药敏试验指导下肝癌及肝癌腹腔积液治疗的疗效观察

1、药敏试验指导下肝癌及肝癌腹腔积液治疗的疗效观察摘耍冃的:观察药皱试验指导下的肝病及肝癌腹腔积液化学治疗的治疗效果。方法： 将性别、年龄与肿瘤类型、分期、腹腔积液录相同的肝癌患者配对，并将配对病例随机分入 实验组与对照组。釆用mtt法体外检测腹腔积液肿瘤细胞的药物敏感性，实验组选用含肿瘤 抑制率较高药物的联合化疗方案，对照组釆用联合应用5-氟尿咳喘、顺舘、表阿霉素方案， 对两组患者进行全身化疗和腹腔内化疗。结果：24对配对患者的研究结果显示，实验组腹腔 积液治疗有效率为87. 50%,对照纽腹腔积液治疗有效率为70. 83%,两纽腹腔积液治疗有效 率无显著性卷异(p>0. 05)；实验纟r

2、肿瘤治疗有效率为5& 33%,对照组肿瘤治疗有效率为 33. 33%,实验组肿瘤治疗冇效率高于对照组(p0.05)。结论：药物敏感性试验指导下的肝 癌化疗其肿瘤治疗的有效率高于常规方法用药。关键词药敏试验；肝癌；癌性腹腔积液中图分类号r735. 7文献标识码a 文章编号11673-7210 (2009) 02 (a) -033-03observation on the effect of the treatment with the chemotherapy selected by drug sensitivity assay in liver cancer and m alignan

3、t ascitesyuan xiao-linl, li zhi-min2, jin shi-yul, zhang chun-leil, zhang xiu-lin3, yang zhenl(1. the affi 1 iated zhongshanhospital of dalian univorsity, dalianl 16001, china; 2. dalian central hospital, dalianll6023, china; 3. dalian no. 3 hospital, dalianl16011, china)abstract objective: to obser

4、ve the effect of the treatment with the chemotherapy selected by drug sensitivity assay in liver cancer and m alignant ascites. methods: the criteria of a matched-pair included patients，age, sex, stage of cancer and the amount of ascites. patients of a matched-pair were selected into experimental gr

5、oup and control group randomly. drug sensitivity was tested with mtt method. patients of experimental group were treated with the chemotherapy selected by drug sonsitivity assay, and the patients of control group were treated with combination therapy of 5-fu, ddp and epirubicin. results: among the 2

6、4 matched-pair patients, the ascites response rates of experimental group and control group were 87.50% and 70.83% respectively, it showed no statistical difference between the two groups (p>0. 05). meanwhile the tumor response rate of experimental group was 58. 33%, which was significantly highe

7、r than 33.33% of control group (p<0.05) . conclusion: the response rate of chemotherapy selected by drug sensitivity assay is higher than that of combination therapy of 5-fu,ddp and epirubicin in liver cancer treatmentkey words drug sensitivity assay; liver cancer; m alignant ascites腹腔积液是晚期肝癌的并发症

8、，目前普遍认为脱落的癌细胞在腹腔内的增殖或腹膜上的 种植所形成的癌性腹膜炎是腹腔积液产牛的主要原因，杀伤肿瘤细胞或抑制肿瘤细胞的增殖 是肝癌腹腔积液治疗的重耍内容z。临床多采用腹腔闭式引流巧腔内化疗或腔内肿瘤细胞 杀伤笏物输注联合应川等手段杀伤腹腔内的肿瘤细胞。腔内化疗的全身毒副作川较弱，但时 常因肿瘤细胞对所使川的化疗药物敏感性较低，而使治疗效果受到很人彩响。釆川腹腔积液 中分离到的肿瘤细胞进行药物敏感性试验，选择敏感的化疗药物进行腔内和全身治疗对于癌 性腹腔积液治疗和延长患者的生存期具启重要意义。木文对药敏试验指导下的晚期肝癌治疗 的临床效果进行观察。1资料与方法1.1 一般资料病例均取白

9、20032007年大连市第三人民医院和本院收治的肝癌并发腹腔积液的患者 48例，年龄4176岁，平均58岁。所有病例均为细胞学检查诊断为肝癌。将性別、年龄、 肿瘤的类型、肿瘤的tnm分期和腹腔积液量相同的患者配为一対，并随机地将:其分入対照组 和实验纽。实验纽治疗方法：根据药敏试验结果，选用含肿瘤抑制率较高药物的联合化疗方 案，进行全身化疗和腹腔内化疗；对照组治疗方法：联合应用5-氟尿唏噪、顺钳、表阿霉素 进行整体化疗和腹腔内化疗。对照组与实验组的药物应用剂量均按标准用量执行。配对病例 腹腔积液的排放量排放次数、利尿剂的使用及其用量等背景治疗均相同。1. 2腹腔积液的采集与肿瘤细胞的分离腹腔积

10、液患者在局麻卜行腹腔闭式引流，将腹腔积液引流至无菌的容器中，加肝索至终 浓度10 u/mlo取50 ml腹腔积液于ependorf离心管中,1 000 rpm离心10 min,弃上清。 在沉淀中加入5 ml hanks液混匀,并将细胞悬液缓慢加入到装有2 ml ficol 1-hypque淋巴 细胞分离液的离心管中,2 000 r/min离心20 min,取肿瘤细胞层加入到另一离心管中,hanks 液洗3遍，rpmi1640全基（含10%胎牛血清、100 u/ml青霉素和100 u/ml链霉素）调成 lx105cell/ml 备用。1. 3化疗药物敏感性试验方法1将细胞悬液加于96孔细胞培养板

11、，100 口1/孔。实验孔分别加入i卩氨蝶吟、氏春新碱、 表阿霉素、顺钠、卡钳、vp16、5-氟尿唏咙及紫杉醇等化疗药物（药物用rpmi1640培基稀释）, 5 p1/孔，并使上述药物的终浓度分别为 1、0.003 5、0.875、1.5、0. 005、1. 5、1. 5、0. 002 7 mg/ml；对照孔每孔加5 ul rpmi 1640培基。培养板置于5% c02、37°c条件下培养56 h。 每孔加入20 ul mtt （5 mg/ml）,继续培养4 ho 1 000 r/min离心10 min培养板，吸弃上 清100 p1/孔,加入二甲基亚m 100 u1/孔,混匀。540

12、、640 run双波长测0d值，计算抑 制率。抑制率二（1-实验孔0d值/对照孔0d值）x100%o14疗效评价4腹腔积液治疗效果的评价，根据who疗效判定标准进行判定，显效（cr）：渗液消失，持 续4周以上；冇效（pr）:渗液显著减少，持续4周以上；无效（nc）：未达上述指标者即渗液 无减少或增加。幣体治疗效果评价：分别于治疗前和用药后4周行ct检查，疗效按who标准 判定，即完全缓解（cr）、部分缓解（pr）、无变化（nc）和进展（pd）。1. 5统计学方法采用x2检验。2结果2. 1腹腔积液治疗的临床疗效24例患者采用依据药敏试验选择的化疗方案治疗以后，腹腔积液完全缓解8例，部分缓 解1

13、3例，无效3例，有效率为87.50%。常规药物治疗组，腹腔积液完全缓解10例，部分 缓解7例，无效7例，有效率为70.83%,两组有效率无显著性差异（p>0. 05）,见表1。表1癌性腹腔积液的治疗效果比较（例）2. 2肿瘤治疗效果评价实验组中，无肿瘤完全缓解病例，肿痫部分缓解14例，无效8例，进展2例，冇效率为 5& 33%。对照组屮，无肿瘤完全缓解病例，肿瘤部分缓解8例，无效11例，进展5例，有 效率为33. 33%0实验组有效率高于对照组，有显著性差片(p<0. 05),详见表2。表2全身治疗效果比较(例)3讨论腹腔积液2, 3的出现是肝癌进入晚期的重要标，忐z-。肝

14、功能允许的条件下，此期肝 癌的治疗仍可以病因治疗为主同时辅以対症治疗方案进行治疗。目而多采用联合药物腹腔内 化疗和全身化疗，这种治疗方法能最人程度地杀灭原发病灶、腹腔内和转移的肿瘤细胞，从 而达到抑制肿瘤的生长和控制病情进一步发展的目的。由于肿瘤细胞对药物的敏感性爰异很 大，采用相同化疗方案治疗同类型肿瘤的不同患者时，其治疗效果冇明显不同。对患者的肿 瘤进行体外肿瘤细胞药物敏感性试验,根据肿瘤细胞的化疗药物敏感谱制定个体化化疗方案, 必然是肿瘤化疗的发展趋势4。从本项研究结果nj见，约敏试验指导下的个体化化疗方案与 常规方案治疗的有效率分别为5& 33%和33. 33%,个体化方案治疗

15、的有效率明显高于常规方案 (p0. 05),在肿瘤的治疗上个体化方案的治疗效來优于常规治疗方案。在腹腔积液的控制上, 两种方案治疗都冇较好的治疗效果，个体化化疗方案与常规治疗方案的肿瘤治疗的冇效率分 别为83. 33%和75. 00%,个体化化疗方案与常规方案治疗腹腔积液的有效率无统计学羌异(p >0. 05),提示肝癌患者腹腔积液的产牛不单是山于癌细胞在腹腔中的分裂增殖造成的，在肝 癌腹腔积液的治疗上杀伤肿瘤细胞不是唯一的手段。影响常规化疗方案治疗效果的因素主要是肿瘤细胞的化疗药物敏感性的差异引起的，而 临床使用的肿瘤化疗常规方案,大多是经过临床循证研究获得的对某种肿瘤冇效的治疗方案,

16、 这些方案对多数肿瘤患者有一定程度的疗效，而对有的患者却毫无效果5。肿瘤的界质性很 强，不同患者的同一类型的肿瘤以及同一个肿瘤内的细胞其细胞的牛物学特性也不尽相同， 这些特性包括细胞的表型和药物的嫩感性。肿瘤对各种化疗药物存在着明显的个体差异，不 同的肿瘤类型、同一肿瘤类型的不同患者以及同一患者在不同的发病阶段，对化疗药物的敏 感性并不完全相同，采用同一方案对同一肿瘤类型的不同患者治疗势必产生不同的治疗效果, 导致总有效率降低。采用药敏试验指导下的化疗在一定程度上减少了约物选择的盲口性，最 大限度地杀伤肿瘤细胞、减轻临床症状，从而使治疗的冇效率提高。本项研究谿敏试验的方 法采用的是mtt法，该

17、法是国内外普遍采用的肿瘤化疗药物的敏感性检测方法，多屮心的临 床研究证实该法有较高的临床符合率，实体瘤的体外实验结果和体内药物治疗效果上的一致 性大，检测的结果准确性高。同时腹腔积液中肿瘤细胞的存活条件与体外细胞培养的条件相 近，实验结果更能够反映体内的实际情况，药敏试验结果的指导性更强。肝癌患者腹腔积液 的产牛机制比较复杂，肿瘤细胞腹膜种植形成癌性腹膜炎导致淋巴管通透性加强6,可导致 液体的渗岀加强；肝癌导致肝功能障碍使蛋口质合成减少，血液的胶体渗透压降低也可引起 腹腔积液形成，同时山于肿瘤压迫，使淋巴循环障碍都可导致腹腔积液形成。在腹腔积液形 成的初期，采用排放腹腔积液、口服利尿药物及控制

18、液体摄入等手段都会起到较好的治疗效 果。初步研究结果显示，根据肿瘤细胞化疗药物敏感性试验制定的个体化化疗方案的肿瘤治 疗的有效率高于常规化疗方案,预示约物敏感性试验指导下的化疗将可能有良好的应用前景。 木项研究是一个阶段性报道，存在观察病例少、时间短等缺陷，进一步的深入研究将为该方 法应用可行性的准确评价提供科学依据。参考文献1yamaue h, tanimura h, tsunoda t, et al. chemosensitivity testing and highly purified fresh human tumor cell with the mtt colorimetrie assayjeur jcancer, 1991,27:1258-1263.2 卢玉梅.难治性门脉高压腹水的治疗j.中国现代医生,2008, 46(10) :31-32.3 孙彦，姜彬，倪立新，等.难治性腹水超滤浓缩静脉回输36例报道j.中国现代医 生,2008,46(7) : 156.4 von hoff dd, sandboach jf, clark gm, et a