观L2:L2:次要衣壳蛋白抗体主要识别位点L1:L1: 主要衣壳蛋白，疫苗研发的主要成分 HPV HPV病毒分类 以病毒基因组中L1L1区区DNADNA同源性同源性作为分类依据：n 属：L1L1区区DNADNA同源性在同源性在60

3、%60%以下以下L1L1区区DNADNA同源性介于同源性介于60%70%60%70%L1L1区区DNADNA同源性介于同源性介于7171%89%89%L1L1区区DNADNA同源性介于同源性介于9090%98%98%L1L1区区DNADNA同源性大于同源性大于98%98% HPV HPVHPV分型 HPV HPV型别分布 HPV HPV型别分布HPV引发的癌症 HPV HPVHPVHPV与宫颈癌与宫颈癌感染途径HPVHPV与宫颈癌与宫颈癌HPV的入侵病毒通过皮肤或粘膜的微创口进入表层，然后感染基底层或副基底层细胞，并以附加体的形式在宿主细胞核内复制。病毒的复制依赖于上皮细胞的分化，在基底层上层

4、细胞中开始复制，在表皮细胞中装配，当这些表皮细胞脱落时，在皮肤表面可发现病毒颗粒。HPVHPV与宫颈癌与宫颈癌细胞、组织的改变一过性一过性HPV感染感染持续性持续性HPV感染感染正常宫正常宫颈颈感染感染清除清除HPV 感染感染演进演进消退消退癌前病癌前病变变癌癌浸浸润润 HPVHPV与宫颈癌与宫颈癌影响因子n 多个性伴侣多个性伴侣n 口服避孕药口服避孕药n HIVHIV、STISTI感染感染n 免疫缺陷免疫缺陷n 多产、密产多产、密产n 吸烟等吸烟等宫颈癌的筛查宫颈癌的筛查筛查现状宫颈癌的筛查宫颈癌的筛查筛查对象v 所有女性应在有性生活所有女性应在有性生活3 3年开始做宫颈癌筛查年开始做宫颈癌

5、筛查 （最晚不超过（最晚不超过2121岁）岁） 2009.1 NCCN子宫颈癌筛查临床实践指南 2003卫生部宫颈癌筛查及早诊早治指南v 高危妇女人群高危妇女人群：多个性伴侣、性生活过早、HIV/HPV感染、免疫功能低下、卫生条件差/性保健知识缺乏的妇女v 决定妊娠的妇女决定妊娠的妇女宫颈癌的筛查宫颈癌的筛查技术的发展1943年巴氏涂片应用于宫颈癌的筛查1988年TCT应用于宫颈癌的筛查2003年高危HPV(HC2)应用于宫颈癌的筛查(辅助)2004年中国指南HPV+TCT为最佳宫颈癌筛查手段2007年欧洲EUROGIN 推荐HPV作为宫颈癌筛查首选手段2011年HPV分型检测是国际公认最重要

6、的宫颈癌筛查手段2005年IARC/WHO推荐HPV检测可以用于宫颈癌筛查2006年HPV分型检测（凯普）应用于宫颈癌筛查宫颈癌的筛查宫颈癌的筛查巴氏涂片的应用v 对妇女健康作出很大贡献v 局限性: 取样误差 / 制片误差 / 读片误差v 敏感性差、假阴性率高（2%50%）、假阳性率高、漏诊多v 可重复性差，受阅片人主观影响正常高度病变HSIL低度病变LSIL癌变Cancer宫颈癌的筛查宫颈癌的筛查TCT的应用v 准确性97%v 敏感度低，尤其是腺体病变v 重复性差重复性差，没有改变传统的阅片方式，与人为主观因素相关宫颈癌的筛查宫颈癌的筛查HPV DNA检测细胞学检测细胞学检测HPV DNAH

7、PV DNA检测检测对细胞形态改变的检查手段对病原体检查手段针对结果，评估临床阶段针对病因，评估发病风险敏感性相对稍低敏感性高方法不易质控方法易于质控宫颈癌的筛查宫颈癌的筛查有充足的证据表明：HPV DNA检测可作为子宫颈癌的初筛手段，并可以降低子宫颈癌的发病率和死亡率。-IARC/WHO，2005HPV检测为首选宫颈癌的筛查宫颈癌的筛查HPV+TCT的应用欧洲生殖道感染和肿瘤组织（欧洲生殖道感染和肿瘤组织（EUROGIN)2007EUROGIN)2007年提出的宫颈癌筛查方案年提出的宫颈癌筛查方案宫颈癌的筛查宫颈癌的筛查HPV分型的应用HPVHPV分型检测分型检测临床应用vHPVHPV分型检

8、测用于分型检测用于区分一过性感染或持续性感染区分一过性感染或持续性感染HPVHPV分型检测分型检测临床应用vHPVHPV分型检测用于分型检测用于区分单一感染或多重感染区分单一感染或多重感染n 早期的文献报道，HPV的多重感染与宫颈癌直接相关n 现在越来越多的报道发现，HPV的多重感染与宫颈癌之间，不存在显著性的关系n 不同型别的致癌风险不同不同的高危型促进LSIL向SCC转变的能力有差异。 HPV16，18 的致宫颈癌风险性大于其他高危型HPV。HPVHPV分型检测分型检测临床应用vHPVHPV分型检测用于分型检测用于阴道镜适应征阴道镜适应征HPVHPV分型检测分型检测临床应用vHPVHPV分

9、型检测用于分型检测用于阴道镜适应征阴道镜适应征n 20092009年，美国阴道镜和宫颈病理学会（年，美国阴道镜和宫颈病理学会（ASCCPASCCP）发布了）发布了HPV HPV 基因分型检测指南，明确指出基因分型检测指南，明确指出: 30: 30妇女，细胞学未见上皮妇女，细胞学未见上皮内病变和恶性细胞，内病变和恶性细胞，; ;其他其他HPVHPV高危型高危型，则在，则在1212个月后重复个月后重复HPV DNAHPV DNA检测和细胞学检查。检测和细胞学检查。（American Society for American Society for ColposcopyColposcopy and

10、Cervical Pathology, and Cervical Pathology, 20092009）n 20102010年，年，杨英捷、赵健、毕蕙等人的研究数据表明，等人的研究数据表明，HPV31HPV31、3333的的致癌风险也很高，建议致癌风险也很高，建议HPV31HPV31、3333直接行阴道镜检测直接行阴道镜检测HPVHPV分型检测分型检测临床应用vHPVHPV分型检测用于分型检测用于ASCUSASCUS分层管理分层管理 NCCN 子宫颈癌筛查临床实践指南 (源自英文版V12009)指出：对发生在成年人的ASC-US&LSIL有3个可供选择的方案，可选择HPV-DNA检测

11、将患者分流、6个月复查细胞学或立即阴道镜检查。n 直接阴道镜检查或多点病理活检，引起创伤和过度诊治（40-60%）n 重复细胞学检查，有25%失访率，此外复检会增加病人经济及精神负担n HPV检测：为目前的最优方法。HPV检测阴性，可列入常规筛查人群；如HPV检测阳性，则考虑配合阴道镜检查HPVHPV分型检测分型检测临床应用vHPVHPV分型检测用于分型检测用于宫颈病变的随访宫颈病变的随访 宫颈病变治疗后失败失败的主要原因是同一基因型同一基因型HPVHPV的持续性感染的持续性感染n 社会因素：家族性遗传n 特性：宫颈解剖结构HPVHPV分型检测分型检测临床应用vHPVHPV分型检测用于分型检测

12、用于宫颈病变的随访宫颈病变的随访HPVHPV分型检测分型检测临床应用vHPVHPV分型检测用于分型检测用于指导疫苗的开发指导疫苗的开发n 针对针对衣壳蛋白（衣壳蛋白（L1L1）的的IgGIgG和和IgAIgA中和抗体在病毒感染的早期较为中和抗体在病毒感染的早期较为重要重要-预防性疫苗预防性疫苗n 针对针对早期基因（早期基因（E6/E7E6/E7）的细胞免疫反应对最终清除病毒可能更为的细胞免疫反应对最终清除病毒可能更为重要重要-治疗性疫苗治疗性疫苗n 根据不同地区根据不同地区HPVHPV型别的流行情况，开发有针对性的疫苗型别的流行情况，开发有针对性的疫苗34检测原理凯普凯普HPV21HPV21分型分型v PCRPCR，Polymerase Chain Reaction（聚合酶链式反应）v 导流杂交技术导流杂交技术（凯普自主创新技术） 高效、快