雌激素对兔脊髓缺血再灌注损伤保护作用

1、雌激素对兔脊髓缺血再灌注损伤保护作用摘要目的探讨雌激素对兔脊髓缺血再灌注损伤 的神经保护效应。方法成年新西兰大白兔肾下腹主动脉钳 夹20min恢复再灌注。实验分组如下：control组（n=8）仅 行肾下腹主动脉钳夹20min恢复再灌注；sham组（n=8）行 对照组操作除外肾下腹主动脉钳夹；雌激素处理组（n=8） 分别在再灌注开始即刻经兔耳缘静脉给予雌激素200, 400, 800 u g/kgo再灌注后48h进行下肢神经功能评分（tarlov 法）后处死受试动物，取脊髓行组织he染色切片病理分析。 结果tarlov评分发现雌激素处理组神经功能评分明显高于 contro 1组（p0.05）。

2、手术过程中，直肠温度保持在38. 0 39.0°co肾下腹主动脉阻闭前后股动脉压力在各组间比较， 差异无统计学意义（p>0.05）表1。2. 2后肢运动功能评分术后动物无意外死亡。再灌注48h后，对照组动物后肢 运动功能评分显著低于雌激素处理组（p=0. 008）, e3组显著 高于e1组（p=0.026）, el、e2组比较差异无统计学意义， sham组后肢功能无障碍为4分（图1）。2.3病理学观察再灌注48h后，对照组脊髓前角光镜下可见正常神经元 数量明显减少，神经细胞缺血变性坏死严重，胞浆深染，有的细胞核固缩，核仁消失，细胞周围有空泡形成；正常神经 元数量显著少于雌激素处

3、理组（p=0.006）（图2）。而e3组 正常运动神经元较多，胞体呈多角形，核仁清晰，胞浆中尼 氏体清晰（图3）。3讨论本试验发现：在再灌注开始即刻，经兔耳缘静脉给予雌 激素200, 400, 800 ng/kg,可剂量依赖的增加脊髓前角运 动神经元数目，显著改善缺血后下肢功能障碍，减轻兔脊髓 缺血再灌注损伤。我们通过病理发现control组脊髓前角存在大量嗜伊红 染色的坏死神经元；雌激素治疗组坏死神经元明显减少。而 el, e2组脊髓前角正常运动神经元与e3组相比，差异有统 计学意义，神经功能评分也出现一致的结果。推测800 p g/kg 体内发挥较强的生物学作用，我们参考其他文献可知临时短

4、 暂应用此剂量雌激素未发现明显的副作用，可将其作为下步 深入研究雌激素作用机制的剂量。脊髓缺血再灌注损伤的主要机制是脊髓组织缺血后三 磷酸腺昔（atp）减少，细胞膜离子泵功能衰竭，钠离子内 流造成细胞水肿，溶酶体破裂引起谷氨酸等兴奋性氨基酸释 放增加，大量钙离子内流造成钙超载，激活多种酶类，生成 大量自由基，引起严重炎症反应，最终导致细胞组织水肿破 环血管痉挛阻塞，造成组织缺血再灌注损伤13-17 o以往的研究发现雌激素可减轻局部炎性反应，激活抗凋 亡系统。新近研究提示雌激素的神经保护可能通过线粒体途 径参与。线粒体是细胞氧化磷酸化中心，是细胞能量加工厂, 其功能的衰竭是细胞死亡扳机点。以往的

5、研究发现再灌注开 始后，线粒体内产生大量氧自由基，破环细胞呼吸链，造成 细胞能量衰竭而致死10。我们研究发现雌激素治疗组缺血 脊髓匀浆后检测，超氧化物歧化酶(s0d)活性明显增加， sod作为细胞内主要的自由基清除剂和抗氧化酶，其水平的 降低，提示其保护组织细胞受毒性氧自由基损伤的效能减弱 10-20。故推测雌激素减轻兔脊髓缺血再灌注损伤与其增 加sod水平，从而清除过量的氧自由基减轻损伤，发挥其保 护作用。下一步研究将从细胞，在体两个层面深入研究雌激 素的保护作用与线粒体损伤的关系。总之，雌激素可剂量依赖的减轻兔脊髓缺血再灌注损 伤，增加脊髓前角运动神经元数目，显著改善缺血后下肢功 能障碍。

6、参考文献1阎平键，王峥，刘建光，等依达拉奉对家兔脊髓 缺血再灌注损伤的保护作用j.神经损伤与功能重建， 2012, 7 (3)： 186-188.2方波，赵曦，王赫，等.缺血预处理对兔脊髓缺血 再灌注损伤水通道蛋白-4表达的影响j.中国组织化学与 细胞化学杂志，2013, 22 (2)： 121-125.3 邓姣，丁倩，谷秋寒，等长期重复髙压氧预处理 对兔脊髓缺血再灌注损伤的作用c. 2009国际麻醉学基础 与临床研究论坛，2009： 125.4 宋文英，陈琼，熊利泽，等.缺血后处理上调内源 性抗氧化物酶活性诱导兔脊髓保护效应j.中华医学杂志， 2008, 88 (33)： 2355-2359

7、.5 姚俊岩，翁浩，张兰，等脊髓缺血再灌注损伤模型 的改进及脊髓耐受缺血时限的研究j.四川大学学报(医学 版)，2007, 38 (3)： 497-500.6 garcia-segura lm , azcoitia i , doncarlos ll. neuroprotection by estradioljprog neurobiol, 2001, 63 (1)： 29-60.7 darrell w. brann , krishnan dhandapani , chandramohan wakade , etal. neurotrophic andneuroprotective action

8、s of estrogen： basic mechanisms and clinical implicationsjsteroids, 2007, 72 (5)： 381-405.8 meharvan singh , james a. dykens , james w. simpkins novel mechanisms for estrogen-induced neuroprotectionj. exp biol med, 2006, 231： 514-521.9 christoph harms , marion lautenschlager , alexandra bergk, et al

9、. differential mechanisms of neuroprotection by 17- estradiol in apoptotic versus neerotic neurodegenerationj. the journal of neuroscience, 2001, 21 (8)： 2600-2609.10 高鹏，熊利泽，路志红，等.缺血后处理对兔脊髓 缺血-再灌注损伤中mda和sod的影响j.第四军医大学学 报，2006, 27 (14)： 1273-1275.11 陈琼，王强，熊利泽，等七氟烷后处理对氧自由 基介导减轻兔脊髓缺血再灌注损伤的作用j中华医学杂 志，20

10、08, 88 (27)： 1916-1920.12 邓姣，丁倩，熊利泽，等不同高压氧预处理方案 对兔脊髓缺血再灌注损伤的影响j.中华麻醉学杂志， 2009, 29 (11)： 1036-1039.13 杨小玉，朱庆三，赵立君，等脊髓缺血-再灌注 损伤细胞间粘附分子t及白细胞介素tb的表达j.中国 脊柱脊髓杂志，2004, 14 (3)： 167-170.14 陈及非，阎作勤，龙作林，等.脊髓缺血再灌注损 伤后神经细胞凋亡的实验研究j.中国临床医学，2008, 15(6)： 772-774.15 安国尧，张俐.nf-kb及vcam-1在脊髓缺血再灌 注损伤中的作用及机制j.中国中医骨伤科杂志，2012, 20(12)： 73-75.16 周青珍，阎平建，韩琦，等法舒地尔对家兔脊髓 缺血再灌注损伤的影响j.卒中与神经疾病，2012, 19 (5)： 270-272.17 凡进，任永信，蔡卫华，等.兔脊髓缺血再灌注损 伤时bcl-xl/bcl-2相关死亡启动因子的变化及其意义j. 中国脊柱脊髓杂志，2011, 21 (2)： 142-147.18 胡胜，熊利泽.远程缺血预处理研究进展j.上海 医学，2010, 33 (6)： 598-601.19 田丽颖，吕苗苗，张玉明，等.hif-1 a基