不同产地黄精品种的成分分析

1、    不同产地黄精品种的成分分析    田迎秋 李玲 杨玉玲 黄玉玲 王春全 杨清松 蔡群虎摘 要：目的：对不同产地黄精品种进行多糖含量和浸出物测定，为黄精品种选育和种植奠定基础；同时对不同生长年限的滇黄精以及三年生滇黄精不同采收期的多糖含量进行比较，确定其适宜的采收期。方法：黄精浸出物按中国药典2015年版醇溶性测定法的热浸法测定，多糖含量采用硫酸蒽酮法测定。结果：产自云南文山的滇黄精（黄断面类型）的浸出物和多糖含量最高，分别为54.6%和24.62%；不同生长年限的滇黄精多糖含量以十年生滇黄精多糖含量最高，为35.83%；三年生不同采收期的滇黄精以

2、11月采收的多糖含量最高，为25.93%。结论：不同产地黄精的多糖和浸出物含量均有较大差异，滇黄精的生长年限和采收期影响多糖含量。关键词：滇黄精；多花黄精；鸡头黄精；浸出物；多糖；采收期黄精为百合科黄精属（liliaceae）多年生草本植物，有黄精（polygonatum sibiricum red.）、滇黄精（polygonatum kingianum coll. et hernsl.）和多花黄精（polygonatum cyrtonema hua）等，按形状不同，习称“鸡头黄精”、“大黄精”、 “姜形黄精”。具补肾益精、滋阴润燥之功，用于滋补强身和治疗肾虚精亏、肺虚燥咳以及脾胃虚弱之症已有

3、很长历史，是中医常用药物之一2，3。现代药理学研究表明其活性成分主要为黄精多糖（polygonatum sibiricum polysaccharides， psp），具有抗肿瘤、抗氧化、抗炎抗菌、调节血糖血脂、调节免疫、改善记忆力等功能5-11。并且黄精中的多糖含量普遍在10%以上，因此黄精多糖的研究对黄精的开发利用具有重要意义12。但当前已报告黄精多糖的研究大多是关于提取工艺的研究13。本研究主要对不同品种黄精进行多糖和浸出物含量的测定，为黄精品种选育及利用提供理论依据。同时对不同生长年限、3年生不同采收期滇黄精的多糖含量进行分析，确定适宜的采收期，为滇黄精的采收提供依据。一、 材料和仪器

4、1.材料从云南、贵州、四川、河北、内蒙古等5省的8个产地收集黄精新鲜块根样品8份；从云南广南采集一年、两年、三年、四年、五年、十年等不同生长年限的滇黄精块根（断面呈浅黄色类型，以下简称“黄断面类型”）6份；从云南文山对生长至第三年的滇黄精块根（种植时的块根重量约为400g，黄断面类型）按不同月份进行采集6份。样品洗净，切片，60微波干燥。试剂：无水乙醇、浓硫酸、蒽酮（以上试剂均为分析纯）。标准曲线所用标准品：葡萄糖。2.仪器万能粉碎机；电子天平；电热恒温鼓风干燥箱；hh-4数显恒温水浴锅；循环水真空泵；re-2000a型旋转蒸发仪；超声波清洗器；紫外可见分光光度计；双光束紫外可见分光光度计；离

5、心机；真空干燥箱；冷冻干燥机。二、 方法1.黄精口感的测定取等量干燥的黄精粉末，进行品尝，将口感的等级分为：微苦、微甜、甜、较甜。2.黄精浸出物的测定按中华人民共和国药典2015年版（以下简称中国药典）醇溶性测定法的热浸法测定，稀乙醇為溶剂。3.硫酸蒽酮法测定黄精多糖含量（1）对照品溶液的制备。取经105干燥至恒重的无水葡萄糖对照品33.10mg，精密称定，置l00ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml中含无水葡萄糖0.3310mg）。标准曲线的制备：精密量取对照品溶液0.1m1、0.2m1、0.3ml、0.4ml、0.5ml、0.6ml，分别置10ml具塞刻度试管中，各加水至

6、2.0ml，摇匀，在冰水浴中缓缓滴加0.2%葸酮硫酸溶液至刻度、混匀，放置冷却，后置水浴中保温10分钟，取出，立即置冰水浴中冷却10分钟，取出，以相应试剂为空白。按照紫外可见分光光度法（通则0401），在582nm波长处测定吸光度。以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。（2）供试样品溶液制备。取60干燥至恒重的本品细粉约0.2512g，精密称定，置圆底烧瓶中，加80%乙醇150ml，置水浴中加热回流1小时，趁热滤过，残渣用80%热乙醇洗涤3次，每次10ml，将残渣及滤纸置烧瓶中，加水150ml，置沸水浴中加热回流1小时，趁热滤过，残渣及烧瓶用热水洗涤4次，每次10ml，合并滤液与洗液，

7、放冷，转移至250 ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取1ml，置10ml具塞干燥试管中，加水至2.0ml，摇匀，在冰水浴中缓缓滴加0.2%葸酮硫酸溶液至刻度，混匀，放冷后置水浴中保温10分钟，取出，立即置冰水浴中冷却10分钟，取出即得。（3）空白样品制备。取水2.0ml，摇匀，在冰水浴中缓缓滴加0.2%葸酮硫酸溶液至刻度，混匀，放冷后置水浴中保温10分钟，取出，立即置冰水浴中冷却10分钟，取出即得。（4）波长测定。精密量取对照品溶液和供试品溶液各1ml，分别置10ml具塞刻度试管中，各加水至2.0ml，摇匀，在冰水浴中缓缓滴加0.2%葸酮硫酸溶液至刻度，混匀，放冷后置水浴中保温10分钟，取

8、出，立即放置于冰水浴中冷却10分钟，取出进行波长扫描。根据扫描结果可知，在582nm处有最大吸收，确定582nm为测定波长。（5）线性关系考察。精密量取对照品溶液0.1m1、0.2m1、0.3ml、0.4ml、0.5ml、0.6ml，分别置10ml具塞刻度试管中，各加水至2.0ml，摇匀，在冰水浴中缓缓滴加0.2%葸酮硫酸溶液至刻度，混匀，待冷却后置水浴中保温10分钟，取出，立即置冰水浴中冷却10分钟，取出，以相应试剂为空白。按照紫外-可见分光光度法，在582nm波长处测定吸光度。以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程y=0.0443x+0.1020，r=0.9992，结果表

9、明以无水葡萄糖为对照在33.10-199.84ug范围内有良好线性关系。（6）精密度实验。精密称取5份供试样品按标准曲线项下方法进行多糖含量的测定，观察其精密度，rsd为0.13%，仪器精密度良好。（7）稳定性实验。精密吸取供试样品溶液1h内，每隔10分钟按标准曲线项下方法测定样液吸光度，rsd=0.83%，表明供试样品溶液在一小时内稳定性良好。（8）加样回收率实验。取1ml样液三份，分别加入0.1、0.2、0.3ml标准溶液，加水补至2ml按标准曲线项下方法测定样液吸光度，平均回收率为100.29%，rsd=1.5%。三、结果与分析1.不同产地黄精口感的比较实验结果表明（表1），多花黄精、滇

10、黄精（黄断面类型）的口感均为味甜，鸡头黄精的口感为味微甜，滇黄精（断面呈浅白色，以下简称“白断面类型”）的口感为味微甜苦。2.不同产地黄精浸出物含量的比较不同地区黄精浸出物含量存在明显差异（表1），其中，云南文山滇黄精（黄断面类型）、河北承德的鸡头黄精、贵州遵义的多花黄精、云南玉溪的滇黄精（黄断面类型）4个地区的黄精浸出物含量相对较高，均在50%以上，其含量依次分别为54.6%、53.11%、52.1%、50.21%，云南文山产的滇黄精（白断面类型）的浸出物含量最低，为38.6%。3.不同产地黄精品种多糖含量的比较结果表明（表1），各个地区的黄精多糖含量均符合中国药典的含量要求，其中，云南文山

11、滇黄精（黄断面类型）的多糖含量最高，为24.62%，云南文山滇黄精（白断面类型）的多糖含量最低，为10.67%。4.不同生长年限滇黄精的多糖含量比较不同生长年限滇黄精的多糖含量存在明显差异，其中，十年生滇黄精多糖含量最高，为35.83%，其次为四年生，含量为 26.51%，最低为一年生，含量为9.82%。从检测结果看，所有样品的多糖含量均达到中国药典2015版的含量要求，并且随生长年限呈逐年增加的趋势，其中第三年至第五年的多糖含量增长缓慢，而第四年和第五年间没有明显差异。5.三年生滇黄精不同生长月份多糖含量比较三年生滇黄精不同生长月份的多糖含量存在差异，其中，11月采收的滇黄精多糖含量最高，为

12、25.93%，其次为1月份，其多糖含量为25.62%，5月和9月采收的滇黄精多糖含量分别为22.13%和25.93%，7月份的多糖含量最低，为21.41%。三年生不同生长月份的多糖含量均达到中国药典的含量要求。四、 讨论与结论黄精属于药典规定的大宗药材，同时也是药食两用的中药品种，全国多数省份均有种植，其中一些产区，目前主要是滇黄精产区主要靠野外采集和采集后人工种植的方式种植，因此，提前做好资源品种品质的鉴别，为今后选育新类型和新品种奠定基础变得十分必要。加之，黄精具有药食两用的归属优势，因此选育药效成分含量高的药用型品种和适口性好的食用型品种对黄精产业的发展具有长远意义。本研究选取七个产区的

13、三个品种及其不同类型进行分析，采用醇溶性测定法的热浸法测定黄精浸出物，采用硫酸蒽酮法测定黄精多糖含量，方法简单易行，结果准确可靠，精密度好。从分析结果看，滇黄精的生长年限和采挖期影响多糖含量，三年生和四年生黄精多糖含量均为25%左右，含量和产量均差异不明显，说明第三年可以作为多年生黄精块根的一个采挖期。而就采挖月份看，三年生滇黄精最适宜的采挖期分别为11月和翌年1月，因为冬季黄精进入休眠期，没有发芽和开花等生长旺盛过程，营养成分都富集在地下部分的块根中，并且冬季雨水少，块根含水量也较低，多糖含量较高。实验结果表明，三年生冬季采挖的不同黄精品种或类型，其多糖含量和糖分类型均存在差异，值得一提的是

14、，一些类型的断口面成色与其多糖的类型存在相关性，在本研究中，我们发现，断口面呈黄色或微黄色的，其甜味和适口性均比断口面呈白色的好，推测可能是由于前一种类型含小分子糖较多，而后一种类型含大分子糖较多的原故。在后期的研究中，可以加大对这两种类型的鉴别，进一步选育出药用型品种和食用型品种的滇黄精，为后期开发不同类型的食品、保健品和药品等新产品提供原料而奠定基础。参考文献：1 国家药典委员会. 中华人民共和国药典：2015年版.一部m.北京：中国医药科技出版社， 2015：306-307.2 焦劼，陈黎明，孙瑞泽，等. 不同产地黄精主要化学成分比较及主成分分析j.中药材，2016，39（3）：519-

15、522.3 贾向荣，焦劼，马存德，等. 不同土壤水分含量对黄精生长及多糖含量的影响j.中药材，2017，9（40）：2007-2012.4 cheng ming-en，wang de-qun. anatomical structure and histochemical localization about rhizomes of five species of polygonatumj. chin j chin materia med，2013，38（13） ：2068-2072.5 李麗，田丽娜，任振兴，等. 黄精多糖的结构分析及功能活性研究进展j.中国实验方剂学杂志， 2015（15）：

16、231-234.6 陆建平，张静，张艳贞. 黄精多糖的功能活性及应用前景j.食品安全质量检测学报， 2013， 4（1）：273-278.7 方园. 黄精多糖和低聚糖的分离与结构解析d.江南大学，2011.8 zhang x h，geraldo b j h，zhao r g t，et al. determination of relative molecular mass and composition for polygonatum sibiricum polysaccharide by high performance liquid chromatographyj.chin j chromatogr，2005，23（4）：394-396.9 张峰，高群，孔令雷，等. 黄精多糖抗肿瘤作用的实验研究j