抗生素类药物分析学习教案

1、会计学1抗生素类药物分析抗生素类药物分析(fnx)第一页，共27页。 化学纯度较低活性组分易发生(fshng)变异稳定性差 3. 来 源4. 抗生素的特点(tdin)化学合成半合成生物合成（发酵）生产工艺复杂发酵(f jio)过程不易控制，易受污染原因第1页/共26页第二页，共27页。鉴别：物理化学方法、微生物法检查(jinch)：水分、异常毒性、热原、细菌内毒素、降压物质等含量/效价测定： 微生物法 ： 与临床疗效吻合，灵敏度高，但操作复杂费时； 理化方法： 准确度与专属性较高，且操作简便，但与临床疗效有偏差5. 抗生素质量(zhling)分析第2页/共26页第三页，共27页。 1. 化学(

2、huxu)结构包括(boku)青霉素类和头孢菌素类青霉素类：6-APA为母核 头孢菌素(tu bo jn s)类：7-ACA为母核中 国 药 科 大 学 药 学 院 药 分 教 研 室第3页/共26页第四页，共27页。酸性较强（pKa 2.5-2.8）临床(ln chun)常用其碱金属盐（水溶性好）酸性(sun xn)(羧基)有多个(du )手性碳旋光性青霉素类：苯环取代基头孢菌素类：母核有共轭结构UV（共轭）干燥条件较稳定，溶液不稳定稳定性(内酰胺)2、主要理化性质降解失效氧化剂、酸、碱酶、金属离子、青霉素第4页/共26页第五页，共27页。NH2OHHClNaOHFe3+H+茚三酮 碱性(j

3、in xn)酒石酸铜呈色反应3、鉴 别第5页/共26页第六页，共27页。4、检 查聚合物有关物质和异构体吸光度残留(cnli)溶剂结晶性第6页/共26页第七页，共27页。 5、含量(hnling)测定 -碘量法（ChP2000）原理：青霉素与头孢菌素本身不与碘反应，但其碱性降解产物(chnw)可消耗碘青霉素族头孢菌素(tu bo jn s)族NaOH水解4I2H +8I-I2+2Na2S2O3 2NaI + Na2S4O6定量过量剩 余第7页/共26页第八页，共27页。5、含量(hnling)测定 -碘量法（ChP2000）反应(fnyng)分两步进行：水解反应 (按化学(huxu)计算量进行

4、)氧化-还原反应 (无定量关系，受温度、pH值和时间等因素影响， 应严格控制反应条件并采用标准品平行对照测定)第8页/共26页第九页，共27页。5、含量(hnling)测定 -碘量法（ChP2000）因样品中杂质(zzh)会消耗碘，故应作空白试验。 加入(jir)样品，不加碱； 其余试剂（醋酸盐缓冲液，碘液，硫代硫酸钠）都要加碱。空白试验:空白试验与经典空白试验不同：第9页/共26页第十页，共27页。5、含量(hnling)测定 -碘量法（ChP2000）含量(hnling) 对照品V样空 - V样 W对 V对空 - V对 W样灵敏度高：样品(yngpn) : 碘 = 1 : 8反应条件、实验

5、操作要求高1份含量V对、V对空V样、V样空加试剂次序、反应时间、滴定速度相同 特 点：第10页/共26页第十一页，共27页。5、含量(hnling)测定 -电位(din wi)配位滴定法（汞量法）原理：青霉素不与汞盐反应，其碱性降解(jin ji)产物可与Hg2+络和。Hg2+OOHHRHHCNCCCSCONHCHCCOOHCH3CH3ROHHHCSCONHCCOOHCH3CH3HNCHg2+OHHCHCONHHOOCROCSCH3CH3CNHHg2+O方法说明： a、空白试验与碘量法类似，加样品，不加NaOH b、与碘量法相比，汞量法不需对照试验第11页/共26页第十二页，共27页。5、含量

6、(hnling)测定 -其他(qt)常用方法酸碱滴定法：应用(yngyng)广泛 硫醇汞盐法HPLC法：应用广泛咪唑HgCl2（max 324345nm）青霉素 青霉烯酸硫醇汞盐第12页/共26页第十三页，共27页。 1. 化学(huxu)结构都是以氨基(nj)环醇与氨基(nj)糖缩合而成的苷；分子结构中都含有多羟基；均为碱性抗生素；链霉素第13页/共26页第十四页，共27页。临床(ln chun)应用其硫酸盐碱性(jin xn)(氨基)（糖）：有多个(du )手性碳旋光性(糖)水 溶 性溶解度(氨基、羟基)强酸、碱条件均可水解稳定性(苷)2、主要理化性质第14页/共26页第十五页，共27页。

7、3、鉴 别茚三酮反应：具羟基(qingj)胺类，-氨基酸性质链霉素 + 水和茚三酮 蓝紫色链霉素 N-甲基葡萄糖胺 N-甲基葡萄糖胺（Elson-Morgan）反应(fnyng)：红 色水解对二甲氨基苯甲醛乙酰丙酮OH-NCHONCH3CH3+CH3CH3NCNHCH3CH3HNNCH+H+第15页/共26页第十六页，共27页。OH-重排Fe3+Fe/3OOCH3OOOCH3OH8-羟基(qingj)喹啉 NaOBrOH-水解坂口（Sakaguchi）反应(fnyng)：(链霉胍特有）链霉素 链霉胍 橙红硫酸盐反应或-萘酚第16页/共26页第十七页，共27页。4、检 查- 来 源：发酵(f j

8、io)中产生BP:薄层(bo cn)色谱法（杂质对照品法）要求：NC2 2000，C2a峰和C2峰的分离(fnl)度应符合要求，重复进样RSD2.0%链霉素中链霉素B的检查庆大霉素C 组分测定（系统适用性试验）色谱柱：ODS流动相： H2O-HAc-MeOH配制的庚烷磺酸钠溶液(0.2M)，必要时调节甲醇的含量。检测波长： 330nm（邻苯二甲醛柱前衍生）第17页/共26页第十八页，共27页。4、含 量 检 测氨基(nj)糖苷类 含量检测微生物法、HPLC法等第18页/共26页第十九页，共27页。 1. 化学(huxu)结构第19页/共26页第二十页，共27页。-OH：酸性N(CH3)2：碱性

9、(jin xn)与酸、碱均可成盐临床多用盐酸盐两 性旋光性易发生异构化，降解等反应(fnyng)，性质不稳定稳定性酚羟基(qingj)、烯醇基与Ca2+、Mg2+络合显色与金属离子络合2、主要理化性质UV和荧光第20页/共26页第二十一页，共27页。 2. 主要理化(lhu)性质碱 性 C环开环，形成(xngchng)内酯 异四环素弱酸性（pH2-6） A环C-4异构化 差向四环素酸性(sun xn)（pH 2） C环脱水 脱水四环素第21页/共26页第二十二页，共27页。OOHCONH2(CH3)2NOHHOOHCONH2N(CH3)2HOHAApH2.06.0差向异构体ROHCH3OHOO

10、HHRCH3OHOOHRCH3OHOHOH2ODDDCBBCBC脱水四环素类第22页/共26页第二十三页，共27页。ROHCH3OHROOHOOHCONH2NHOHCH3CH3CH3CH3ROHROOOHCONH2NHOHOCH3O异四环素OH-第23页/共26页第二十四页，共27页。 3. 鉴 别1）浓硫酸反应2）FeCl3反应： （酚羟基(qingj)） 显红色褐色3） TLC、HPLC4）荧光：（含共轭双键）紫外灯照射下产生不同颜色荧光HPLC法 4. 检 查TLC、HPLC法杂质(zzh)吸收度（降解产物颜色较深）残留溶剂 5. 含 量第24页/共26页第二十五页，共27页。内源性：药物自身(zshn)聚合物 来源于生产过程、贮存过程、使用不当外源性：蛋白、多肽、多糖及其与药物的结合物 来源于发酵过程临床应用其硫酸盐高分子杂质(zzh)凝胶色谱法：葡聚糖凝胶 Sephadex G-10杂质控制方法第25页/共26页第二十六页，共27页。NoImage内容(nirng)总结会计学。与临床疗效吻合，灵敏度高，但操作复杂费时。包括青霉素类和头孢菌素类。干燥条件较稳定，溶液不稳定。