苯丙酮尿症课件

1、苯丙酮尿症 第二节第二节 苯丙酮尿症苯丙酮尿症苯丙酮尿症一、概况一、概况 发病率：我国为发病率：我国为1/11 0001/11 000，北方高于南方，北方高于南方 遗传病：常染色体隐性遗传性疾病遗传病：常染色体隐性遗传性疾病 病因：苯丙氨酸羟化酶缺陷病因：苯丙氨酸羟化酶缺陷 危害：严重的智能发育障碍危害：严重的智能发育障碍 可治疾病：需早诊断，早治疗可治疾病：需早诊断，早治疗苯丙酮尿症 苯丙酮尿症的历史苯丙酮尿症的历史(1)(1) 19341934年挪威医师年挪威医师FollingFolling用用FeClFeCl3 3检查智力检查智力障碍小儿障碍小儿, ,发现尿液呈绿色反应，并分离发现尿液呈

2、绿色反应，并分离出苯丙酮酸。出苯丙酮酸。 19381938年年FollingFolling发现这类病人血苯丙氨酸发现这类病人血苯丙氨酸浓度升高。浓度升高。 19471947年年JervisJervis发现正常人肝脏组织的上清发现正常人肝脏组织的上清液能将苯丙氨酸转变为酪氨酸，液能将苯丙氨酸转变为酪氨酸， PKU PKU病人病人肝组织不能。肝组织不能。苯丙酮尿症 苯丙酮尿症的历史苯丙酮尿症的历史(2)(2) 19531953年德国医师年德国医师BickelBickel首先报道用低首先报道用低PhePhe奶方奶方治疗治疗PKUPKU获得成功获得成功 19631963年美国年美国GuthrieGut

3、hrie医师首创细菌抑制法进行医师首创细菌抑制法进行新生儿筛查新生儿筛查 19761976年年LeemingLeeming发现第一例生物蝶呤合成酶发现第一例生物蝶呤合成酶PTPSPTPS缺乏缺乏 19831983年美国年美国WooWoo克隆了克隆了PKUPKU的致病基因苯丙氨酸的致病基因苯丙氨酸羟化酶，为基因诊断和产前诊断开辟了道路。羟化酶，为基因诊断和产前诊断开辟了道路。苯丙酮尿症苯丙氨酸代谢途径苯丙氨酸代谢途径苯丙氨酸苯丙氨酸酪氨酸酪氨酸PAHBH4多巴多巴多巴胺多巴胺BH4黑素黑素去甲肾上腺素去甲肾上腺素肾上腺素肾上腺素 同型香草酸同型香草酸（从尿中排出）（从尿中排出）PAH PAH 苯

4、丙氨酸羟化酶苯丙氨酸羟化酶BHBH4 4 四氢生物蝶呤四氢生物蝶呤苯丙酮尿症经典型经典型PKUPKU（ PAH PAH缺乏）发病机制缺乏）发病机制苯丙氨酸苯丙氨酸酪氨酸酪氨酸PAHBH4多巴多巴多巴胺多巴胺BH4黑素黑素去甲肾上腺素去甲肾上腺素肾上腺素肾上腺素 同型香草酸同型香草酸（从尿中排出）（从尿中排出）苯丙酮酸苯丙酮酸苯乳酸苯乳酸2 2羟苯羟苯乙酸乙酸苯乙酸苯乙酸苯丙酮尿症三、遗传方式三、遗传方式 常染色体隐性遗传病常染色体隐性遗传病 苯丙氨酸羟化酶基因位于第苯丙氨酸羟化酶基因位于第1212号染色体长号染色体长臂臂2 2区区2-42-4带带 患儿的父母是疾病的携带者患儿的父母是疾病的携带

5、者 子代发病的概率子代发病的概率2525苯丙酮尿症四、临床表现四、临床表现 出生时患儿正常，随着进奶以后，一般在出生时患儿正常，随着进奶以后，一般在3636个月时，即可出现症状，个月时，即可出现症状，1 1岁时症状明岁时症状明显。显。 1 1神经系统神经系统 早期可有神经行为异常，早期可有神经行为异常，如兴奋不安、多动或嗜睡、萎靡；少数呈如兴奋不安、多动或嗜睡、萎靡；少数呈现肌张力增高、腱反射亢进，出现惊厥现肌张力增高、腱反射亢进，出现惊厥( (约约2525) )，继之智能发育落后日渐明显，继之智能发育落后日渐明显，8080有脑电图异常。有脑电图异常。 苯丙酮尿症四、临床表现四、临床表现 BH

6、4BH4缺乏型的神经系统症状出现较早且缺乏型的神经系统症状出现较早且较严重，常见肌张力减低、嗜睡、惊厥，较严重，常见肌张力减低、嗜睡、惊厥，如不经治疗，常在幼儿期死亡。如不经治疗，常在幼儿期死亡。 苯丙酮尿症 2 2外貌外貌 因黑色素合成不足，在生后数月因黑色素合成不足，在生后数月毛发、皮肤和虹膜色泽变浅。皮肤干燥，毛发、皮肤和虹膜色泽变浅。皮肤干燥，有的常伴湿疹。有的常伴湿疹。 3 3其他其他 由于尿和汗液中排出苯乙酸，呈由于尿和汗液中排出苯乙酸，呈特殊的鼠尿臭味。特殊的鼠尿臭味。 苯丙酮尿症四、临床分类四、临床分类1.1.经典型经典型PKUPKU2.2.暂时性高苯丙氨酸血症暂时性高苯丙氨酸

7、血症 3.3.四氢生物蝶呤四氢生物蝶呤(BH4)(BH4)缺乏缺乏苯丙酮尿症 苯丙氨酸羟化酶活性为正常人活性的苯丙氨酸羟化酶活性为正常人活性的0 04%4% 具有经典型具有经典型PKUPKU的临床表现的临床表现 尿尿FeClFeCl3 3、DNPHDNPH试验强阳性试验强阳性 血血PhePhe浓度浓度1200umol/l(20mg/dl)1200umol/l(20mg/dl)1.1.经典型经典型PKUPKU苯丙酮尿症 由于苯丙氨酸羟化酶成熟延迟由于苯丙氨酸羟化酶成熟延迟 生后生后3 3个月后可出现轻度个月后可出现轻度PKUPKU的症的症状状 血血PhePhe浓度在浓度在2 2岁后下降至正常岁后

8、下降至正常 生长及智能发育可正常生长及智能发育可正常。2.2.暂时型暂时型PKUPKU苯丙酮尿症3.3.四氢生物蝶呤四氢生物蝶呤(BH4)(BH4)缺乏缺乏A.A.四氢生物蝶呤（四氢生物蝶呤（BH4BH4）是苯丙氨酸、酪氨酸、）是苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸羟化酶的辅基色氨酸羟化酶的辅基B.BH4B.BH4缺乏症是一种特殊类型的缺乏症是一种特殊类型的PKUPKU，又称恶，又称恶性性PKU.PKU.C.C.染色体隐性遗传染色体隐性遗传D.BH4D.BH4缺乏症临床类似缺乏症临床类似PKUPKU，易误诊，易误诊F.F.预后比预后比PKUPKU差，需特殊治疗差，需特殊治疗苯丙酮尿症五、五、PKUPKU的

9、实验室诊断的实验室诊断 PKUPKU典型症状出现后，诊断并不困典型症状出现后，诊断并不困难，但为时已晚，因一旦出现症状，难，但为时已晚，因一旦出现症状，常表示脑已有不可逆的损害，失去治常表示脑已有不可逆的损害，失去治疗时机。故应强调症状前诊断，即宫疗时机。故应强调症状前诊断，即宫内或新生儿期确诊，及时治疗。内或新生儿期确诊，及时治疗。苯丙酮尿症1.新生儿期筛查新生儿期筛查A: GuthrieA: Guthrie细菌抑制试验（半定量测定）细菌抑制试验（半定量测定） 喂奶三日，采集足跟末梢血，吸在厚滤纸上晾干，喂奶三日，采集足跟末梢血，吸在厚滤纸上晾干，放在含变异枯草杆菌的培养基上培养。放在含变异

10、枯草杆菌的培养基上培养。 阳性者阳性者（血苯丙氨酸（血苯丙氨酸0.24mmol/L0.24mmol/L），宜进一步），宜进一步测定血苯丙氨酸浓度以确诊；测定血苯丙氨酸浓度以确诊；苯丙酮尿症苯丙酮尿症2.2.酶学诊断酶学诊断 PAHPAH仅存肝细胞，肝活检检测肝细胞内仅存肝细胞，肝活检检测肝细胞内PAHPAH活性，活性，临床少用临床少用 经典型经典型PKUPKU： PAH PAH活性仅为正常活性仅为正常0-4.4%0-4.4%； 高苯丙氨酸血症：高苯丙氨酸血症：PAHPAH活性为正常活性为正常1.5%-34.5%1.5%-34.5%； 非经典型非经典型PKUPKU： DHPR DHPR、6-PT

11、S6-PTS、GTP-PHGTP-PH等酶活等酶活 性的检测可采用外周血红细胞、性的检测可采用外周血红细胞、 白细胞或皮肤成纤维细胞测定。白细胞或皮肤成纤维细胞测定。苯丙酮尿症(1).血浆苯丙氨酸浓度测定正常血正常血phephe浓度为浓度为0.060.18mmol/L(13mg/dL),0.060.18mmol/L(13mg/dL),意义：意义：A.A.若血若血phephe1.2mmol/L1.2mmol/L，可确诊，可确诊PKUPKU ；B.B.若血若血phephe浓度在浓度在0.241.2mmol/L0.241.2mmol/L之间，行苯丙氨酸负荷试验。之间，行苯丙氨酸负荷试验。苯丙氨酸负荷

12、试验：口服苯丙氨酸苯丙氨酸负荷试验：口服苯丙氨酸100mg/kg100mg/kg结果判断：结果判断：血血phephe1.2mmol/L1.2mmol/L，为经典型，为经典型PKUPKU；血血phephe仍为仍为 0.241.2mmol/L 0.241.2mmol/L，则为高苯丙氨酸血症。，则为高苯丙氨酸血症。苯丙酮尿症血浆苯丙氨酸浓度测定联合负荷试验：联合负荷试验： 口服口服L-Phe 100mg/kgL-Phe 100mg/kg，3 3小时后口服小时后口服BHBH4 4 200mg/kg200mg/kg，分别于，分别于0 0分钟、分钟、服服PhePhe后后3 3、7 7、1111小时后小时后

13、各抽血一次测各抽血一次测PhePhe浓度。浓度。结论：结论： 经典型经典型PKUPKU：血浆血浆PhePhe浓度不受浓度不受BHBH4 4负荷的影响，负荷的影响， PhePhe轻度下降；轻度下降； 非经典型非经典型PKUPKU：口服口服BHBH4 4 后后PhePhe明显下降。明显下降。苯丙酮尿症 (2).尿蝶呤图谱分析尿蝶呤图谱分析新蝶呤新蝶呤（NeoNeo）生物蝶呤生物蝶呤（ Bio Bio）N/BN/BBHBH4 4PAHPAH缺乏型（经典型缺乏型（经典型PKUPKU）DHPRDHPR缺乏型缺乏型PKUPKU6-PTS6-PTS缺乏型缺乏型PKUPKUGTPCHGTPCH缺乏型缺乏型PK

14、UPKU应用高压液相层析（应用高压液相层析（HPLCHPLC）法测定尿液中新蝶呤和生物蝶）法测定尿液中新蝶呤和生物蝶呤含量呤含量苯丙酮尿症(3).(3).尿筛查尿筛查对可疑的较大儿童进行初筛，特异性差；对可疑的较大儿童进行初筛，特异性差； 尿三氯化铁试验：尿三氯化铁试验：新鲜尿液新鲜尿液5mL5mL中加入中加入几滴几滴10%FeCl10%FeCl3 3；阳性：阳性：反应呈蓝绿色反应呈蓝绿色 尿尿2 2，4-4-二硝基甲苯试验（二硝基甲苯试验（DHPHDHPH）试验：）试验：阳性：阳性：黄色沉淀黄色沉淀阳性结果示往往为时已晚，失去治疗时机。阳性结果示往往为时已晚，失去治疗时机。苯丙酮尿症(4).

15、DNA(4).DNA分析分析应用染色体原位杂交技术应用染色体原位杂交技术 1. 1.PHAPHA基因定位于基因定位于21q22-24.121q22-24.1，突变位点达，突变位点达 300 300种以上，最常位于外显子种以上，最常位于外显子7 7； 2.GTP-PH 2.GTP-PH基因定位于基因定位于14q22.1-22.214q22.1-22.2； 3.DHPR 3.DHPR基因定位于基因定位于4p15.34p15.3； 4.6-PTS 4.6-PTS基因定位基因定位11 q22.3- 23.311 q22.3- 23.3苯丙酮尿症(5).(5).血浆游离氨基酸分析血浆游离氨基酸分析 清晨

16、空腹采血标本清晨空腹采血标本2mL2mL，立即分离血清后置，立即分离血清后置- -8080冰箱保存待检。冰箱保存待检。 可鉴别其他的氨基酸缺陷，可鉴别其他的氨基酸缺陷，PKUPKU血苯丙氨酸增血苯丙氨酸增高。高。苯丙酮尿症 表现为不同程度脑发育不良，表现为脑皮质表现为不同程度脑发育不良，表现为脑皮质萎缩和脑白质脱髓鞘变。萎缩和脑白质脱髓鞘变。3.3.头颅头颅CTCT和和MRIMRI：苯丙酮尿症 约约8080病儿有脑电图异常，表现病儿有脑电图异常，表现为高峰节律紊乱、灶性棘波等。为高峰节律紊乱、灶性棘波等。 评估智能发育程度。评估智能发育程度。4.4.脑电图脑电图5.5.智力测定智力测定苯丙酮尿

17、症 苯丙酮尿症的产前诊断步骤苯丙酮尿症的产前诊断步骤 智能落后智能落后 诊断、鉴别诊断诊断、鉴别诊断 其它病因其它病因 经典型经典型PKU PKU BH4BH4缺乏缺乏 遗传咨询遗传咨询 家系家系DNADNA分析分析, , 寻找基因突变寻找基因突变, , 联锁分析（微卫星）联锁分析（微卫星） 怀孕怀孕, , 绒毛膜或羊水细胞绒毛膜或羊水细胞DNADNA分析分析 结果分析与咨询结果分析与咨询产前诊断产前诊断苯丙酮尿症六、治六、治 疗疗 治治 疗疗 原原 则则 低苯丙氨酸饮食低苯丙氨酸饮食 开始治疗的年龄越小，预后越好，开始治疗的年龄越小，预后越好， 发病后治疗者可能减轻癜痫和行为异常发病后治疗者可能减轻癜痫和行为异常 对已存在的脑组织损害无明显改善对已存在的脑组织损害无明显改善 PhePhe是一种必需氨基酸，应保持血是一种必需氨基酸，应保持血PhePhe浓度浓度在在120120至至360mol/L