糖类脂肪蛋白质核酸的鉴定实用教案

1、（一）生物组织（一）生物组织(zzh)中可溶性还原糖的中可溶性还原糖的鉴定鉴定1. 1. 实验原理实验原理 当质量浓度为当质量浓度为0.1g/mL0.1g/mL的氢氧化钠溶液与的氢氧化钠溶液与质量浓度为质量浓度为0.05g/mL0.05g/mL的硫酸铜溶液混合后，立即的硫酸铜溶液混合后，立即生成生成(shn chn)(shn chn)淡蓝色的淡蓝色的Cu(OH)2Cu(OH)2沉淀。沉淀。 Cu(OH)2Cu(OH)2与葡萄糖、果糖、麦芽糖等可溶性还原糖与葡萄糖、果糖、麦芽糖等可溶性还原糖共热，能够生成共热，能够生成(shn chn)(shn chn)砖红色的砖红色的Cu2OCu2O沉淀。沉淀

2、。因此，利用该反应，可证明样液中含可溶性还原因此，利用该反应，可证明样液中含可溶性还原糖。糖。CH2OH-(CHOH)4-CHO+2Cu(OH)2CH2OH-(CHOH)4-COOH+Cu2O+2H2O第1页/共19页第一页，共19页。2 2 实验目的实验目的(md)(md) 初步掌握鉴定生物组织中可溶初步掌握鉴定生物组织中可溶性还原糖的基本方法。性还原糖的基本方法。3 3 实验材料实验材料 做可溶性还原糖的鉴定实验，还做可溶性还原糖的鉴定实验，还原糖的含量、生物组织有无色素是影响实验原糖的含量、生物组织有无色素是影响实验结果结果(ji gu)(ji gu)及其观察的最重要因素。及其观察的最重

3、要因素。 因此要选用可溶性还原糖含量高、白色或近于(jn y)白色的植物组织，其中以苹果、梨最好，也可用白萝卜替代。第2页/共19页第二页，共19页。4 4 试剂配制试剂配制 甲液（甲液（0.1g/mL0.1g/mL的氢氧化的氢氧化钠钠(qn yn hu n)(qn yn hu n)溶液）溶液）斐林试剂斐林试剂 乙液（乙液（0.05g/mL0.05g/mL的硫酸的硫酸铜溶液）铜溶液）甲、乙试剂千万要分开放，不可混合(hnh)。在实验过程中，将4-5滴乙液滴入2mL甲液中现混现用！第3页/共19页第三页，共19页。5 5 实验实验(shyn)(shyn)步骤步骤（1 1）制备组织）制备组织(zz

4、h)(zzh)样液样液（教师制备）（教师制备）（2 2）鉴定）鉴定(jindng)(jindng)样液样液先在试管中加入2mL组织样液第4页/共19页第四页，共19页。再加入(jir)2mL刚配制的斐林试剂水浴(shu y)煮沸2分钟注意观察整注意观察整个实验过程个实验过程中，溶液颜中，溶液颜色色(yns)的的变化！变化！第5页/共19页第五页，共19页。（二）生物（二）生物(shngw)组织中脂肪的鉴组织中脂肪的鉴定定1 1 实验原理实验原理 苏丹苏丹是可以对脂肪染色的试是可以对脂肪染色的试剂，因此，当含有剂，因此，当含有(hn yu)(hn yu)大量油滴的植大量油滴的植物细胞用苏丹物细胞

5、用苏丹染色后，在显微镜下可以看染色后，在显微镜下可以看到细胞内橘黄色的颗粒。到细胞内橘黄色的颗粒。2 2 实验目的实验目的 初步初步(chb)(chb)掌握鉴定生物组织中脂肪掌握鉴定生物组织中脂肪的基本方法的基本方法第6页/共19页第六页，共19页。3 3 实验材料实验材料(cilio)(cilio) 做脂肪的鉴定实验时，所用材料做脂肪的鉴定实验时，所用材料(cilio)(cilio)一要脂肪含量高，二要有一定大小才能做徒手一要脂肪含量高，二要有一定大小才能做徒手切片，花生种子符合该实验的要求。切片，花生种子符合该实验的要求。 将花生种子经过将花生种子经过3-43-4小时的浸泡使其变软，小时的

6、浸泡使其变软，有利于切成薄片；但浸泡时间也不宜过长，否有利于切成薄片；但浸泡时间也不宜过长，否则切片时易碎裂，切不成薄片。则切片时易碎裂，切不成薄片。4 4 试剂配制试剂配制 苏丹苏丹溶液：将溶液：将0.1g0.1g苏丹苏丹干粉溶于干粉溶于100mL100mL体积分数体积分数(fnsh)(fnsh)为为95%95%的酒精溶液中，的酒精溶液中，待全部溶解后即成。待全部溶解后即成。第7页/共19页第七页，共19页。5 5 实验实验(shyn)(shyn)步骤步骤（1 1）切片）切片(qi pin)(qi pin)制作制作去掉(q dio)花生种皮用左手的三个手指夹住花生的一片子叶，使花生子叶高于手

7、指之上（为什么？）。右手持刀片，将子叶削去一层，形成平面。刀口向内，与花生断面平行，以均匀的动作，自左前方向右后方快速拉刀，滑行切片（注意要整个臂部用力，而不要腕部用力。）如此连续动作，切下一些薄片。第8页/共19页第八页，共19页。（2 2）染色）染色(rns)(rns) 用毛笔将最 薄的几片材料移至洁净的载玻片的中央滴苏丹溶液2-3滴于花生子叶(zy)薄片上2-3min后，吸去染液滴50%的酒精洗去浮色吸去多余酒精再滴1-2滴蒸馏水盖上盖玻片，制成临时装片。（3 3）镜检鉴定）镜检鉴定(jindng)(jindng) 在低倍镜下观察，找到花生子叶切片的最薄处（），移至视野的中心换用高倍镜观

8、察，调焦至最清晰。可发现细胞内橘黄色的圆形小颗粒，这就是脂肪滴（油滴）。若发现观察物外围也有许多橘黄色小颗粒，则是脂肪跑了出来。第9页/共19页第九页，共19页。（三）生物（三）生物(shngw)组织中蛋白质组织中蛋白质的鉴定的鉴定1 1 实验原理实验原理 在碱性溶液（在碱性溶液（NaOHNaOH）中，双缩脲）中，双缩脲（H2NOC-NH-CONH2H2NOC-NH-CONH2）能与）能与Cu 2+Cu 2+作用，形作用，形成紫色的络合物，这个成紫色的络合物，这个(zh ge)(zh ge)反应叫反应叫做双缩脲反应。做双缩脲反应。 由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此(ync)

9、，蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反应。第10页/共19页第十页，共19页。2 2 实验目的实验目的(md)(md) 初步掌握鉴定生物组织中蛋白质的基本方法。初步掌握鉴定生物组织中蛋白质的基本方法。4 4 试剂试剂(shj)(shj)配制配制 A A液（液（0.1g/mL0.1g/mL的氢氧化钠的氢氧化钠溶液）溶液）双缩脲试剂双缩脲试剂(shj)(shj) B B液（液（0.01g/mL0.01g/mL的硫酸铜溶的硫酸铜溶液）液）3 3 实验材料实验材料 做蛋白质的鉴定实验，一般选用蛋白质做蛋白质的鉴定实验，一般选用蛋白质含量含量(hnling)(hnling)较高的大豆或鸡蛋白。较高的大豆或鸡

10、蛋白。第11页/共19页第十一页，共19页。5 5 实验实验(shyn)(shyn)步骤：步骤：（1 1）制备生物）制备生物(shngw)(shngw)组织样液组织样液（教师制备）（教师制备）（2 2）鉴定）鉴定(jindng)(jindng)先加2mL组织样液再加2mL双缩脲试剂A液加3-4滴双缩脲试剂B液注意观察溶液中颜色的变化？第12页/共19页第十二页，共19页。1、下列关于实验一操作步骤的叙述中，正确的是（ ） A、用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定 B、脂肪的鉴定需要用显微镜才能(cinng)看到被染成橘黄色的脂肪滴 C、鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林

11、试剂甲液摇匀后，再加入乙液 D、用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后，再加入含样品的试管中，且必须现混现用 B第13页/共19页第十三页，共19页。2、在生物组织中可溶性还原糖、脂肪(zhfng)、蛋白质的鉴定实验中，对实验材料的选择叙述中，错误的是 （ ） A、甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等，都含有较多的糖且近于白色，因此可以用于进行可溶性还原糖的鉴定 B、花生种子含脂肪(zhfng)多且子叶肥厚，是用于脂肪(zhfng)鉴定的理想材料 C、大豆种子蛋白质含量高，是进行蛋白质鉴定的理想植物组织材料 D、鸡蛋清含蛋白质多，是进行蛋白质鉴定的动物材料 A第14页/共19页第十四页，共

12、19页。3、将三个鉴定实验与其使用的试剂和结果之间用直线(zhxin)连接起来。 可溶性还原糖 斐 林 试 剂 紫 色 脂 肪 双缩脲试剂 橘黄色 蛋 白 质 苏 丹 砖红色 NH2 | 4 、实验可知，在尿素（O=C）溶液中加入双缩脲试剂，也能产生紫色反应。依据蛋 |白质(bizh)鉴定实验原理说明之。 NH2 第15页/共19页第十五页，共19页。实验(shyn)： 观察DNA和RNA在细胞中的分布实验原理(yunl)：甲基绿使DNA呈现绿色 派洛宁使RNA呈现红色 盐酸水解能改变细胞膜的通透性，加速染色剂 进入细胞，使染色体的DNA和蛋白质分离实验材料： 口腔上皮细胞第16页/共19页第十六页，共19页。实验(shyn)步骤：A.取口腔(kuqing)上皮细胞 载玻片上滴0.9 NaCl牙签(yqin