BET-48G细菌内毒素分析仪操作规程1

1、天大天发BET-48G系列细菌内毒素分析仪操作规程1. 仪器组成及开机1. 1仪器组成细菌内毒素测定仪主机、计算机、打印机、EasyBET软件。1. 2 .试验环境要求安装在没有明显空气流动的洁净的工作间，无菌、无尘、低温。1. 3开机 打开细菌内毒素测定仪主机的电源开关，打开计算机，启动EasyBET软件。2操作方法2. 1软件启动，双击软件图标打开软件，软件首先搜索内毒素测定仪，找到后显示该仪器 的型号。如果仪器未联机则不能进行检测操作。2. 1. 1用户登录 登录过的用户选好检验员，输入密码，点击确定即可进入；没登录过的 用户输入检验员名称，设置好密码点击【添加新检验员】即可进入。图12

2、. 1 . 2进入主画面 待仪器右上角温度显示为37± 0.3 C时，即可进行试验设置和检测。f IUIL:Ms'Zi.xTlETr-Iffl M|握二夢世中右-熱E養li聲 *-冋两«1圧«慣歩才卷空右鼬戦字«1整jRrt 展学 H更豹|型世邙W內|*強Bi内武航2. 2标准曲线的可靠性试验2. 2. 1标准品系列浓度溶液准备在进行标准系列的制备时，2至10倍的稀释方法都可以使用，将细菌内毒素标准品用细菌内毒素检查用水按等比例稀释（如2倍稀释，5倍稀释等，制备成一个至少包含三个标准浓度的标准系列溶液，例如，0.5、0.25、0.125、0.06

3、、0.03Eu/ml系列或5、1、0.2、0.04Eu/ml系列），每个标准浓度在检测时最少要做三个平 行管，稀释步骤参照凝胶法标准品稀释步骤。2. 2 . 2检测软件设置用鼠标点击【新试验】出现【试验设置向导】画面，首先填写鲎试剂批号、内毒素批号、检查用水批号，选中【做新标准曲线】，填写初始浓度、稀释梯度、浓度点数、平行管数，然后用鼠标点击【自动设置标准曲线】，在表格中出现所设置的数据。鼠标点击【阴阳性对照】画面，选中【阴性对照】图3，填写平行管数,图4鼠标点击【试管位置选择】，点击【自动选择】后点击【开始检测】，程序设置完毕，该文件存在【检品管理中心】的标准曲线内，该标准曲线以【鲎试剂批号

4、】+【内毒素批号】+【当前时间】作为文件名存盘，也可在画面底列【保存文件名】处改动，自行输入名称， 但要事先建好该文件夹。出现如下画面:LEkLCDDLDDhtTwftvurni 卬伺®.下网祐 2hi.1.ri f/w t ijg tHFE.arvEIT,当前打幵迪吕丈件l的的幣蛊、馬世曲 tHS.Tja._n | Kma連折准曲匏 j*空白？MS 了血惮 .DL 1 IQ LIM叼思生镰；LgT-i+bLflC+tLflC*2+dLs|C*3曲曲舉I<&脸空X 1贰林内耳I jE：-KfH# 回 D3KI簧gwwet I"护时间ko5gHd:1冲*塀准 T

5、肘集好准 飞话卓圻准集好准 飞轲卓圻准7冲霰塀准 飞制集例t T血察塀堆IWffi7nF|FFFn> II索皿融】 h F F r F F F FF 丽口W I厂P 口F： SXT-KB 昭CmZETEARH-dbVTXJSL£:05®匕；1科二 n电玄1±手:ffi "幻口 “北些£ 題 403 >=o=图5该文件存在【检品管理中心】的标准曲线内。该标准曲线以【鲎试剂批号】+【内毒素批号】+【当前时间】作为文件名存盘，也可在画面底列【保存文件名】处改动，自行输入 名称，但要事先建好该文件夹。2. 2. 3试验检测223.1 溶解分

6、状装鲎试剂根据用量溶解鲎试剂，如使用多支鲎试剂，将溶解的鲎试剂混合在一起，分装到无热原的仪器专用检测管内，每支检测管内0.1ml （要求没有气泡）。223.2 加样取稀释好的内毒素系列浓度溶液，根据所设定管数分别加入有鲎试剂的小试管中0.1ml，注意加样前应混合溶液30秒，且每个浓度点加样前应更换加样头。另取细菌内毒素检查用水做阴性对照。2.2.3.3 检测每个浓度点在加完样后应立即用封口膜封口，放入细菌内毒素测定仪设定 位置，仪器自动开始检测。 待标准曲线最后一个浓度的 ODf直超过预设值后，用鼠标点击【手动停止检测】，停止数据采集。点击标准曲线坐标画面，生成并储存标准曲线，计算出相关 系数

7、。223.4 试验报告打印 点击【报告打印预览】，在报告打印预览画面点击【打印】即可。图62. 3供试品干扰预试验2. 3. 1供试品溶液制备：将供试品溶液用细菌内毒素检查用水稀释成所选择的系列浓度， 同时制备系列浓度的供试品阳性管和阳性管，供试品阳性管外加内毒素标准品浓度和阳性管标准品浓度相同，标准品浓度为所选用标准曲线的中间浓度。2. 3. 2检测软件设置用鼠标点击【新实验】出现试验向导画面，首先填写鲎试剂批号、内毒素批号、检查用水批号，点击【供试品设置】，选择供试品名称，所做供试品管的稀释倍数；填写供试品批号、 稀释倍数（所选择的系列浓度最小稀释倍数）、平行管数。选中【回收率管】，填写外

8、加内毒素浓度、供试品稀释组数、稀释梯度，点击自动设置，在表格中 出现所设置数据，例如【稀释倍数】为 10;【供试品稀释梯度】为 2;【供试品稀释组数】为 4。那表格显示供试品10 , 20, 40, 80四个稀释倍数下回收率管及供试品管的试验设置。如 测定单一浓度的试验，【供试品稀释组数】填写【1】。图7鼠标点击【阴阳性对照】画面，选中【阴性对照】，填写平行管数，选中【阳性对照】，填写平行管数。鼠标点击【试管位置选择】点击【自动选择】后点击【开始检测】，程序设置完毕。文件存在所选的【供试品名称】目录下，以【供试品批号+当前时间】为该试验文件名。标准曲线试验可以和供试品试验一同进行，在软件设置时

9、，进入新试验画面后，首先按 照标准曲线试验设置（222），再进入供试品设置（232 ）。233试验检测根据用量溶解鲎试剂，如使用多只鲎试剂将溶解的鲎试剂混合在一起，分装到无热原的仪器专用检测管内，每只检测管内0.1ml （要求没有气泡）。取稀释好的供试品系列浓度溶液、供试品阳性系列溶液、阳性标准品溶液，根据所设定平行管数分别加入 有鲎试剂的小试管中 0.2ml （没有气泡），注意加样前应混合溶液 30秒，且每个浓度点加样 前应更换加样头。另取细菌内毒素检查用水做阴性对照，每个浓度点在加完样后应立即用封口膜封口，放入分析仪设定位置，仪器自动开始检测。试验完成后，用鼠标点击【手动停止 检测】，停止

10、数据采集。在【标准曲线】处选择标准曲线后，计算机自动计算出结果。2. 3. 4试验报告打印：鼠标点击【报告打印预览】，在报告打印预览画面点击【打印】即可。2.4供试品检查测定2.4.1供试品溶液制备 根据干扰预试验结果，将供试品稀释到无干扰浓度，同时制备该浓 度的供试品阳性溶液和阳性标准品溶液，供试品阳性溶液外加内毒素标准品浓度和阳性标准品浓度相同，标准品浓度为所选用标准曲线的中间浓度。2.4.2检测软件设置点击【新试验】出现试验向导画面，首先填写鲎试剂批号、内毒素批号、检查用水批号，点击【供试品设置】，选择供试品名称，所做供试品管的稀释倍数；填写供试品批号、稀释倍数平行管数。选中【回收率管】

11、，填写外加内毒素浓度、供试品稀释组数、【供试品稀释组数】填写“ 1”。，点击自动设置，在表格中出现所设置数据。如果 有两个或两个以上批号供试品同时检测，在第一个批号设置完成后，更改供试品批号，点击自动设置，重复以上步骤至所有批号供试品设置完成。如果有两个或两个以上不同供试品同时检测，在第一个批号设置完成后，更改供试品名称、批号、稀释倍数，点击自动设置，重 复以上步骤至所有供试品设置完成。鼠标点击【阴阳性对照】画面，选中【阴性对照】，填写平行管数，选中【阳性对照】，填写平行管数。鼠标点击【试管位置选择】，点击【自动选择】后点击【开始检测】，程序设置完毕。文件存在最后设置的【供试品名称】目录下，

12、以【供试品批号+当前时间】为该试验文件名。图82.4.3试验检测2.4.3.1 溶解分装鲎试剂根据用量溶解鲎试剂，将溶解的鲎试剂混合在一起，分装到无热原的仪器专用检测管内，每只检测管内 0.1ml（没有气泡）。2.4.3.2 加样 取稀释好的供试品溶液、供试品阳性溶液、阳性标准品溶液，根据所设定平行管数分别加入有鲎试剂的小试管中0.1ml或0.2ml （没有气泡），注意加样前应混合溶液30秒，且每个浓度加样前应更换加样头。另取细菌内毒素检查用水做阴性对照。243.3检测每个供试品在加完样后应立即用封口膜封口，放入细菌内毒素测定仪设定位置，仪器自动开始检测。试验完成后，点击【手动停止检测】，停止

13、数据采集。在【标准曲线】处选择标准曲线后，计算机自动计算出结果。244试验报告打印用鼠标点击【报告打印预览】，在报告打印预览画面点击【打印】即可。2.5多任务同时工作 EasyBET检测软件内毒素分析仪检测孔位足够时，可以同时进行多个试验。在一个试验完成设置后，可以重新开始另一个试验的设置。在试验运行过程中，还可以打开以前的试验数据进行分析查看。2. 6仪器参数设置在主画面中点击右上角的仪器温度显示图片，进入仪器设置画面， 在该画面中还可以对仪器作 3Q认证等试验，如图 9所示，选择仪器型号和通信端口，如果该 两项的内容错误将无法进行试验。根据所检测的供试品的颜色决定选择检测波长，如果为无色透

14、明的供试品选择 450nm如果供试品带有黄色可以选择660nm消除供试品颜色对检测的干扰。這理運讯硝口r氐澤焕剧出号恤测fife堤|C«nL二bETTZ冲UonzJ祜认晖比耐JT国1戟认用诫uMRflSp on3rl*和仗翻型弓-應后关闭斗：11面.跤S3图92.7 观察分析反应曲线在试验的过程中和试验结束后数据分析时可以观察每一个试管的反应曲线，图10中的反应曲线为内毒素标准品的正常反应曲线，如果供试品中存在的干 扰成分未被排除，它的反应曲线必定有所变化，该软件提供了多种曲线显示分析方法，其中反应速率法可以区别出供试品中是否有葡聚糖。另外，根据使用的不同鲎试剂，要适当调整显示幅度、零化期时间、预设OD直，以适应该种鲎试剂的反应特性。图103、仪器维护保养31 试管检测器的维护保养 测定仪主机的试管检测器是整个设备的关键， 保证检测孔内清洁至关重要， 避免尘土落 入，应及时将防尘盖盖好，如果有异物落入孔中应小心将其取出，避免赌塞光电检测孔。3 2 玻璃实验器材除热原的可靠方法a）将玻璃实验器材（试管、吸头等）放入重铬酸钾浓硫酸洗液中浸泡 4 个小时以上。b）取出实验器材用蒸馏水反复冲洗 8 遍，c）用“三效热原灭火剂”水溶液浸泡 12