Aranesp 调研报告

1、Aranesp调研报告完成时间：2014年12月6日 调研人员： 班 级： 学 号：目 录1药物信息概况表12靶点背景知识介绍（包括但不限于以下方面）12.1靶点分子结构12.2靶点生物学功能12.3其它23与该靶点相关的疾病情况（发病率、治疗药物）34药物知识34.1药物结构设计34.2药物作用机理35药物临床前药理研究结构45.1药效学结果45.2药代动力学结果4 5.3非临床安全性结果56药物临床研究结果56.1I期临床结果56.2II期临床结果56.3III期临床结果57结语61 药物信息概况表NO药品名称靶点药物设计研发公司适应症研发阶段14darbepoetin alfa（阿法达贝

2、泊汀，Aranesp ）EPO受体（EPOR）促红细胞生成蛋白 Amgen Inc伴随非骨髓样恶性肿瘤、贫血症、恶性肿瘤2001(FDA)2 靶点背景知识介绍（包括但不限于以下方面）2.1 靶点分子结构 EPO是肾脏分泌的一种活性糖蛋白。血浆中存在的EPO其肽链是由165个氨基酸组成，在其24、38、83号为点分别为天冬氨酸，糖链以及N糖肽键与天冬酰胺相连-GlcNAC-Asn-X-Thr/Ser,在其肽键165位点的氨基酸以O糖肽链相连，为-GalNAC-O-Thr/Ser-。糖链占其糖蛋白相对分子质量的40%左右，其N肽糖链主要由10-15个单糖单位构成，有一共同核心五糖区域，其

3、余糖链主要以四天线复杂型为主，有部分三天线型与二天线型。不同的糖链构型使其糖蛋白具有不同的生物活性，四天线复杂性的活性最高，后来发现四天线复杂型与肾脏过滤减少与EPO的归巢有关。其糖链末端唾液酸残基能被唾液酸酶（又称神经氨酸酶）水解，进而使暴露的半乳糖残基与肝脏内的半乳糖特异性识别受体结合被水解。根据碳水化合物含量不同，天然存在的EPO分成两种类型：型与型。型碳水化合物含量占34%，型碳水化合物含有26%类。两种类别在生物学特性、抗原性以及临床效果上均相同。2.2 靶点生物学功能 EPO是肾脏产生的糖蛋白，主要作用于红系祖细胞，促进其增殖与成熟。在红细胞生成的过程中EPO主要与其它生长因子，如

4、肝细胞生长因子（SCF）、胰岛素生长因子（CIGF-1）共同协同作用于未成熟的红系祖细胞。EPO主要作用于红系祖细胞的增殖期与分化期，通过刺激其有丝分裂、激活红细胞特异基因，进而使红细胞大量增殖与分化，EPO还能特性型阻断红系祖细胞从红细胞集落形成单位细胞（CFU-E）到早幼红细胞阶段的正常细胞凋亡，促使红系祖细胞的生长与繁殖。EPO主要用于肾功能衰竭有关的贫血、肾小球间质细胞功能下降造成的骨髓造血干细胞功能减弱。EPO及其受体激动剂常用于伴有骨髓抑制的慢性肾炎或癌症患者以及危重病人提高血红蛋白水平和避免输血，但同时也潜在增加了深静脉血栓的风险。  EPO对巨核细胞的生长也具有一定的

5、作用，实验中单独或与血小板生成素（TPO）一起均可以刺激巨核细胞集落成单位细胞以及胞质裂解形成血小板。2.3 其它 2.3.1 EPO受体 人EPOR的基因位于19号染色体上，裸肽分子质量为55KDa，糖基化后为66KDa,由508个氨基酸残基组成（包括24个氨基酸残基的是失导序列）。人的EPO受体位于红系祖细胞的细胞膜表面，由膜外区跨膜区与胞内区组成。胞质部分缺少酪氨酸激酶的特征排列顺序，所以不具备酪氨酸激酶活性。在靠近跨膜区有BOX1和BOX2两个同源盒，BOX1是EPOR与酪氨酸激酶相联系的部位，跨膜区区域由24个疏水氨基酸构成，细胞外部分由4个保守型半胱氨酸基组成的结构区和WSXWS（

6、Trp-Ser-X-Trp-Ser）构型，与某些细胞白细胞介素同属一个受体家族，在转导机制上有一定的共性。  目前已知能表达EPO受体的细胞主要为：红系干细胞、巨核细胞干细胞。另外已经发现EPO还可作用于中枢神经细胞上的EPOR。近年来，已在非红系血细胞和非造血干细胞中发现了EPO的功能性受体，如髓系心肌细胞、平滑肌细胞等。由于EPO能特异性的作用于EPOR从而发挥一定的生理活性，可见EPO在一些功能性疾病的治疗中有很大的作用。 2.3.2  EPO受体的信号转导机制 EPO作用于EPO受体后，EPOR在其胞外部分一个20个氨基酸组成的片段引导下发生同源二聚体反应。JAK激

7、酶家族是一组非受体型酪氨酸激酶，主要与EPO受体胞质部分靠近细胞膜的区域相连，家族主要包括JAK1、JAK2、JAK3、TYK2，其中JAK2对EPOR的活化有直接作用，当EPO与EPOR结合时，JAK2自身发生磷酸化反应而被活化。活化的JAK2首先将EPOR的酪氨酸残基磷酸化，继而使之具有SH2区域。JAK被激活后主要作用于受体的胞浆部分，使羧基末端两个酪氨酸残基磷酸化而改变其构型，并且暴露出剪切酶作用位点，进入细胞核，识别位于靶基因启动区的特定碱基序列并启动转录。目前已知的EPO受体介导激活的STAT为STAT-5，靶基因为CIS。  除JA2/STAT5途径外，已经正式的信号转

8、导途径还包括：1，EPOR-JAK2- PBK (磷脂酰肌醇-3-激酶) 途径；2，EPOR-JAK2-ERKs（胞外信号调节激酶-1，2）途径；3，EPOR-JAK2-NF-KappaB (核因子KappaB) 途径；4，EPOR-JAK2-Ras (Rasd蛋白)-MAPK (有丝分裂原活化蛋白) 途径等。3 与该靶点相关的疾病情况（发病率、治疗药物） 肾性贫血：非透析慢性肾脏病(CKD)患者贫血的发病率为40%60%；透析患者为70%90%；.98.91%准备进入透析的患者发生贫血。治疗药物：rhEPO（重组人促红细胞生成素）等促红细胞生成素类药物，补充造血原料：叶酸，VitB12，铁剂

9、。 肿瘤相关性贫血: 患病率为10%40%。治疗药物：促红细胞生成素、益中生血胶囊、补充造血原料；抗凝，减少血小板的消耗与预防血栓形成；抗溶血治疗。 骨髓移植相关贫血：患者肾移植当时以及其后5年贫血的患病率分别为45.5%，10.7%，9.6%，14.8%，13.5%及19.6%。患者在5年内至少出现一次贫血，其中42%经历过贫血的再发。 治疗药物：FG-2216，Aranesp4 药物知识4.1 药物结构设计 阿法达贝泊汀实是阿法依泊汀的改进型产品，其结构较之阿法依泊汀的重要差异在于它带有两个含烃链唾液酸，故半衰期无论是静脉、抑或皮下注射都延长了2倍，十分有利于简化给药方案，临床上可每2周、

10、甚或每3周用药1次。 4.2 药物作用机理 神经保护作用：在脑血管循环中，Aranesp生物活性与NO合成酶的活性相一致。研究表明，Aranesp增强了由NO介导的内皮依赖性血管舒张作用。  EPO是近年来发现的一种具有神经保护作用的细胞因子 它可以通过与EPO-R结合激活一系列酶，启动信号转导发挥抗氧化应激，调节炎症反应等对神经元起保护作用。EPO对神经元发挥保护作用一种可能机制是抗氧化EPO能通过抑制NO介导的自由基引发的细胞毒发挥保护细胞作用。EPO可增加抗氧化酶，超氧化歧化酶，谷胱甘肽还原酶，过氧化氢酶等的活性保护神经元。EPO还能增强NO的扩血

11、管作用，明显缓解血管挛缩，并能直接作用于血管内皮细胞，促进血管新生在解血部位建立侧枝循环，这些作用都有助于改善局部缺血状况，有助于缺血部位神经细胞的存活。 对心脏的作用：EPO是一种多效细胞因子，不仅能够刺激肾小球间质细胞产生红细胞，抑制祖系细胞的凋亡，而且对于由于缺血造成的心脏损伤有很好的修复作用。EPO通过促进新血管的形成和减少梗塞面积和抑制细胞凋亡，进而保护心脏组织免受缺氧、毒素及氧化应激诱导损伤的效能。临床上为心肌梗死的预防和治疗提供了新的研究。  抑制炎症 ：YannEC等研究表明，EPO通过抑制红细胞膜表面炎症因子FAS和TNF-的表达，阻止了感染性休克患者的红

12、细胞程序性凋亡，改善了贫血症状。另有实验证明，EPO对于正常细胞的凋亡并无直接抑制作用，而是通过直接作用于引起炎症的因子，降低正常细胞对炎症因子的效应，进而促进正常细胞的正常功能代谢。例如Aranesp对于甲状腺细胞本身并无直接作用，而是通过抑制炎症因子以及炎症反应来调节甲状腺激素的正常分泌。  促进肠粘膜发育：EPO主要作用于位于小肠粘膜内表面的EPO受体，促进肠粘膜增生与发育，继而改善小肠对一些脂类和氨基酸类物质的吸收功能。但口服Aranesp只对肠粘膜起到促进发育的功能，并不能治疗由于肠癌引起的贫血。5 药物临床前药理研究结果5.1药效学结果 药理：促红细胞生成素是由肾脏分泌的

13、一种活性糖蛋白，作用于骨髓中红系造血祖细胞，能促进其增殖、分化。Aranesp能经由后期母红细胞祖细胞（CFU?/FONT>E）引导出明显的刺激集落的生成效果。在高浓度下，Aranesp亦可刺激早期母红细胞祖细胞（BFU?/FONT>E）而引导出集落的形成。研究证实EPO2R表达与肿瘤浸润有关，且主要表达在低氧区肿瘤细胞坏死区域附近和肿瘤浸润的边缘，阻断该受体能明显减小肿瘤的体积。动物实验表明，EPO能增加肿瘤细胞对放疗和化疗的敏感性。小鼠肺癌模型的研究表明EPO和抗癌药物间有协同作用，能进一步增强其抗癌活性。 不良反应： 1.一般反应：少数病人用药初期可出现头疼、低热、乏力等，个

14、别病人可出现肌痛、关节痛等。绝大多数不良反应经对症处理后可以好转，不影响继续用药，极个别病例上述症状持续存在，应考虑停药。 2.过敏反应：极少数患者用药后可能出现皮疹或荨麻疹等过敏反应，包括过敏性休克。 3.心脑血管系统：血压升高、原有的高血压恶化和因高血压脑病而有头痛、意识障碍、痉挛发生，甚至可引起脑出血。因此在红细胞生成素注射液治疗期间应注意并定期观察血压变化，必要时应减量或停药，并调整降压药的剂量。 4.血液系统：随着红细胞压积增高，血液粘度可明显增高，因此应注意防止血栓形成。 5.肝脏：偶有GOT、GPT的上升。6.胃肠：有时会有恶心、呕吐、食欲不振、腹泻等情况发生。5.2药代动力学结

15、果 皮下注射给药吸收缓慢，2小时后可见血清红细胞生成素浓度升高，血药浓度达峰值时间为18小时，骨髓为特异性摄取器官，药物主要为肝脏和肾脏摄取。红细胞生成素给药后大部分在体内代谢，动物（大鼠）实验表明，除肝脏外，还有少部分药物在肾、骨髓和脾脏内降解。肾脏不是红细胞生成素的主要排泄器官，使用红细胞生成素的贫血患者，药物以原形经肾脏排泄的量小于10%。5.3非临床安全性结果 急性毒性：对小鼠、大白鼠及狗静脉注射的LD50和对生后4天的大白鼠幼鼠注射的LD50，均在20000IU/kg以上。 亚急性毒性、慢性毒性: (1)大白鼠: 雌、雄大白鼠分别在4周、13周及52周间施行静脉注射或腹腔注射本品所做

16、的亚急性、慢性毒性实验结果显示，4周、13周及52周间分别以本品按体重80IU/kg/天、20IU/kg/天以上以及10IU/kg/天以上投与时主要由于本品的药理作用过剩而引起了多血症，且长期投与的结果会出现骨髓的纤维化发生。(2)狗: 雌、雄狗分别在4周、13周及52周间施行静脉注射所做的亚急性、慢性毒性实验结果显示，4周、13周及52周间分别以本品按体重200 IU/kg/天、100 IU/kg/天以上以及20 IU/kg/天以上投与时主要由于本品的药理作用过剩而引起了多血症，且长期投与的结果会出现骨髓的纤维化发生，及肾脏的结构变化发生。6 药物临床研究结果6.1 I/II期期临床结果 对

17、163名肿瘤相关贫血患者进行双盲安慰剂对照临床I/II期进行实验，结果表明，该药物和安慰剂相比，提高血红蛋白水平高且迅速。6.2 III期临床结果 在澳大利亚，加拿大，欧洲进行1500名与贫血相关的肾衰患者进行临床III期实验，对522名患者的初步分析表明，阿法达贝泊汀有红细胞生成促进作用且安全。 临床上，阿法达贝泊汀有时被用于非化疗引起的贫血患者，为了验证其有效性和安全性，一项大型、多中心、随机、安慰剂对照的研究被进行，该研究共纳入989例未接受化疗或放疗的活动期恶性肿瘤患者，60%的患者为疾病晚期。 结果显示，阿法达贝泊汀组16周内红细胞输注率为18%，而安慰组剂为24%，两组比较无统计学差异(P=0.15，危险比0.89)；治疗组绝对死亡率高于安慰剂组(49%对46%，风险比1.25)。  因此，FDA告诫医务人员，阿法达贝泊汀的适应人群为因化疗所致贫血及产品说明书的适应证，而不应标签外用药。 安进公布其抗贫血药物阿法达贝泊汀在一治疗心衰的三期临床实验失败。流行病学研究显示贫血是心衰的一个独立风险因素而阿法达贝泊汀自2001年起就已上市用于治疗贫血，所以这个实验的理论基础是通过阿法达贝泊汀的增加血红蛋白浓度疗效改善心衰。这个治