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1、第 51 页 共 51 页医学微生物学复习思考题参考答案绪论1、微生物的概念,微生物分哪三型八大类?微生物(microorganism):是存在于自然界的一大群体形微小、结构简单、肉眼直接看不见,必须藉助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍、数千倍,甚至数万倍才能观察到的微小生物。包括细菌、病毒、真菌等三类。按结构和组成不同,可分为三型八大类 非细胞型微生物:病毒 原核细胞型微生物(广义的细菌):包括细菌(狭义的细菌)、支原体、立克次体、衣原体、螺旋体及放线菌。 真核细胞型微生物:真菌第1章 细菌的形态与结构1、名词解释:细菌L型;中介体;质粒;芽胞 细菌L型:是指细胞壁缺陷型的细菌。1935年K
2、lieneberger首先在Lister研究所发现而得名。 中介体:细菌细胞膜向细胞质内陷、折叠、卷曲形成的囊状物,多见于G+菌。中介体参与细菌的分裂和能量的产生,有类似于真核细菌纺锤丝与线粒体的作用。 质粒:存在于细胞质中的带有遗传信息、控制细菌的某些特定遗传性状、能够自我复制的染色体以外的闭环双链DNA。或:细菌的胞质DNA。 芽胞:某些细菌在一定的环境条件下,胞质脱水浓缩,在菌体内形成一个圆形或卵圆形小体,是细菌的休眠形式,即为芽胞。其抵抗力强,衡量灭菌效果时,常以杀死芽胞作为判断指标。芽胞的大小、形态、位置等随菌种而异,有助于细菌鉴别。2、细菌的基本结构与特殊结构以及它们的主要功能、G
3、+菌与G-菌的细胞壁的比较。基本结构:细胞壁、细胞膜、细胞质、核质细胞壁的功能: 维持菌体的固有形态,保护细菌抵抗外界低渗环境; 参与菌体内外物质交换; 带有多种抗原,决定细菌的免疫原性。诱发机体产生免疫应答并与血清分型有关。 G-菌外膜是一种屏障结构,阻止某些抗生素的进入,成为细菌耐药的机制之一。 某些G+有表面蛋白、G-菌内毒素等与细菌的致病性有关。 与细菌染色性密切相关。细胞膜的功能: 物质转运; 生物合成; 细胞呼吸; 形成中介体,参与细菌分裂等。细胞质的功能:是细菌合成蛋白质和核糖核酸的场所;是细菌进行新陈代谢的场所。核质的功能:是细菌的遗传物质,控制细菌的各种遗传性状。细菌的特殊结
4、构:荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢。荚膜的功能: 抗吞噬作用 ; 黏附作用; 抗有害物质的损伤; 具有抗原性。鞭毛的功能: 是细菌的运动器官;有些鞭毛(如霍乱弧菌、空肠弯曲菌)与细菌的致病性密切相关; 具有抗原性,可籍此鉴定细菌及对细菌分类 菌毛的功能: 普通菌毛:细菌的黏附结构,与细菌的致病性有关。 性菌毛:介导接合,细菌的毒力、耐药性等性状可通过此方式传递 为某些噬菌体的受体。芽孢的功能: 根据芽孢形态、大小以及在菌体中的位置,有利于细菌的鉴别; 杀死芽孢为灭菌的可靠指标; 可以成为某些传染病潜在的传染源:芽孢本身不致病,但当它发芽转变为繁殖体后,可引起疾病。在人类,有四种常见的严重的传染病是由能
5、形成芽孢的细菌引起的炭疽杆菌、肉毒梭菌、破伤风梭菌和产气荚膜梭菌。革兰阳性菌与革兰阴性菌细胞壁结构比较如下:细胞壁 革兰阳性菌 革兰阴性菌组成 聚糖骨架、肽侧链和肽交桥 聚糖骨架、肽侧链结构类型 三维空间结构 二维平面结构强度 较坚韧 较蔬松厚度 厚,2080nm 薄,1015nm肽聚糖层数 多,可达50层 少,1层肽聚糖含量 多,占细胞干重5080% 少,占细胞干重520%磷壁酸 外膜 对溶菌酶、青霉素的敏感性 敏感 不敏感革兰染色性 紫色 红色3、简述细菌L型的形成、主要生物学性状及其临床意义。形成:细菌细胞壁的肽聚糖结构受到理化或生物因素(溶菌酶、溶葡萄球菌素、青霉素、胆汁、抗体、补体等
6、)的直接破坏或合成受到抑制后形成。G+菌原生质外仅有细胞膜包住称原生质体,G-菌尚有外膜保护称原生质球。主要生物学性状: 高度多形性; 着色不匀,大多染成革兰阴性; 培养条件要求高,必须在高渗低琼脂含血清的培养基中生长; 生长缓慢(27天),菌落呈荷包蛋样; 去除诱发因素后,有些L型可回复为原菌; 生化反应与原菌有明显差异; 存在于细胞壁的抗原减弱或丢失; 对作用于细胞壁的抗生素产生耐药性,而对作用于核酸或蛋白质合成的抗生素仍敏感。临床意义:可引起慢性和反复发作的感染,如尿路感染、骨髓炎、心内膜炎等,并常在使用作用于细胞壁的抗菌药物治疗过程中发生。4、试述某些抗生素(青霉素、溶菌酶、红霉素、链
7、霉素)的抗菌作用机制。青霉素的作用部位为:干扰四肽侧链与五肽交联桥之间的连接,使细菌不能合成完整的细胞壁,导致细菌死亡。溶菌酶的作用部位为:切断N-乙酰葡糖胺和N-乙酰胞壁酸之间的-1,4糖苷键的连接,破坏聚糖骨架,引起细菌裂解。 红霉素的作用部位:能与细菌核糖体上的50S大亚基结合,干扰蛋白质的合成,从而杀死细菌。链霉素的作用部位:能与细菌核糖体上的30S小亚基结合,干扰蛋白质的合成,从而杀死细菌。5、革兰染色的原理、方法、结果判断与临床意义。革兰染色原理: 通透性说:主要是由于两类细菌的细胞壁成分和结构的不同。革兰阴性菌细胞壁中含有较多类脂质,而肽聚糖含量较少。当用酒精脱色时,溶解了类脂质
8、,增加了细胞的通透性,使结晶紫和碘的复合物易于渗出,细胞脱色,经复染后,染上复染液(复红)的颜色;而革兰阳性菌细胞壁中肽聚糖含量多且交联度大,类脂质含量少,经酒精脱色后,肽聚糖层的孔径变小,通透性降低,酒精不易进入菌体脱色,故细胞仍保留初染液(结晶紫)的颜色。 化学说:G+菌菌体含有大量的核糖核酸镁盐,可与碘、结晶紫牢固结合,使已着色的菌体不易脱色。 等电点说:G+菌(PI2-3)低于G-菌(PI4-5),G+菌带负电荷比G-菌要多,G+菌易与带正电荷的碱性染料(结晶紫)结合牢固,因而不易脱色。革兰氏染色的步骤(方法)如下: 干燥 1min 1min 15-30s 涂片 结晶紫 卢氏碘液 95
9、%酒精 固定 水洗 水洗 水洗 30s1min稀石碳酸复红 待干后用油镜进行观察。结果判断:革兰阳性菌呈紫色,革兰阴性菌呈红色。革兰染色的临床意义: 鉴别细菌; 选择药物; 与致病性有关。第2章 细菌的生理1、名词解释:IMViC试验;热原质;细菌素;内毒素;外毒素;培养基;菌落;纯培养 IMViC试验:吲哚(I)、甲基红(M)、VP(V)及枸橼酸盐利用(C)四种试验,常用于肠道杆菌的鉴定,合称IMViC试验。如大肠埃希菌的结果是 :+ + - -;产气杆菌的结果是:- - + +。 热原质:又称致热原,是细菌合成的一种注入人体或动物体内能引起发热反应的物质。 细菌素(bacteriocin)
10、:P19某些细菌菌株产生的一类仅对近缘细菌具有抗菌作用的蛋白质称为细菌素。 内毒素(endotoxin):P18即革兰阴性菌细胞壁的脂多糖,其毒性成分为脂质A,当菌体死亡裂解后才释放,是革兰阴性菌的主要致病物质。 外毒素(exotoxin):P18是多数革兰阳性菌和少数革兰阴性菌在生长繁殖过程中释放到菌体外的蛋白质,其毒性强,为细菌重要的致病物质。 培养基(culture medium):由人工方法配制而成的,专供微生物生长繁殖使用的混合营养物制品称为培养基。 菌落:单个细菌在固体培养基上生长繁殖形成的单一的肉眼可见的细菌集团,称菌落。许 多菌落融合在一起形成菌苔。 纯培养:挑取一个菌落移种到
11、另一培养基中,长出的细菌为纯种,该方法称为纯培养。2、简述细菌生长繁殖的基本条件有哪些?为什么专性厌氧菌在有氧环境中不能生长繁殖?细菌生长繁殖的基本条件: 充足的营养物质:包括水、碳源、氮源、无机盐、生长因子等; 合适的pH值:大多病原菌的最适pH值为7.2-7.6; 适宜的温度:大多数病原菌的最适温度为37ºC; 必要的气体环境。专性厌氧菌不能在有氧环境中生长繁殖的原因: 缺乏Eh高的呼吸酶(细胞色素和细胞色素氧化酶); 缺乏分解有毒氧基团的酶(超氧化物歧化酶SOD、触酶、过氧化物酶) 3、细菌的合成代谢产物种类及其在医学上的意义? 与致病性有关的合成代谢产物:热原质/致 热原、毒
12、素和侵袭性酶; 供治疗用的合成代谢产物:抗生素、细菌素、维生素; 与鉴别细菌有关的合成代谢产物:色素。 4、细菌的生长曲线可分为几期?各自的主要特点是什么?细菌生长曲线:是将一定量的细菌接种于适宜培养基中进行培养,连续检测细菌在不同培养时间的活菌数目(以菌落形成单位cfu表示),以cfu为纵坐标,培养时间为横坐标,可以作出一条反映细菌生长数变化规律的曲线,即生长曲线。包括迟缓期、对数期、稳定期、衰退期这四个时期。 迟缓期:代谢活跃,菌体增大,积累酶、辅酶和中间代谢产物,不分裂繁殖,为细菌大量繁殖作好物质准备。 对数期:细菌繁殖迅速,菌数呈几何级数增长,细菌的生物学性状典型,对外界环境作用敏感,
13、适用于研究细菌的生物学性状和进行药物敏感实验,一般在培养后8-18小时。 稳定期:细菌数仍在增加,死菌数与活菌数形成一种动态平衡。其特点:形态、染色性等生物学性状常有改变;芽孢,毒素、抗生素等产生;若向培养系统补充营养物质,取走代谢产物,改善培养条件则可延长稳定期。 衰亡期:死亡菌数增多,超过活菌数,细菌形态显著改变,生理活动趋于停止。一般不用该期细菌作鉴定和研究工作。5、按物理性状不同可将培养基分哪几种?各有何主要用途?培养基按其物理性状可分为固体培养基、半固体培养基与液体培养基三种。分别观察下列生长现象: 固体培养基:细菌得以分离培养生成菌落从而获得纯种,主要用于细菌的分离和纯化。菌落分为
14、三型: 光滑型菌落(S型菌落); 粗糙型菌落(R型菌落); 粘液型菌落(M型菌落)。 半固体培养基:多用来检查细菌的动力和短期保存细菌。有鞭毛的细菌可由穿刺线向四周运动播散,培养后穿刺线模糊不清,呈羽毛状或云雾状混浊生长;无鞭毛的细菌,不能运动,仅沿穿刺线生长,穿刺线清晰,穿刺线以外的培养基仍透明澄清。 液体培养基:主要用于大量繁殖细菌和观察某些细菌的生化反应。细菌在液体培养基中生长呈三种状态。混浊生长,见于大多数细菌;沉淀生长;菌膜生长,多为专性需氧菌,在培养液表面生长,形成菌膜。6、按用途不同可将培养基分为哪几种?请各列出一种常用的培养基。 基础培养基:如营养肉汤、营养琼脂、蛋白胨水等 增
15、菌培养基: 通用增菌培养基:如血平板、血清肉汤等。 专用增菌培养基:如碱性蛋白胨水用于霍乱弧菌的增菌。 选择培养基:如SS平板、伊红-美兰琼脂平板、亚碲酸钾血琼脂平板、TCBS等。 鉴别培养基:如糖发酵管、双糖铁培养基等。 厌氧培养基:如庖肉培养基、硫乙醇酸盐肉汤等。7、根据细菌代谢时对分子氧的需求与否,可将细菌分为哪几类?根据细菌代谢时对氧气要求的不同,可将细菌分为专性需氧菌;微需氧菌;兼性厌氧菌;专性厌氧菌四大类。第3章 消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全1、名词解释:消毒;灭菌;无菌;无菌操作 消毒:杀死物体上或环境中的病原微生物的方法。但不一定能杀死含芽孢的细菌或非病原微生物。 灭菌:
16、杀灭物体上所有微生物的方法。灭菌比消毒要求高,包括杀灭细菌芽胞在内的全部病原微生物和非病原微生物。 无菌:不存在活的微生物的意思。 无菌操作:防止微生物进入人体或其他物品的操作技术。2、常用湿热灭菌方法的种类及其效果与适用范围。 巴氏消毒法:用较低温度杀灭液体中的病原菌或特定微生物(如结核杆菌)、保持物品中所需不耐热成分不被破坏的消毒方法。持续法: 61.1-62.8 30分钟;瞬间法: 71.7 15-30秒;常用于消毒牛奶、酒类。 煮沸法:常用于消毒食具、刀剪、注射器等繁殖体 :煮沸100,5min;芽孢:煮沸100,13h。 流动蒸气消毒法:阿诺蒸锅或蒸笼。繁殖体 :煮沸100,1530
17、min 间歇蒸气灭菌法:如血清培养基的灭菌。 高压蒸气灭菌法:一种最有效、最彻底的灭菌方法。在103.4 kPa(1.05kg/cm2)蒸气压下,温度121.3,维持15-20min,可杀灭包括芽胞在内的所有微生物。是普通培养基、生理盐水、手术敷料等耐高温、耐湿物品的最佳灭菌法。3、高压蒸汽灭菌法所要求的条件和用途各是什么?高压蒸气灭菌法是一种最常用、最有效的灭菌方法,是在密闭的蒸气容器中进行。随着压力升高,蒸气的温度也相应升高,在103.4kpa 蒸气压下,温度达到121.3,维持1520 min,可杀灭包括细菌芽胞在内的微生物。适用于耐高温、耐潮湿物品的灭菌,如一般培养基、生理盐水、手术用
18、品等。但该温度还不足以灭活朊粒和热原质。4、请叙述紫外线的杀菌作用机制、特点和注意事项。 紫外线(UV)的杀菌机制主要是损伤细菌DNA构型,使一条DNA链上相邻的两个胸腺嘧啶共价结合而形成二聚体,从而干扰DNA的复制与转录,导致细菌死亡。 特点与注意事项: UV的杀菌作用与波长有关:240-300nm波长的紫外线有杀菌作用,其中以265-266nm最强,因其正好与DNA的吸收光谱一致。 紫外线的穿透力极弱:不能透过玻璃或纸张等,故一般只用于空气消毒及物体表面消毒。 杀菌波长的UV对人体皮肤、眼睛有损伤作用,使用时应注意防护。 一般用低压水银蒸气灯做紫外线杀菌处理。5、化学消毒剂按其杀菌能力可分
19、为哪三大类?根据消毒剂杀灭微生物的能力不同,主要分为: 高效消毒剂(high-level disinfectants ):可以杀灭包括细菌的芽孢在内的所有微生物。适用于不能耐受热力灭菌,但要进入人体内部的物品,如内窥镜、塑料外科器材等的消毒。 中效消毒剂(intermediat-level disinfectants ):不能杀灭细菌芽孢,但能够杀灭细菌繁殖体(包括结核分枝杆菌)、真菌和大多数病毒。 低效消毒剂( low-level disinfectants ):能够杀灭多数细菌繁殖体和亲脂性病毒,对真菌也有一定作用,但不能杀灭细菌芽孢、TB和亲水性病毒。6、简述乙醇、碘酊、过氧化氢、过氧乙
20、酸、戊二醛、环氧乙烷消毒灭菌的主要特点。乙醇消毒灭菌的机制、特点及主要用途: 机制:去除菌细胞膜中的脂类,并使菌体蛋白质变性与凝固。 特点与主要用途: 以浓度为70% 75%时杀菌力最强。 易挥发,需加盖保存,定期调整浓度。 主要用于皮肤消毒和浸泡体温计。2.02.5%碘酊、0.5%碘伏:多用于皮肤黏膜、体温计以及其他物品的表面消毒。过氧化氢:机理:导致酶蛋白-SH基转变为-S-S-,导致酶活性丧失。3 6过氧化氢 kill most bacteria;10%过氧化氢 kill all microorganism including spore.用途:可用于物品表面和皮肤黏膜消毒(如口腔、创口
21、的消毒、厌氧菌感染的消毒)。但对金属制品有腐蚀作用。0.2%0.3%过氧乙酸:类似于过氧化氢。2%戊二醛:机理:细菌蛋白和核酸的烷化作用。特点:广谱,高效,快速。用途:戊二醛以0.3%NaHCO3调整pH至7.58.5, 配成2%水溶液,浸泡5min,适用于精密仪器、内窥镜(不能用热力灭菌法进行灭菌)等的灭菌。环氧乙烷:种类:杂环类化合物,沸点10.8,气体消毒剂。机理:细菌蛋白和核酸的烷化作用。特点:能穿透包裹物,广谱高效,杀灭芽胞,易燃,对人有毒性。用途:已广泛用于医疗器械、一次性用具的灭菌。常用的灭菌要求是浓度8001200mg/L;相对湿度55%60%;50 ;6h。7、请简要说明手术
22、室常规使用的消毒灭菌方法。 手术室空气及表面物体:紫外线杀菌法; 手术器械和物品:高压蒸气灭菌法; 手术后废弃物特别是传染病病人手术后的废弃物:焚烧法 参加手术的医务人员:刷手,然后用75%酒精浸泡手及前臂5min,若酒精过敏者,可使用0.05%0.1%新洁尔灭浸泡5min代替;或擦干后用0.5%碘伏涂擦,自然凉干。8、病原微生物实验室生物安全的核心是什么?病原微生物实验室生物安全的核心是防感染和防扩散。9、根据病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度,可将其分为哪四类?根据病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度,将病原微生物分为四类:第一类病原微生物是指能够引起人类或者
23、动物非常严重疾病的微生物,以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。 第二类病原微生物是指能够引起人类或者动物严重疾病,比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。 第三类病原微生物是指能够引起人类或者动物疾病,但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害,传播风险有限,实验室感染后很少引起严重疾病,并且具备有效治疗和预防措施的微生物。 第四类病原微生物是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。 第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物。10、化学消毒剂的杀菌机制有哪些?各自种类的代表是什么? 使菌体蛋白变性或凝固,导致细菌死亡:酚类(高浓度)、醇类、重金
24、属盐类、酸碱类、醛类 干扰细菌的酶系统和代谢:某些氧化剂、重金属盐类(低浓度)与细菌酶蛋白的-SH基结合而使有关酶失去活性,导致细菌代谢发生障碍而死亡; 损伤细胞膜,能降低菌细胞的表面张力并增加其通透性,胞外液体内渗,导致细菌破裂:酚类(低浓度)、表面活性剂、脂溶剂11、影响消毒灭菌效果的因素有哪些? 消毒剂的性质、浓度和作用时间消毒剂种类不同,其杀菌效果亦有很大差别,大多数浓度越高,杀菌效果越好,但醇类例外,作用时间越长,杀菌效果越好。 微生物的种类与数量:菌龄、有无特殊构造等。同种消毒剂对不同的微生物杀菌效果也不一致,且微生物数量越多,所需消毒的时间就越长。 温度、湿度:温度升高可提高消毒
25、效果。 酸碱度:酸碱度可影响消毒剂的杀菌效果。 有机物:环境中有机物的存在,可影响消毒剂的效果。生理盐水清洗污染创口表面。第4章 噬菌体1、名词解释:噬菌体;前噬菌体;毒性噬菌体;溶原性细菌 噬菌体:是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的病毒。 前噬菌体:整合在细菌染色体上的噬菌体基因。 毒性噬菌体:能在宿主细胞内复制增殖,产生许多子代噬菌体,并最终裂解细菌的噬菌体,称毒性噬菌体。 溶原性细菌:染色体上带有前噬菌体的细菌。2、毒性噬菌体增殖以何种方式增殖?它的增殖过程包括哪几个阶段?毒性噬菌体以复制方式增殖。它的增殖过程包括吸附,穿入,生物合成和装配、成熟与释放等步骤。3、温和噬菌体在宿主
26、菌内有哪几种存在状态?温和噬菌体的三种存在状态: 游离的具有感染性的噬菌体颗粒 宿主胞质内类似质粒形式的噬菌体核酸 前噬菌体 第5章 细菌的遗传与变异1、名词解释:转化;接合;转导;溶原性转换;耐药性突变;卡介苗(BCG) 转化:是供体菌裂解游离的DNA片段被受体菌直接摄取,使受体菌获得供体菌的遗传性状。(转化是指受体菌直接摄取供体菌游离的DNA片段,从而使受体菌获得供体菌的遗传性状的过程。) 接合:是细菌通过性菌毛相互沟通,将遗传物质(主要是质粒DNA)从供体菌转移给受体菌,使受体菌获得新的性状。 转导:是以温和噬菌体为载体,将供体菌的一段DNA 转移到受体菌内,使受体菌获得新的性状。 溶原
27、性转换:噬菌体感染细菌时,噬菌体作为供体,宿主菌染色体中整合了噬菌体的DNA片段,而获得新的遗传性状。 耐药性变异:细菌对某种抗菌药物由敏感变成耐药的变异称耐药性变异 卡介苗:卡-介二氏将有毒力的牛型结核分枝杆菌接种在含有胆汁、甘油、马铃薯培养基上,经过13年传230代,终于获得一株毒力减弱但仍保持免疫原性的变异株,即卡介苗。2、医学上重要的质粒的种类有哪些?简述质粒的主要特征。医学上重要质粒的种类: 致育质粒(F 质粒), 耐药质粒(R 质粒), 毒力质粒(Vi 质粒), 细菌素质粒:如Col 质粒, 代谢质粒。质粒的主要特点: 具有自我复制的能力; 编码产物赋予细菌某些性状特征:如sex
28、pilus 、细菌素、毒素和耐药性等; 可自行丢失与消除,非生命活动所必需; 质粒的转移性:可通过接合、转化或转导等方式在细菌间转移; 质粒的不相容性与相容性。3、细菌基因的转移与重组方式有几种?请简述普遍性转导与局限性转导的区别。细菌基因转移与重组的方式有:转化、接合、转导、溶原性转换和原生质体融合等。区别要点普遍性转导局限性转导转导发生的时期溶菌周期溶原周期转导的遗传物质供体菌染色体DNA任何部分或质粒供体菌DNA的特定部分转导的后果完全转导或流产转导受体菌获得供体菌DNA特定部位的遗传特性转导频率10-610-7较普遍性转导增加1000倍4、简述F+菌、F-菌、Hfr和F菌的区别以及F+
29、菌、Hfr和F菌的共同特点。F+菌:带有F质粒具有性菌毛的细菌,这种细菌可通过性菌毛将遗传物质传递给F-菌。F- 菌:不带有F质粒无性菌毛的细菌。Hfr:当F质粒进入受体细菌并将质粒DNA整合到染色体上,这种细菌称为Hfr (染色体上整合有F质粒的细菌) 。F质粒:从Hfr染色体上脱落下来的F质粒基因同时带有相邻的细菌染色体基因或DNA片段,称为F质粒。含F质粒的细菌称为F菌,它也能与F-菌接合,转移的是F质粒。F+菌、Hfr和F菌的共同特点是:三种菌都有性菌毛,均可通过接合方式进行基因转移。F+菌与F菌的主要区别是:F质粒可含染色体基因,F+菌的F质粒不含染色体基因。5、细菌基因突变的随机性
30、可通过什么实验得到证实?细菌基因突变的随机性可通过彷徨试验和影印培养得到证实。彷徨试验筛选噬菌体突变株,影印试验筛选耐药突变株。6、细菌的抗药性是否由抗生素诱导产生?用什么实验可以证明?细菌的抗药性不是由抗生素诱导产生,可用影印培养得到证实。耐药菌株并非是细菌为适应药物环境而产生的,而是耐药性突变早于药物出现之前就已存在,而药物只起了对某个环境中的细菌种群进行筛选作用,而非药物诱导突变。7、外毒素的产生受哪些遗传物质的控制?举例说明。外毒素的产生其遗传控制有三种情况: 大多数外毒素的产生由细菌染色体基因编码,如志贺毒素、百日咳毒素、铜绿假单胞菌外毒素A等; 由细菌某些质粒基因编码,如大肠杆菌肠
31、毒素(LT和ST)、破伤风痉挛毒素、炭疽毒素; 由溶原性细菌的噬菌体基因(前噬菌体)编码,如霍乱肠毒素、白喉外毒素、链球菌的致热外毒素。第6章 细菌的耐药性1、名词解释:耐药性;固有耐药性;获得耐药性;钝化酶 细菌耐药性:亦称抗药性,是指细菌对某种抗菌药物的相对抵抗性。 固有耐药性:细菌对某些抗菌药物的天然不敏感,亦称为天然耐药性。其产生机制:是由细菌的种属决定的,细菌缺乏药物作用的靶位。特点:始终如一。 获得耐药性:细菌DNA的改变导致其获得了耐药性表型。正常情况下,在原先对药物敏感的细菌群体中出现了对抗菌药物的耐药性,这是获得耐药性与固有耐药性的重要区别。 钝化酶:由耐药菌株产生的,能作用
32、于抗菌药物,使抗菌药物失去抗菌活性的酶类物质。2、简述抗菌药物的主要作用机制。 影响细胞壁的合成:青霉素,头孢菌素等。 影响细胞膜的合成:多粘菌素、两性霉素B(对细菌无效) 影响蛋白质的合成:30S亚基:氨基糖肽类、四环素类50S亚基:氯霉素、林可霉素、大环内酯类 影响核酸代谢:喹诺酮(抑制DNA螺旋酶)、利福平(抑制DNA:RNA聚合酶)磺胺类(结构类似对氨基苯甲酸PABA,竞争抑制二氢叶酸合成酶)3、由基因突变导致的耐药性与由R质粒导致的耐药性的特点分别是什么? 基因突变导致的耐药性的特点: 耐药性比较稳定; 多为对单一抗生素的耐药性; 发生耐药的是菌群中的个别菌。 R质粒决定的耐药性的特
33、点: 可在同种甚至异种细菌间经接合转移 可从宿主菌中检出R质粒 以多重耐药性常见 容易因质粒的丢失而出现敏感株 与抗生素使用密切相关 合理使用抗生素可减少R质粒所致的耐药性传播。4、简述细菌耐药性的遗传机制与生化机制。细菌耐药性的遗传机制:固有耐药性与获得耐药性。细菌耐药性的生化机制: 钝化酶的产生 药物作用靶位发生改变 抗菌药物的渗透障碍 主动外排机制 其他:细菌自身代谢状态的改变如休眠状态的细菌、营养缺陷的细菌都可出现对多种抗生素耐药。5、简述细菌耐药性的防治原则。细菌耐药性的控制策略有: 合理使用抗菌药物; 严格执行消毒隔离制度; 加强药政管理; 研制新的抗菌药物; 研制质粒消除剂,破坏
34、耐药基因; 采用抗菌药物的“轮休”措施。第7章 细菌的感染与免疫1、名词解释:正常菌群;菌群失调;重叠感染;微生态平衡;微生态失调;侵袭力;毒血症;脓毒血症;败血症;菌血症;交叉感染;环境感染。 正常菌群:定居于正常人体体表及其开放性腔道中的微生物群。在正常情况下对机体有益无害。由于在正常微生物群中以细菌为主,而且对细菌研究得较多而深入,所以将正常微生物群通称为正常菌群。 菌群失调症:宿主某部位正常菌群中各菌种间的比例发生较大幅度改变并超出正常范围的状态称为菌群失调。由此而引起的病症称为菌群失调症。 重叠感染:或称为二重感染,是一种后果较为严重的菌群失调症,即在抗菌药物治疗原感染性疾病或预防某
35、些微生物感染的过程中,发生的一种新感染。 微生态平衡:正常微生物群与其宿主生态环境在长期进化过程中形成生理性组合的动态平衡。 微生态失调:正常微生物群与其宿主之间的平衡在外界环境因素的影响下被破坏,由生理性组合转变成病理性组合状态。 侵袭力:致病菌能突破宿主皮肤、粘膜生理屏障等免疫防御机制,进入机体定居、繁殖和扩散的能力。 毒血症是指致病菌侵入宿主机体后,只在机体局部生长繁殖,病菌不进入血循环,但其产生的外毒素入血。外毒素经血到达特定的靶器官和组织,引起特征性的毒性症状。例如白喉、破伤风等。 脓毒血症是指化脓性细菌侵入血流后,在其中大量繁殖,并通过血流扩散到机体其他组织器官,产生新的化脓性病灶
36、。例如金黄色葡萄球菌(S. aureus)引起肝脓肿、肾脓肿、肺脓肿。 败血症是指病原菌侵入血流并在其中大量繁殖,产生毒性代谢产物(包括内毒素和外毒素等)所引起严重的全身性中毒症状。例如高热、皮肤和粘膜瘀斑、肝脾肿大等。 菌血症是指病原菌由局部入血,一过性从血流到达易感部位后再行繁殖而致病,例如伤寒早期有菌血症。 交叉感染:由患者之间及患者与医务人员之间通过密切接触而发生的直接感染,或通过生活用品等物质而发生的间接感染。 环境感染:因使用消毒不严或污染的医护用品、诊疗设备,以及通过外环境如微生物气溶胶而获得的感染。2、正常菌群的生理作用有哪些?正常菌群转化为机会致病菌的条件有哪些?(简要说明微
37、生态失调的主要原因有哪些?)正常菌群的生理作用: 生物拮抗; 营养作用; 免疫作用; 抗衰老作用; 抑肿瘤作用。正常菌群转化为机会致病菌的条件有(微生态失调的主要原因): 抗生素的使用导致菌群失调; 正常菌群寄居部位改变; 宿主免疫功能低下如免疫抑制剂使用、激素、射线照射、细胞毒物的使用导致宿主免疫功能低下。3、细菌性感染的发生与哪些因素有关?(细菌的致病机制如何?) 侵入体内的微生物(细菌)的数量 侵袭力:菌体表面结构与侵袭性酶等 侵入体内的微生物(细菌)的毒力 毒素:内、外毒素 侵入途径:呼吸道、消化道、皮肤(创伤)、血液、人畜共患病的传播(节支动物媒介传播)、性接触等 机体免疫力4、细菌
38、常见的黏附方式与黏附部位有哪些?细菌起粘附作用的结构有哪些?常见的黏附方式: 单个散在的吸附; 形成微菌落 形成生物膜黏附部位:皮肤黏膜上皮细胞(呼吸道、消化道和泌尿道粘膜);血液中的细胞/淋巴细胞;血管内皮细胞;生物医学植入物如中央 静脉插管、导尿管、人工心脏瓣膜、关节替代物等。起黏附作用的结构物质:黏附素细菌表面与黏附有关的蛋白分子。分类: 菌毛黏附素:存在于菌毛顶端的黏附蛋白。定居因子 非菌毛黏附素:细菌表面的其他组分。如外膜蛋白、脂多糖、G菌细胞壁的磷壁酸、表面蛋白(LTA-M,F-protein)、荚膜、微荚膜、支原体顶端结构、多糖等.黏附机制:细菌表面的粘附物质作为配体ligand
39、与宿主表面的受体相互作用而介导粘附作用的发生 黏附的意义: 通过粘附以免被气管上皮细胞的纤毛摆动、肠蠕动、尿液及分泌物冲刷清洗等作用所排出,是感染的第一步;细菌的黏附能力和致病性密切相关。 病原体表面分子或结构与宿主细胞特异的受体的结合,决定了病原体的组织嗜性,揭示微生物感染的致病机制的基础 。 是定植、繁殖,侵入和扩散或转移的基础。5、简述细菌生物被膜形成的意义? 有利于细菌抵抗微环境(niche)中的免疫细胞、免疫分子及药物的攻击。 克服液态流的冲击而持续生存潜伏感染。 细菌通过结合机制快速传递耐药基因,效率高于单个悬浮的万倍。 与许多慢性难治性细菌感染及医院内感染密切相关。 现代医源性感
40、染的重要原因。6、内毒素与外毒素的比较。区别点外毒素内毒素来源G+菌和部分G-菌G-菌存在部位从活菌分泌出,少数菌崩解后释出Cell wall成分,菌裂解后释出化学成分蛋白质,分子结构为A-B模式脂多糖稳定性60-80,30min被破坏160,2-4h才被破坏毒性作用强,对组织器官有选择性毒害效应,可分为神经毒素、细胞毒素和肠毒素三大类,引起特殊临床表现较弱,各菌的毒性效应大致相同,引起发热、白细胞增多、微循环障碍、休克、DIC等。抗原性强,刺激机体产生抗毒素;甲醛液处理脱毒形成类毒素弱,刺激机体产生的中和抗体作用弱;甲醛液处理不形成类毒素7、吞噬细胞吞噬作用的后果如何? 完全吞噬:病原体在吞
41、噬溶酶体中被杀灭和消化,未消化的残渣被排出胞外,此即完全吞噬。 不完全吞噬:某些胞内寄生菌或病毒等病原体在免疫力低下的机体中,只被吞噬却不被杀死,称为不完全吞噬。不完全吞噬造成细菌的扩散。 组织损伤:吞噬细胞在吞噬过程中,溶酶体释放的多种水解酶也破坏邻近的正常组织细胞,造成组织损伤。 提呈抗原8、简述细菌性感染的类型有哪些?全身细菌性感染类型有哪些?细菌性感染的类型有: 根据临床症状可分为:隐性感染、显性感染、。其中显性感染又可根据病情缓急分急性感染、慢性感染; 根据感染部位分:局部感染和全身感染,其中全身感染又可分为毒血症、内毒素血症、菌血症、败血症和脓毒血症。9、简述医院内感染的基本特点、
42、微生物特点。医院内感染的特点: 对象:病人(主要是住院病人),医护人员、病人家属。 地点:医院内。 时间: 患者住院期间,或出院不久发生的感染。 病原体: 较难确定,机会性致病菌为主,内源性感染多见,传染性弱。 感染途径:接触,如:侵入性诊疗技术。 治疗:较棘手。基本特点是:感染对象为医院内活动的所有人群;感染发生的地点必须在医院内。医院内感染的微生物特点: 主要为机会致病性微生物 常具有耐药性,部分还具有多重耐药性 常发生种类的变迁 适应性强10、细胞免疫对胞内寄生菌是如何发挥作用的? 抗体难以对细胞内寄生的病原菌发挥作用,故杀灭胞内寄生菌主要靠细胞免疫。 细胞内寄生菌进入机体后,一般先被吞
43、噬细胞吞噬而被杀灭形成不完全吞噬 特异性细胞免疫应答包括CD8+ T细胞和CD4+ T细胞。 CD8+ T细胞可通过释放穿孔素、颗粒酶等杀伤病原菌感染的靶细胞,当靶细胞被溶解,释放出的胞内寄生菌再由抗体等调理后由吞噬细胞吞噬杀灭。 CD4+ T细胞通过释放多种细胞因子如-IFN,能激活吞噬细胞使其吞噬杀菌能力大大增强,可将不完全吞噬转变为完全吞噬,即可将胞内寄生菌杀灭清除。第8章 细菌感染的检查方法与防治原则1、病原菌标本的采集与送检要注意什么?采集细菌标本的一般原则是: 无菌操作。避免杂菌污染标本; 因时取材。根据疾病特点采集不同标本(不同病期取不同标本);在采取局部病变标本处,不可用消毒剂
44、; 尽早取材。在使用抗生素之前采集,对已用抗菌药患者的标本,应注明药物名称; 因地取材。尽可能采集病变明显部位的材料; 标本必须新鲜。采集后尽快送检(多数细菌标本可冷藏保存或运送)。【附】病毒性疾病标本的采集与送检方法原则基本,病毒感染性疾病实验室诊断标本采取基本原则与细菌相似,即:早期采样,冷藏速送。但还要特别注意下列原则: 被杂菌或易受污染的标本,在进行分离培养时应该使用抗生素(加入高浓度青霉素、链霉素或庆大霉素处理); 标本的运输和保存:若标本采集地点离病毒实验室较远,可将标本置甘油缓冲盐水中低温保存送检; 进行病毒血清学诊断时,应采取双份血清即在发病初期和病后2-3w内各取一份血清,以
45、对比抗体效价变化。2、血清学诊断的概念、适用范围以及判断结果时应注意的问题。概念:用已知抗原检测病人血清或体液中未知抗体及效价的变化,可作为感染性疾病的辅助诊断。适用范围: 抗原性较强,病程较长的传染病的诊断; 调查人群对某一病原体的免疫水平; 调查疫苗接种后的预防效果;结果判断:单份血清抗体效价明显升高或双份血清,抗体效价呈4倍升高有诊断价值。影响因素:感染早期应用抗菌药物及年老、体弱、免疫功能低下等均可影响Ab效价的滴度。因此Ab效价低时不要轻易否定,而应密切结合临床表现,并根据其他检查结果进行综合分析后作出判断。3、对怀疑为细菌性痢疾的患者进行病原菌检查时,通常应采取哪些实验步骤? 取粪
46、便标本接种到SS平板上进行分离培养:挑取无色菌落进行生化反应与鉴定。 生化反应:IMViC、动力等 血清学试验:利用单价或多价痢疾杆菌免疫诊断血清进行菌群鉴定(玻片凝集试验、SPA协同凝集试验、荧光菌球法等)。第9章 球菌1、名词解释:-溶血;-溶血;抗O试验。 -溶血(-hemolysis)/乙型溶血:P143有些细菌在血琼脂平板生长繁殖,在菌落周围可形成一个24mm宽、界限分明、完全透明的无色溶血环。此种溶血环称为-溶血。 -溶血(-hemolysis):P143有些细菌在血琼脂平板生长繁殖,在菌落周围有12mm宽的草绿色溶血环,溶血环中的红细胞未完全溶解。此种溶血环称为溶血(甲型溶血)。
47、 抗O试验(ASO test):P147抗链球菌溶素O试验(ASO test)是一项检测患者血清中是否有链球菌溶素O抗体的中和试验,常用于辅助诊断风湿热。风湿热患者血清中抗O抗体比正常人显著增高,大多在250单位左右;活动性风湿热患者一般超过400单位。2、化脓性球菌有哪几种?各自的致病物质以及所致疾病的种类。种类:化脓性球菌包括G+的葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌和G-的脑膜炎球菌与淋球菌致病物质以及所致疾病葡萄球菌:金黄色葡萄球菌可以引起如下疾病: 侵袭性疾病:主要引起化脓性炎症,包括局部感染如疖、痈、毛囊炎、蜂窝组织炎,全身感染如败血症、脓毒血症等; 毒素性疾病:包括食物中毒、假膜性肠炎、
48、烫伤样皮肤综合征、毒性休克综合征等。毒力侵袭力外毒素1. 荚膜:抗吞噬、粘附到细胞或生物合成材 料表面如生物性瓣膜、导管、人工关节等2. 粘附因子:脂磷壁酸LTA 3. 侵袭性物质:SPA、血浆凝固酶、杀白细胞素、耐热核酸酶等 1. 葡萄球菌溶素2. 肠毒素3. 表皮剥脱毒素4. 毒性休克综合征毒素-1链球菌毒力因子构成 (pH值>5.4)(pH<4.5)侵袭力 1. 荚膜:抗吞噬、粘附 2. M蛋白:3. 粘附因子:脂磷壁酸LTA、纤维粘连蛋白结合蛋白FBP(F蛋白)等 4. 侵袭性物质 透明质酸酶 链激酶SK 链道酶SD外毒素1. 链球菌溶素2. 致热外毒素链球菌溶素O (SL
49、O)链球菌溶素S (SLS)A群链球菌引起的疾病有三类。 化脓性疾病:包括淋巴管炎、淋巴结炎、蜂窝组织炎、脓疱疮、扁桃体炎、咽炎、咽峡炎、产褥热、中耳炎等, 中毒性疾病:猩红热等, 超敏反应性疾病:风湿热(风湿性心脏病、风湿性关节炎)、急性肾小球肾炎等。肺炎链球菌致病物质: 荚膜; 肺炎链球菌溶素O; 脂磷壁酸; 神经氨酸酶。所致疾病:主要引起人类大叶性肺炎脑膜炎球菌致病物质:荚膜、菌毛和内毒素。荚膜能抗吞噬,菌毛可黏附于咽部黏膜上皮细胞表面,利于细菌进一步侵入;内毒素作用于小血管、毛细血管,引起坏死、出血,故出现皮下瘀斑和微循环障碍,严重败血症时可因释放大量内毒素导致DIC及中毒性休克而死亡
50、。所致疾病:引起脑脊髓膜炎(流脑)淋球菌致病物质:侵袭力(荚膜抗吞噬;粘附素在定植中起决定性的作用;外膜蛋白P破坏中性粒细胞、P与黏附作用有关、P可抑制抗体活性;IgA1蛋白酶:能分解破坏粘膜表面的IgA1抗体)所致疾病:淋病。表现为尿道炎、宫颈炎、淋病性咽喉炎、淋病性结膜炎(新生儿淋菌性眼结膜炎即脓漏眼1%硝酸银滴眼)、幼儿淋病性外阴阴道炎等。3、简述金黄色葡萄球菌鉴定的主要依据有哪些?金黄色葡萄球菌鉴定的主要依据有: 涂片、革蓝染色镜检:G+葡萄状排列的球菌。 血琼脂平板上分离培养:直径23mm、金黄色、光滑突起的圆形菌落,有时可见-溶血环。 主要生化鉴定试验:血浆凝固酶、耐热核酸酶、发酵
51、甘露醇等。4、简述从可疑金黄色葡萄球菌败血症患者中分离鉴定细菌的步骤、依据和报告。 取血液标本涂片革兰染色镜检:典型G+成堆排列的球菌;初步报告:“查见革兰阳性葡萄串状排列球菌,疑为葡萄球菌” 分离培养:血液标本先经液体培养基增菌培养68小时后再接种于血平板上,观察中等大小的典型S型菌落:直径23mm,金黄色、光滑突起的圆形菌落,有时可见-溶血环。 鉴定试验:H2O2试验、血浆凝固酶试验、耐热核酸酶试验、分解甘露醇等。上述试验阳性,结合临床可报告“金黄色葡萄球菌”感染。5、肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌的比较。菌名形 态菌 落胆汁溶菌试验Optochin敏感试验菊糖分解试验小白鼠毒力试验肺链G+
52、矛头状、成双排列、有荚膜脐窝状、草绿色溶血环+/+甲链G+圆形、短链、无荚膜针尖状、草绿色溶血环6、简述甲型溶血性链球菌的致病过程以及引起的主要病种。甲链是口腔及上呼吸道部位的正常菌群,随口腔破溃处进入血液并引起菌血症,随血流到达心脏,如果心瓣膜有损伤或有先天性缺陷,细菌则在损伤部位繁殖,引起亚急性细菌性心内膜炎。是一种条件致病菌引起的感染。7、金黄色葡萄球菌与A群链球菌引起的局部化脓性感染的特点各是什么?为什么?金黄色葡萄球菌引起的局部化脓性感染的特点:脓汁黄而粘稠,化脓病灶多为局限,且与周围组织界限清楚。这与色素和血浆凝固酶有关。A群链球菌引起的局部化脓性感染的特点:因本菌能产生多种侵袭性酶(透明质酸酶、链激酶、链道酶),故病灶有明显扩散倾向,与周围组织界限不清楚,脓汁稀薄,略带血色8、简述肺炎链球菌鉴定的主要依据。答案参考本章第5题。9、临床上流脑标本的采集与送检应注意什么?为什么?保暖、保湿、立即送检,培养基预温,最好床边接种。因抵抗力很弱。对寒冷、湿热、干燥、消毒剂、紫外线均敏感。室温3h即死,55 5min内被破坏。且能产生自溶酶。10、根据所学的知识,请列举出68种常见性传播疾病(STD)的病原体极其所致的疾病。 淋病淋病奈瑟氏菌 AIDSHIV(人类免疫缺陷病毒) 梅毒梅毒螺旋体 尖锐湿疣HPV(人乳头瘤病毒)
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