阿司匹林原料含量测定及有关物质检查

1、阿司匹林原料及肠溶片冇关物质和含虽:测定方法比较（中国药典（2005）和中国药典（2010）, 要求结合人家药物分析实验和课木知识及药典内容进行比较，说明各方法的原理及比较方法 的优缺点一、阿司匹林结构及理化性质1. 结构cooh2. 理化性质阿司匹林为固体，具有一定的熔点。在水中微溶或几乎不溶，而能溶于乙 醇、乙瞇、三氯卬烷等冇机溶剂中，根据溶解行为的差异可作为供试品溶液 的配制或含量测定时滴定介质选择的依据。（1）酸性：阿司匹林的结构中具有竣基，pka=3.49水溶液显酸性，并能与碱发生中和反应。（2）具侑酚耗基：阿同肚林结构中都具有潜在的酚拜基，可与铁盐试液作用显色。可用于鉴别试验。（3

2、）具有酯结构：阿司匹林结构屮具有酯结构，在碱性条件卜可水解产生酚疑基和竣酸盐。阿司匹林原料药的含量测定1、阿司匹林原料测定（2005版）:直接滴定法（2010年版阿司匹林原料测定与2005版的相同）阿司匹林的含量测定方法：取木品约0.4g,精密称定，加中性乙醇（对酚瞅指示液显中 性）20ml溶解后，加酚駄指示液3滴,用氢氧化钠滴定液（0.1mol/l）滴定。每伽i氢氧 化钠滴定液（0.1mol/l）相当于18.02mg的c9h8o41. 直接滴定法原理：阿司匹林中具竣基，在一定条件下与氧氧化钠反应。测定阿司匹林含量的反应式如下：coohcoonapococha+naoh （| -ococh3+

3、h2o中国药典（2005年版）阿司匹林的含量测定方法为：取本品约0.4g,精密称定，加中性乙醇（对酚瞅指示液显中性）20ml溶解后，加酚瞅指示液3 滴，用氢氧化钠标准滴定溶液（o.lmol/l）滴定。1ml的氢氧化钠标准滴定溶液（0.1mol/l）相当于18.02mg的阿司匹林（c9h8o4） o滴定度：1ml naoh 滴定液（0.1mol/l）三 0.1 mmolnaoh三0.1 mmol阿司匹林三0.1x180.16mg阿司匹林三18.02 mg阿司匹林含量测定结果计算公式为：v©供试品含量c%）=x100%wx1000式中v样品消耗的氢氧化钠滴定溶液的体积，ml；t滴定度，m

4、g / ml；f-氢氧化钠滴定溶液的浓度校正因子；w_待测药物的称样量，go原理：阿司匹林结构中有游离竣基，显酸性，pka36。coohcoona(qpococh3+naohococh3+h2o优点：简便、快速。缺点：酯键水解干扰（不断搅拌、快速滴定）；酸性杂质干扰（如水杨酸（因本法缺乏专属性，易受酯键水解产物水杨酸和醋酸干扰）注：适用范围：不能用于含水杨过高或制剂分析，只能用于合格原料药的含量测定。1、乙醇的作用：邙可司匹林在水中微溶，但易溶于乙醇）乙醇溶解阿司匹林；防止阿司匹林在水溶液中滴定过程易水解2、溶剂用中性乙醇的原因：乙醇对酚醯指示剂显酸性，可消耗naoh而使结果偏 高，故在使用前

5、需用氮氧化钠屮和至对酚瞅指示剂显屮性。（中性乙醇：对指示剂（酚酥） 而言为中性，可消除滴定误差）3、滴定应在不断振荡下稍快进行，以防止局部浓度过大，致使阿司匹林酯水解4、温度在0-40°c对测定结果无显著影响。5、指示剂（酚駄）：阿司匹林与氢氧化钠形成强碱弱酸盐，碱性区显色，ph8.22、水解后剩余滴定法原理：阿司匹林中酯结构，在碱性溶液屮易于水解，加入过量标准碱滴 定液，加热使酯水解，剩余碱用酸冋滴。2naoh2naoh ： h2so4 ch3coonaa na?so44 2h2olmol naoh三 mol阿司匹林lmol h2so4= 2 mol naoh方法:取本品1.5g,

6、精密称定加氢氧化钠滴（0.5mol/l） 50.0ml,混合, 缓缓煮沸lomin,放冷，加酚駄指示液，用硫酸滴定液（0.25mol/l）滴定剩 余的氢氧化钠。并将滴定结果用空口试验校止。每lml氢氧化钠滴定液（0.5mol/l）相当于45.04mg的阿司匹林实验组：称量 > （过量定量）naoh滴定"剩余）“罗日硫酸滴定（消耗体积v）空白组：（过量定量）naoht硫酸滴定液滴定（消耗体积v。）平均片重（呂） 标不量（g）x 100%naoh 滴定度(t) =0.5x180.16 x l/2=45.04(mg/ml)（vft_v）xtxf供试品含量（幻二wx1000（v:样品测

7、定吋消耗硫酸滴定液体积（ml） vo：空白试验吋消耗硫酸滴定液的体积（ml） t:滴定度w：供试品称样量（g） f:硫酸滴定液浓度校正因子冃滴定液实际浓度/滴定液规定浓度）优点：消除了酯键水解的干扰缺点：酸性杂质干扰注：进行空白校正（不加样品或等量溶剂）的原因：消除c02的干扰。（碱液在受热时 易吸收c02,牛成碳酸盐，当用酸冋滴时，算滴定液消耗的体积会偏小，使测定结果偏 小，故需空白校正。）阿司匹林有关物质检查阿司匹林的合成工艺：coonaonacooh(ch3co) 2o+ ch3cooh1、阿司匹林屮的“有关物质”系指除“游离水杨酸”外的合成原料药苯酚及其他合成副产 物，如醋酸苯酯、水杨

8、酸苯酯、水杨酸水杨酸、水杨酸酊、乙酰水杨酸苯酯、等杂质。(chico)/)水杨（u水杨般乙就水杨酰水杨酸oh 人（：（）（川 q(chjcohooh水杨酸苯酯乙酰水杨酸苯酯ohohocochj6is酸苯苗(ch)co)/)typ水杨酸if在2005版药肌当中，并没有单独列出有关物质的检查力法，只通过检查原料药的澄清度从而 间接的来检査有关物质的限量。溶液的澄清度检杏碳酸钠试液屮不溶物。不溶物杂质有未完全反应的酚类，或水杨酸精制 时由于温度过高，产生脱竣副反应的苯酚，以及合成工艺过程小由副反应牛成的醋酸苯酯、 水杨酸苯酯和乙酰水杨酸苯酚等。这些杂质均不溶于碳酸钠试液，i佃阿司匹林可溶解。利用 溶

9、解行为的差异，由一定量阿司匹林在碳酸钠试液中溶解应澄清來加以控制。原理根据oh水杨酸苯酣 水杨酸苯酯乙rtl水场酸苯酯这止匕杂质与阿司1兀林的酸性强弱，利用它们在碳酸钠溶液屮的溶解度旁异，规定一定最样品在碳 酸钠溶液中应澄清。方法取木品0.50g,加温热至约45°c的遞酸蚀试液10ml溶解后，溶液应澄清。而2010版药典当中不仅检查了药物的澄明度，还利用了 hplc进一步 的量化了朵质的限量。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙睛四氢咲喃冰醋 酸水(20： 5： 5： 70)为流动相a,乙脂为流动相b,按下表进行线性梯度洗脱；检测波 长为276nmo阿司匹林峰

10、的保留时间约为8分钟，理论板数按阿司匹林峰计算不低于5000, 阿司匹林峰与水杨酸峰分离度应符合要求。时间(分钟)流动相a (%)流动相b (%)0.0100 060.02080测定法取该品约o.lg,精密称定，置10ml最瓶中，加1%冰醋酸甲醉溶液适最，振摇 使溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液；精密量取供试品溶液lml, g 200ml量瓶 中，用1%冰酰酸甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，即得对照溶液；精密量取对照溶液10ml,置 100ml ®瓶中，用1%冰醋酸卬醇溶液稀释至刻度，摇匀，即得灵敏度试验溶液。分别精密 量取供试品溶液、对照溶液、灵敏度试验溶液及水杨酸检杳项下的水杨

11、酸对照品溶液各10卩1, 注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液色谱图屮如显杂质峰，除小于灵敏度试验溶液屮 阿司匹林主峰面积的单个杂质峰、溶剂峰及水杨酸峰不计外，其余各杂质峰面积的和不得大 于对照溶液主峰峰面积（0.5%） o方法hplc梯度洗脱，主成分自身对照法（0.5%） 色谱柱：ods流动相:a：乙膳四氢咲喃冰醋酸冰（20:5:5:70）b：乙睛检测波长：276nni原料药：供试品溶液：001g/nil对照溶液：005mg/mla：阿司匹林供试品（10mg/ml）： b： 0.5°o自身对照（5opg ml）；c： 0.05%自身对照（灵敏度试验d：水杨酸对照（lopg/ml）

12、； e：空白1：阿司匹林；2：水杨酸；3：乙酰水杨醸水杨酸有关物质：除水杨酸峰外，其他各朵质峰而积的和不得大于对照溶液主峰而积（0.5%） 2005年在有关物质检查时未使用hplc很人可能是因为当时hplc不够普及，而使用澄明度 发检查是简单快捷且便宜的方法，但该方法只检查了无竣基杂质如苯酚、醋酸苯酯、水杨酸 苯酯，而水杨酸水杨酸、水杨酸阡等含竣酸的杂质并不能检查到，而由于每个人的眼睛对 澄清的鉴别界限不同，作为定性检查灵敏度也是不够的；而hplc的使用则增加了选择性和 灵敏度，但同时也增加了成本和实验耍求。附：高效液相色谱的优点是：检测的分辨率和灵敏度高，分析速度快，重复性好，定最精度 高，应用范围广。适用于分析高沸点、大分子、强极性、热稳定性差的化合物。其缺点是: 价格昂贵，要川各种填料柱，容量小，分析牛物人分子和无机离子困难，流动相消耗大且有 毒性的居多。三、总结通过上述分析发现，阿司匹林原料药与其片剂的检验方法是不同的，比如