番茄果实品质测定

1、可溶性糖含量测定（蒽酮法）材料仪器：分光光度计、天平、水浴锅、大试管、三角瓶、容量瓶100ml、量筒25ml、移液管5ml一支、1ml一支、小漏斗药品：标准葡萄糖溶液、准确城区无水葡萄糖200mg，放入200ml容量瓶中，加入蒸馏水定容 ，使用时稀释10倍（100ug/ml）蒽酮试剂：称取0.1g蒽酮溶于100ml稀硫酸中（76ml浓硫酸稀释成100ml），贮于棕色瓶内，冰箱保存，可用数日。方法1、葡萄糖标曲项目管号空白12345标准葡萄糖液/ml00.20.40.60.81蒸馏水10.80.60.40.20蒽酮试剂555555将各管摇匀，在沸水浴中煮沸10分钟，取出冷却，在620nm波长处比

2、色，以空白调零点，记录光密度值，绘制标准曲线。2、 样品中可溶性糖的提取 称取减碎新鲜样品0.51g，放入三角瓶50ml中，再加入25ml蒸馏水，放入沸水浴中煮沸20min，取出冷却，过滤入100ml容量瓶中，用热水冲洗残渣数次，定容至刻度。3、 测定项目管号空白12345样品提取液00.50.50.50.50.5蒸馏水10.50.50.50.50.5蒽酮试剂555555在分光光度计上比色，测出光密度值，在标曲上查出相应含糖量（ug）4、 结果计算可溶性糖含量%=【（糖含量（ug）×稀释倍数）/（样品质量×106）】×100有机酸测定仪器：天平、刀、研钵、漏斗、玻

3、璃棒、水浴锅、滴定管、滤纸、移液管10ml一支，容量瓶50ml、三角瓶50ml，量筒25ml1个药品：0.1mol/l氢氧化钠，1%酚酞，石英砂步骤1、 城区5g番茄果肉，放入研钵中，加少许石英砂研磨成匀浆，用蒸馏水洗入50ml三角瓶中，加水约30ml，放在80°水浴锅中浸提30分钟，每隔5分钟搅拌一次。取出冷却，过滤入50ml容量瓶中，并用蒸馏水洗残渣数次，定容至刻度，充分摇匀作测定用。2、 两区10ml样液放入50ml三角瓶中，加三滴酚酞指示剂，用0.1mol/l氢氧化钠滴定至微红色，摇1min不褪色为终点，取3次平均值计算结果有机酸含量=(a×0.1×k&#

4、215;c)÷(w×d)×100a滴定时消耗的氢氧化钠量，0.1=4×10-3 g/mlk=0.67c稀释总量w样品质量d测定时所取样液量ml抗坏血酸测定（2,6-二氯酚靛酚法）仪器 研钵、漏斗、玻璃棒、定量滤纸、滴定管、移液管、容量瓶、三角瓶药品 2%草酸溶液：溶解20g草酸结晶与200ml水中，然后稀释至1000ml。 200ml0.01% 2,6-二氯靛酚钠溶液：称区2,6-二氯靛酚钠60mg，放入容量瓶中，加热的蒸馏水100-150ml，滴加0.01mol/l的氢氧化钠4-5滴，强烈震动10分钟，冷却后加水至刻度，摇匀后用精密滤纸过滤于棕色瓶内，

5、贮于冰箱中备用。有效期一周。抗坏血酸标准溶液：准确称取20mg抗坏血酸，溶于2%草酸溶液中，定容至200ml，混匀，吸取比液10ml，再以2%草酸溶液稀释定容至200毫升。方法样品处理和提取城区适量5g样品置研钵中，加4毫升2%草酸，研磨成匀浆，用玻璃棒将样品提取液转移到50毫升容量瓶中，残渣用草酸洗2-3次和提取液一并转入容量瓶中，最后用2%草酸定容至刻度，摇匀过滤，滤液备用。空白的测定吸取10ml2%草酸，放入50毫升三角瓶中，用2,6-二氯靛酚钠溶液滴定至溶液呈粉红色于15秒内部褪色为止，记录所用滴定液体积（重复三次，取平均值）。2,6-二氯靛酚钠溶液滴标定吸取标准抗坏血酸溶液10ml，

6、放入50ml三角瓶中，立即用所要标定的2,6-二氯靛酚钠溶液滴定至溶液呈粉红色于15秒内不褪色，记录用滴定液体积（重复三次，取平均值）。按下式计算k值，k=××k为1ml2,6-二氯靛酚钠所能氧化抗坏血酸的质量，g为称取抗坏血酸的质量v滴定10毫升抗坏血酸溶液所用去2,6-二氯靛酚钠的体积与丁丁空白所用体积的差值。样品测定 吸取滤液10毫升，放入50毫升三角瓶中，立即用要标定的2,6-二氯靛酚钠溶液滴定至溶液呈粉红色于15秒内不褪色，记录用滴定液体积（重复三次，取平均值）。结果与分析x=×100x为100g样品中所含维生素含量（mg/100g）w为称取样品的质量（

7、g）；v样为滴定样品所用的2,6-二氯靛酚钠溶液的体积（ml），v滤为样品测定测定时所用滤液体积（ml）；v为样品提取液稀释之总体积，k为上k值。可溶性总糖的测定仪器：分光光度计；20ml刻度试管；刻度吸管（5ml，1ml）；记号笔；吸水纸适量试剂1、蒽酮乙酸乙酯试剂：取分析纯蒽酮1g，溶于50ml乙酸乙酯中，贮于棕色瓶中，在黑暗中可保存数星期，如有结晶析出，可微热溶解。2浓硫酸（比重1.84）材料与方法1标准曲线的制作葡萄糖标准曲线的制作取6支20ml试管，编号，按下表数据配置一些列不同浓度的标准葡萄糖溶液。在每管中均加入0.5ml蒽酮试剂，再缓慢加入5ml浓硫酸，摇匀后，打开试管塞，置沸水

8、浴中煮沸10分钟，取出冷却至室温，在620nm波长下比色，测各管溶液的光密度值，以标准葡萄糖含量为横坐标，光密度值为纵坐标，作出标准曲线。管号123456标准葡萄糖原液(ug)200ug/ml）00.20.40.60.81蒸馏水01.81.61.41.21葡萄糖含量（ug）040801201602002样品中可溶性糖的提取称取1克样品，研磨成匀浆，然后转入20ml刻度试管中，用10ml蒸馏水分次洗涤研钵，洗液一并转入刻度试管中，置沸水浴中加盖煮沸10分钟，冷却后过滤，滤液收集于100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，摇匀备用。3糖含量测定用移液管吸收1ml提取液于20ml具塞刻度试管中，加1m

9、l水合0.5ml蒽酮试剂，再缓慢加入5ml浓硫酸（注意：浓硫酸遇水会产生大量的热），盖上试管塞后，轻轻摇匀，再置沸水浴中10分钟（比色空白用2毫升蒸馏水与0.5毫升蒽酮试剂混合，并一同于沸水浴保温10分钟）。冷却至室温后，在波长620nm下比色，记录光密度值。查标准曲线上得知对应的葡萄含量（ug）。结果计算样品含糖量（g/100g鲜重）=考马斯亮蓝g-250染色法测定蛋白含量标准蛋白质溶液（100ug/ml牛血清蛋白）：称取牛血清蛋白25mg，加水溶解并定容至100ml，吸取上述溶液40ml，用蒸馏水稀释至100ml即可。4下保存备用。考马斯亮蓝g250溶液：称取100mg考马斯亮蓝g250，

10、溶于50毫升90%乙醇中，加入100ml85%（w/v）的磷酸，再用蒸馏水定容到1000毫升，贮于棕色瓶中。常温下可保存一个月。材料与方法标准曲线的绘制：取6支试管，编号后，按下表加入试剂，混合均匀后，向各管中加入5ml考马斯亮蓝g250溶液，摇匀，并放置2min后，以0号试管为空白管凋零，在595nm下比色测定吸光度（比色应在1h内完成）。以蛋白质含量为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制标准曲线。试剂管号012345标准蛋白质ml00.20.40.60.81蒸馏水量ml10.80.60.40.20蛋白质含量ml020406080100样品测定1） 样品提取：称取鲜样0.25g0.5g，用5ml蒸馏水研磨成匀浆后，3000r/min离心10分钟，上清液备用。2） 吸取样品提取液1ml（视蛋白质含量是当稀释），放入试管